氨基酸分析仪检出限以及分离度不确定的评定

佟俊婷

【摘要】本文使用氨基酸混合標准物质，对氨基酸分析仪检出限以及分离度进行不确定度评定。结果表明：检出限扩展相对不确定度为9.6%，通过不确定度分析，基线噪声的波动性对仪器检出限的影响最大，降低基线噪声可有效改善仪器检出限；分离度的扩展相对不确定度为6.1%，通过不确定度分析发现，标准物质的不确定度以及待测物浓度对分离度的影响最大，在仪器的线性范围内适当增大待测物浓度可有效改善待测物的分离度。

【关键词】氨基酸分析仪；不确定度评定；检出限；分离度

【DOI编码】10.3969/j.issn.1674-4977.2023.02.012

【基金项目】辽宁省检验检测认证中心青年人才创新创业项目（SC20210106）。

Evaluation of Uncertainty of Detection Lmit and Resolution of Amino Acid Analyzer

TONG Junting

（Liaoning Institute of Measurement，Shenyang 110004，China）

Abstract：In this paper，the mixed standard substance of amino acid is used to evaluate the uncertainty of detection limit and resolution of amino acid analyzer. The results show that the expanded relative uncertainty of the detection limit is 9.6%. Through uncertainty analysis，the fluctuation of baseline noise has the greatest impact on the detection limit of the instrument. Reducing baseline noise can effectively improve the detection limit of the instrument. The expanded relative uncertainty of degree of separation is 6.1%. Through uncertainty analysis，the uncertainty of reference materials and concentration of the analytes has the greatest impact on the degree of separation. Appropriately increasing the concentration of the analytes within the linear range of the instrument can effectively improve the degree of separation of the instrument.

Key words：amino acid analyzer；evaluation of uncertainty；detection limit；degree of separation

氨基酸分析仪是一款广泛应用于食品科学、农业环境、生物化学、医疗卫生及化工领域的分析仪器[1-2]。氨基酸分析仪的基本原理为：试样经过前处理去蛋白之后，样液经离子交换柱层析分离，被分离出的氨基酸通过柱后衍生与茚三酮溶液反应显色，用紫外检测器检测，外标法定量[3-4]。检出限是评价分析方法的重要指标，一般分为仪器检出限、分析方法检出限。仪器检出限是指分析仪器能区分噪声的最低检出浓度的能力，而方法检出限不但与仪器噪声有关，还与方法全部流程的各个环节相关。目前，研究方法检出限的较多，但较少有针对仪器检出限不确定度进行评定的方法。为正确评估仪器检出限，本文将针对氨基酸分析仪进行仪器检出限不确定度的评定，为检出限不确定度评定提供解决方案。分离度是氨基酸分析仪判断待测物质在色谱柱中分离情况的另一个重要指标。氨基酸分析仪的分离度是指峰高分离度。本文通过结合分离度和仪器检出限的不确定度分析，对氨基酸分析仪的性能水平作出准确评价。

1材料与方法

1.1材料与仪器

17种氨基酸混合标准溶液：浓度约为1 mmol/L，扩展不确定度为0.02～0.04 mmol/L（k=2），中国计量科学研究院生产；电子天平：Ⅰ级，感量为0.1 mg，METTLER TOLEDO公司；L-8900型氨基酸分析仪：日立公司；游标卡尺：测量范围为0～150 mm，最小分度0.02 mm，检定的不确定度为0.04 mm，k=2，桂林广陆数字测控股份有限公司；容量瓶：100 mL/250 mL/1000 mL，A级。

1.2方法

1.2.1样品

取适量浓度、适量体积氨基酸标准物质注入仪器，准备检出限以及分离度的测定。

1.2.2测定方法

本次使用的氨基酸分析仪采用衍生化间接分析方法，原理是基于阳离子交换树脂分离-柱后茚三酮衍生化分光光度检测方法。本方法使用阳离子交换树脂柱为固定相，酸性缓冲液为流动相，经过离子交换柱样品中不同种类的氨基酸分离流出后，与茚三酮进行衍生反应，生成具有可见光吸收的衍生物，进入检测器，选用570 nm进行定量检测。

2氨基酸分析仪检出限不确定度评定

2.1数学模型的建立