山东省市售土鳖虫质量分析与评价

刘延娟,毕天琛,赵丹彤,牛忻,王素香

(1.菏泽市食品药品检验检测研究院,山东 菏泽 274032;2.菏泽医学专科学校,山东 菏泽 274000)

土鳖虫(Eupolyphaga steleophaga)为鳖蠊科昆虫地鳖Eupolyphaga sinensis Walker 或翼地鳖Steleophaga plancyi (Boleny)的雌虫干燥体[1]。野生或养殖,主产于江苏、浙江、河南、山东、湖北等地,夏秋二季捕捉后,置沸水中烫死,晒干或烘干[2]。具有破血逐瘀,续筋接骨的功效,用于跌打损伤,筋伤骨折,血瘀闭经,产后瘀阻腹痛。近年来研究表明,土鳖虫中含有蛋白质、氨基酸、核苷类、脂肪酸、生物碱、微量元素、脂溶性纤维素等多种化学成分[3]。由于其具有溶解血栓、抗凝血、抗肿瘤、促进骨折愈合等药理作用[4],在医疗机构应用较为广泛。本研究收集了山东省市场流通的28批土鳖虫,通过考察性状、显微特征、薄层特征及杂质、水分、总灰分、酸不溶性灰分、黄曲霉毒素及浸出物等项目,全面评价了土鳖虫质量现状,分析存在的问题,为土鳖虫的生产、使用及监管提供参考。

1 资料与方法

1.1 基本信息

本次专项抽验从山东省内16个地市共抽取28批样品,覆盖3个省份(山东省、河北、安徽省)的21家生产企业,其中流通环节抽取样品7批,占全部样品批次的25%;从医疗机构抽取样品21批,占全部样品批次的75%。

1.2 检验标准

本次市场抽检的28批土鳖虫,有4批执行《中国药典》2015年版一部,其余26批均执行《中国药典》2020年版一部。另外,对前4批样品也按照《中国药典》2020年版一部检验项目进行了质量考察,项目包括性状、显微鉴别、薄层鉴别、杂质、水分、总灰分、酸不溶性灰分、黄曲霉毒素和浸出物。

2 结果与分析

2.1 抽验结果

2.1.1 总体结果

共检验28批土鳖虫,均为地鳖,合格样品25批次,合格率为89%,不合格样品3批次,不合格率11%,不合格醒目为总灰分、酸不溶性灰分和黄曲霉毒素。

2.1.2 性状

均符合标准规定。长1.3～3cm,宽1.2～ 2.4cm。不同批次的土鳖虫大小差异较大,其原因可能为其生长环境的差异等因素造成的,不同批次土鳖虫表面广泽差异较大,有的表面光滑,有些批次土鳖虫表面附着杂质明显,可能与土鳖虫的生长环境及炮制过程相关性较大,生长在盐碱环境的或炮制过程中使用偏咸的水,会导致土鳖虫在晾晒过程中有盐析出现象。

2.1.3 鉴别

显微鉴别:28批次的土鳖虫均符合标准规定。刚毛、毛窝、碎片及横纹肌纤维特征结构均清晰可见,详见图1。

图1 土鳖虫显微鉴别特征(a 刚毛;b 毛窝;c 碎片;d 横纹肌纤维)

薄层色谱鉴别:28批次土鳖虫样品均符合标准规定。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;喷以香草醛硫酸试液,在105 ℃加热至斑点显色清晰,显相同颜色的斑点。详见图2。

1.对照药材溶液;2-12.供试品溶液。图2 土鳖虫薄层色谱

2.1.4 检查

杂质:28批次样品均符合标准规定(≤5% )。28批次土鳖虫杂质测定结果为0.08%～2%。26批次不高于1.0%(占比93%)。结果普遍较低,说明土鳖虫不易掺杂掺假。详见图3a 。

图3 28批次土鳖虫部分检查项目概率分布直方图

水分:28批次样品中水分检查结果均低于10%,符合规定。水分含量主要集中在6.7%～9.4%之间。不高于9.0%的有23批(占比82%),土鳖虫炮制及储存过程中水分控制尚可。详见图3b。

总灰分:28批次样品中,27批总灰分结果符合标准规定(≤13.0%),1批次超出标准规定范围,结果为15.8%。总灰分不合格率为3.6%。27批合格样品中有5批样品总灰分在11.7%～12.1%,接近标准规定上限,占全部样品的17.9%。详见图4。

图4 28批次土鳖虫总灰分分布图

酸不溶性灰分:28批次样品中,27批酸不溶性灰分结果符合标准规定(≤5.0%),1批次超出标准规定范围,结果为9.2%。酸不溶性灰分不合格率为3.6%。考虑土鳖虫样品杂质均符合规定,分析总灰分和酸不溶性灰分超出规定范围的原因为土鳖虫在饲养过程中饲料的污染、及炮制过程中残留在土鳖虫体内食物团造成。详见图5。

图5 28批次土鳖虫酸不溶性灰分分布图

黄曲霉毒素:本文对28批次样品采用《中国药典》2020年版标准检查黄曲霉毒素;其中2批次同生产厂家同批号样品黄曲霉毒素含量不合格,不合格率为7.1%。导致不合格情况的主要原因为企业在样品运输及储藏条件导致黄曲霉毒素超标以及样品生产源头引入。

2.1.5 浸出物

28批次土鳖虫的浸出物检查结果均符合标准规定(≥22.0%),结果为25.6%～37.0%。详见图3 c。

2.2 综合分析

2.2.1 聚类分析

采用SPSS22.0软件对20批样品结果进行聚类分析,结果见图6。结果发现,样品可聚为3类,其中1号样品聚为一类,20号样品聚为一类,其余样品聚为一类。结合各项结果发现,1号样品浸出物量明显高于其余样品,20号样品的总灰分和酸不溶性灰分结果较高,且已超过标准规定。

图6 28批次样品的聚类分析图

2.2.2 相关性分析

运用SPSS22.0统计分析软件,对杂质、水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物数据进行相关性分析,见表1,结果显示总灰分与酸不溶性灰分呈显著正相关,其他项目之间均无相关性。

表1 杂质、水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物结果相关性分析结果

2.3 探索性研究及分析

土鳖虫现行标准对重金属限度未作规定。本文采用电感耦合等离子体质谱法(中国药典2015年版四部2321铅、镉、砷、汞、铜测定法 第二法)考查了土鳖虫中重金属及有害元素Pb,As,Cd,Hg,Cu和的含量情况[5],并增加了金属Cr的含量测定,结果见表2。

表2 样品测定结果

参考《中医药-中药材重金属限量》ISO国际标准、中国绿色行业标准和《中国药典(四部)》中种植类中药材重金属及有害元素限度[5-7],28批次土鳖虫均不同程度的检出上述6种重金属,其中Cd、As和Hg结果均在安全范围之内,部分样品Pb含量接近限度值,存在一定风险,多数样品Cu的含量超出限度值,应予以重视。

3 讨论

我省流通使用环节土鳖虫总体质量良好,但是少数样品存在总灰分、酸不溶性灰分和黄曲霉毒素不合格情况,抽检合格率为89%。目前存在的问题主要有:(1)土鳖虫饲养环境及食物差异,土鳖虫样品体内食物团复杂,导致一些产品总灰分和酸不溶性灰分不符合规定;(2)应该从生产源头控制黄曲霉毒素的带入以及储藏环境对黄曲霉毒素的影响;(3)重金属污染是一个长期且复杂的问题,与中药材的产地、生长环境等诸多因素密切相关。土鳖虫重金属污染已有报告[8],建议增加土鳖虫重金属含量测定,以更好地控制药品质量。生产企业应加强饲养环境的管理,规范饮片加工方法,加强对中药材的源头质量控制,监管部门加强对部分生产企业的监管力度,消除安全隐患,保障临床用药安全、有效。