提高山区肉牛冻精人工授精受胎率的方法

杨 延

（湖南省绥宁县长铺子苗族侗族乡农业综合服务中心，湖南 邵阳 422600）

中国肉牛业发展过程中，供需不平衡问题较为显著。虽然肉牛存栏量呈现出稳定增长的态势，但仍无法满足市场需求。中国每年肉牛产量高达600万t 以上，但每年还需从国外进口200 万t 左右的牛肉，肉牛养殖发展空间大。为增强肉牛产业发展的稳定性，解决部分地区冻精授精应激大、成本高、人工不足、交通不便等问题，部分地区采取上门提供冻精人工授精的方式，通过冻精服务改良，提高冻精人工授精受胎率，推动肉牛养殖业健康、持续发展。

1 山区肉牛养殖中冻精人工授精分析

在市场需求刺激下，中国肉牛养殖业不断呈现出规模化发展趋势，部分地区散养户数量减少，建设了一些规模化养牛场，诞生了部分养牛大户。在青贮技术逐步推广与应用、国家环境保护政策推行下，肉牛养殖主要采用圈养方式。由于传统授精方法肉牛受胎率低，采用冻精人工授精方法，不仅能节约授精成本，还能实现肉牛养殖的精准繁育［1］。然而部分山区冻精冷配点距离较远，驱赶适龄母牛到冻精冷配点授精易产生应激反应，且需付出较高配种时间及资金成本，导致部分地区肉牛冻精受胎率较低，制约了肉牛养殖业的发展。虽然部分地区已采取人工上门服务的方式，为部分山区养殖户实施冻精授精服务，然而在冻精存储管理、人工输精操作等原因影响下，人工受胎率仍不高，需要结合影响冻精人工授精受胎率的影响因素，探寻具体的改良措施，有效提高冻精人工受胎率。

2 肉牛冻精改良受胎率的主要影响因素

2.1 饲养管理方式欠佳、母牛营养不良

部分山区的养殖户专业知识不扎实，对母牛配种时机的把控能力不强，肉牛养殖中所采用的饲养管理方式也不科学，导致肉牛因营养不均衡而出现了发情期提前或延后的现象，甚至部分母牛长时间不发情，或是配种成功率低，导致肉牛冻精人工授精的受胎率受到了影响［2］。母牛营养状况决定着受胎率的高低，所提供的饲草量不充足，饲料营养成分不均衡，导致母牛体内矿物质不足或缺少维生素等成分降低母牛机体免疫力，影响母牛的卵巢功能，因卵巢静止、变硬或出现囊肿等原因，导致母牛卵巢机能受损，从而出现母牛不发情现象，人工授精时受胎率下降。

2.2 输精时间把控不准、解冻及输精操作不规范

肉牛冻精人工授精过程中，冻精的质量、冻精解冻过程的规范性、解冻时间的长短均会影响肉牛冻精人工授精的受胎率。母牛受胎能否成功，还与输精时间的选择是否正确、输精技术是否规范存在直接关联。部分地区冻精人工授精需要养牛户将母牛驱赶至冻精冷配点授精，在山区交通因素影响下，错过母牛发情期，从而错失最佳的输精时间。在经过远距离行走后，母牛体力消耗大，排卵期可能出现异常现象，若此时强行输精，会对母牛子宫产生损伤，甚至导致授精失败。部分地区在转移冻精时，冻精离开液氮的时间过长，或是解冻冻精时，存在操作失误或解冻温度及时间不适合等问题，均会降低冻精的活性，在输精时可能会出现精液外溢或数量不足等问题，影响冻精人工授精的受胎率。

2.3 母牛体质不佳、患有多种疾病

母牛的身体素质不佳，存在先天性或后天性缺陷，如子宫发育畸形或子宫发育不良等问题，或母牛卵巢先天较小或子宫颈口闭锁，这些繁殖性疾病将会导致母牛难以受胎［3］。母牛身体过胖或过瘦影响其排卵功能的正常发挥，也会降低冻精人工授精的受胎率。母牛患有子宫炎、阴道炎或卵巢囊肿等疾病，会对其排卵、输精产生影响，部分母牛虽能正常输精，但授精过程不顺畅，导致受胎后无法正常发育，妊娠过程中出现死胎等现象。

3 提高山区肉牛冻精人工授精受胎率的方法

3.1 优化肉牛饲养管理、加强母牛营养均衡性

由于母牛摄取营养是否充足、均衡与母牛配种受胎率存在关联，因而冻精人工授精时，加强饲养管理是提高受胎率的重要方法。首先要保障母牛营养供应充足，并要均衡搭配蛋白质、矿物质以及维生素等各类营养成分，以免母牛的繁殖性能受到影响。母牛饲养过程中，要优化饲养环境，特别是夏季高温时要加强牛舍温度调控，避免母牛由于温度过高而产生热应激反应，影响母牛正常排卵，导致母牛出现迟配或漏配现象，降低母牛冻精人工授精的受胎率。还需要加强母牛繁殖管理，对养殖场肉牛群体的结构进行合理优化，一旦发现母牛繁殖能力不佳应立即淘汰，并及时引进或培育后备青年母牛，且要科学制定肉牛冻精人工授精配种计划，做到肉牛生产管理的规范化、有序化开展。

3.2 加强肉牛冻精人工授精过程控制、提升技术操作规范性

3.2.1 保证冻精质量 冻精人工授精中，冻精质量决定着母牛受胎率，提高冻精人工授精受胎率需要加强冻精质量管理。首先要做好前期准备工作，冻精引进地应为国家正规供精站，并且需要按照本地要求严格筛选种牛冻精。冻精人工授精时辅助材料需要从正规生产单位引进，符合规定要求。根据中国冻精质量规定，优质冻精的标准是解冻活力高于35%、畸形率低于20%，低于该标准的冻精不得引进、存储与利用［4］。通过加强冻精质量控制，为母牛受胎率提供优质精子。

3.2.2 加强冻精存储管理

1）定期清洗液氮罐。为避免精子存储过程中活性降低或遭到病菌侵袭，应在存储冻精之前全面清洗液氮罐，安排专人管理液氮罐，做好真空抽气阀、颈管等结构保护，避免强力撞击液氮罐，移动液氮罐时不可在地上拖拽，应离地搬运，并且要做到轻拿轻放。每年至少清洗1 次液氮罐，以提高罐身的洁净度，避免颗粒物进入罐中导致冻精受到污染。清洗液氮罐时，需先将其中存储的液氮倒出并放于其他液氮罐中，空罐静置2 h，待罐内温度升高到规定要求后方可利用中性洗涤液清洗。

2）选择合适的存储空间及密封材料。存储冻精的液氮罐应放置于阴凉通风处，确保存储环境较为干燥，防止液氮罐被阳光直射，液氮罐应存储于单独房间，避免温度升高导致液氮气化，或是影响工作人员的身体健康。工作人员不可在液氮罐存放空间吸烟或酗酒，避免精子受损而降低活性，导致母牛受胎率下降。存储过程中，要对冻精活力进行定期检查。按照规定要求，精子存活率不得低于60%，若低于这一标准不可用于人工授精［5］。由于液氮气化后体积会快速变大，最高可达到原来的650 倍左右，为防止液氮罐爆炸，需要采用透气性强的材料密封液氮罐，禁止应用密度较高的塑料膜薄，防止由于液氮罐内部及外部气压不稳定导致罐体爆炸。

3）做到液氮及时补充及管理。为保障冻精存活率达到标准，无论是细管冻精还是颗粒冻精均要完全浸泡在液氮内，且要确保罐体内液氮量充足，需要利用科学有效的方法测量液氮量，以确保液氮与冻精充分接触。如先称量液氮罐质量，再称量灌满液氮后整个罐体的总质量，在液氮消耗期间，每日称量液氮罐质量，了解液氮的日消耗量，若液氮量不足灌满的30%，需要立即补充。同时，还可利用竹木棍作为测量工具，将之插入到液氮罐底部，查看竹木棍上结霜高度，确定液氮罐的液氮含量，以便于及时补充液氮，保证冻精质量。由于冻精存储时有较高的温度要求，液氮温度应控制在-196 ℃左右，并做好标记，以提高液氮罐管理的便利性。

3.2.3 控制好冻精解冻时间及温度

冻精人工授精前，需要提前解冻，对精子存活数量与输精规定是否相符进行查验。若精子存活率不足60%，立即实施补精处理。冻精用36～40 ℃的温水或解冻液进行解冻，时间应控制在5～10 s，冻精离开液氮的时间应不超过10 s，若5 s 内未完成从液氮罐中取出冻精的操作，应重新将冻精在液氮中放置3 s 以上再取出［6］。解冻后，用餐巾纸包裹冻精，置于工作人员内衣口袋中，利用体温保存冻精，且需在2.5 h 内完成人工输精，避免精子活性降低，影响人工授精的受胎率。如果授精地距离较远，应选用2～8 ℃的解冻液，可将授精时间延长至3～7 h。用镊子夹住冻精，在液氮中做预冷处理，之后快速取出放入温度适宜的解冻液中，轻轻摇晃，以加快冻精解冻速度，用棉球擦干水分，确保解冻环境干燥，在危险期过后，精子温度达到5 ℃以上便可用于授精。

3.2.4 结合母牛发情及排卵状况、掌控好人工输精时间

1）确保母牛发情鉴定精准性。为保障人工输精受胎率的提高，需要做好母牛发情鉴定，确保母牛处于排卵期后方可实施人工输精。通常采用外部观察法，观察母牛进食状况及爬跨行为、外阴是否有肿胀或黏液分泌现象，并观测阴道黏液分泌量、排尿量、排尿频率。母牛早期发情时，通常会维持4～6 h，发情母牛出现爬跨其他母牛现象，被爬跨母牛会逃跑、呜叫，情绪不安。发情母牛阴户出现轻微肿胀，阴道黏膜颜色偏粉红，有大量透明、稀薄的黏液从母牛阴道处溢出，母牛出现叉开后肢、尾毛翘起行为［7］。处于发情旺盛期的母牛，发情时间会持续6～10 h，若其他母牛爬跨发情母牛，后者会张开后肢且静立不动。母牛爬跨其他母牛时，则会持续鸣叫、兴奋，进食量下降，粪尿排放量会增加，阴道黏膜出现潮红现象，阴户肿胀更加明显，分泌黏液量较之前增加。处于发情后期的母牛，时间也会持续4～6 h，且尾部黏液逐渐干燥，阴户肿胀程度有所减轻，阴道黏膜由潮红转为淡红，鸣叫减少，进食量逐渐恢复正常。

2）选择最佳配种时间。做好母牛发情鉴定后，需要根据母牛排卵时间实施人工输精操作。首先要选择适合的输精时间，根据精子及卵子的运行速度，结合二者达到授精部位的时间分析，根据授精能力持续时间、母牛生殖道内精子获能时间综合判定。结合实践分析，通常需要在母牛发情6～12 h 内完成冻精人工输精操作［8］。如凌晨或清晨发情的母牛，需要在当天下午之前完成配种输精工作，上午发情的母牛，须在当天傍晚之前完成输精。下午发情母牛，在第二天上午之前必须完成人工输精操作。为山区母牛做冻精人工输精服务时，需提前沟通了解母牛发情的开始时间，了解母牛发情症状，确定最佳的配种输精时间，并按时赶到养殖场，以确保在最佳时间完成配种输精操作，提高母牛受胎率。

3.2.5 提升输精技术操作规范性 输精前，要对操作室进行全面清洁，并提前开窗通风。利用紫外线对操作室做消毒杀菌处理，以防止害虫进入，用浓度为0.1%的洁而灭溶液对操作室地面进行喷洒消毒。用浓度为75%的乙醇对所有输精器械做消毒处理，消毒后再用生理盐水冲洗干净。工作人员手上涂好润滑液，将左手五指合拢并攥握成锥形后，慢慢向母牛肛门内插入，将直肠中的粪便清除，若直肠内存在稀粪，立即用水清洗干净后再继续输精。左手在阴道中触膜到形似圆柱、较硬的组织结构便是子宫颈，而后隔着肠壁将子宫颈握住，右手拿起输精枪，保持倾斜向上，绕过尿道口向母牛阴道处平直插入到子宫颈外部，在双手配合下，使输精枪慢慢穿过子宫颈皱壁轮插入到子宫内部5～6 cm，使输精枪保持水平，慢慢输精，输精时间应持续10 s左右。

3.3 加强疾病的科学防治

3.3.1 采取药物疗法改善后天不孕母牛发情状况为提高肉牛冻精人工授精受胎率，需要及时淘汰患有先天不孕症的母牛，后天不孕母牛除了可通过营养调节，提升母牛受胎率之外，还需要结合实际情况采用相应的治疗措施。如发情持续时间较短且排卵速度快的母牛，可为其注射促卵泡生成素，加快其卵泡生成速度［9］。而处于发情前期的母牛，则可为其灌服八珍益母汤、催情散等中药，或是注射孕酮、黄体酮等促发情西药，应用药物促发情时，只选择1 种药物即可。

3.3.2 科学治疗母牛生殖系统疾病 母牛若患有生殖道炎症，可采用益母生化散治疗，配种前，每日为其提供一剂药灌服，持续用药5 d 炎症可消除。除中药外，也可采用阿莫西林、双黄连注射液混合药剂，采用肌注疗法给药，添加剂量分别为5 g与40 mL。同时将50 mL 鱼腥草混入400 万单位青霉素中，注入母牛子宫内，联合施用可起到消除炎症及预防疾病的功效。患有黏液性子宫内膜炎的母牛，可采用浓度为0.1%的高锰酸钾溶液每日清洗1 次子宫，再各取故子、芡实、香附40 g，加入30 g 黄柏与30 g 知母，煎后灌服，1 次/d，持续给药3 次［10］。患有卵巢囊肿疾病的可注射促黄体素、前列腺素等激素进行治疗。

4 小结

在肉牛养殖业中，冻精人工授精属于重要的繁殖技术，有利于提高肉牛配种受胎率，保障肉牛养殖的稳产、高产，驱动肉牛养殖产业的规模化、长效化发展。为提高山区冻精人工授精受胎率，冻精改良过程中采用上门服务输精方式，但人工授精操作过程中，母牛饲养管理及营养供给情况、冻精存储及利用的规范性、母牛体质或疾病等因素均会影响肉牛冻精人工授精的质量。需要优化肉牛饲养管理、加强母牛营养均衡性，保证冻精质量、加强冻精存储管理、控制好冻精解冻时间及温度，结合母牛发情及排卵状况掌控好人工输精时间、提升输精技术操作规范性，并要及时淘汰先天不孕母牛，科学治疗肉牛繁殖性疾病，从而提高肉牛冻精人工授精的受胎率。