中药沪地龙的生产质量管理规范及研究

章一菡，陶晓斌，王艳春，李 雷，张汉明，张 磊 （1.海军军医大学：a.第一附属医院药学部；b.药学系,上海 004；.上海瀛千生态农业有限公司, 上海 015；.上海康桥药业有限公司, 上海 0105）

中药沪地龙为上海市的唯一道地药材，具有突出的定惊，通络，平喘和利尿功效。用于高热神昏，惊痫抽搐，关节痹痛，肢体麻木，半身不遂，肺热喘咳，水肿尿少等证[1]。当前，心脑血管疾病的发病率增高，该药是治疗这类疾病的中成药组方中重要组成成分[2-3]。地龙药用市场需求量从2010 年的400 t已上涨至2020 年的1 100 t，并仍呈上涨趋势。沪地龙主产于上海，20 世纪60 年代供应量占全国地龙销售量的2/3，自1995 年起被历版《中国药典》收载[4]。然而，随着上海城市化进程的发展、农业上化肥和农药的大量使用以及蔬菜大棚面积的扩大，沪地龙的原动物蚯蚓的生存条件遭受严重破坏，以致可得蚯蚓的数量明显减少，从而导致沪地龙药材的产量也急剧下降。目前沪地龙药材的产量已无法满足市场需求，人工养殖技术尚未取得实质性进展[5]。而且地龙来源复杂，采收混乱，近年来伪品地龙大量混入市场[6]。为满足市场对沪地龙药材的需求，确保人民的用药安全，解决沪地龙资源紧缺的问题，开展沪地龙的人工养殖研究迫在眉睫。本课题参照中药材生产质量管理规范的要求[7-8]，对沪地龙药材原动物的品种来源和鉴定、养殖环境、养殖方法、采收加工和包装运输进行研究，提出了作物和蚯蚓套养的新方法，考察了养殖蚯蚓对土壤改善的作用，并制订了相关的操作规程。

1 沪地龙原动物基源及鉴定

1.1 沪地龙原动物基源

沪地龙的品种按药典规定原动物为3 个种，分别为环节动物门、寡毛纲、钜蚓科动物威廉环毛蚓Pheretima guillelmi(Michaelsen) 、通俗环毛蚓Pheretima vulgarisChen、或栉盲环毛蚓Pheretima pectiniferaMichaelsen[1]（图1）。

图1 药典规定的沪地龙3 种原动物形态

1.2 沪地龙原动物鉴定

我国是蚯蚓种数的大国，现有蚯蚓记录已达9 科28 属640 种[9]，陆续还有新物种被发现[10]。蚯蚓的外部形态，如大小、颜色和环节数有较多的相似之处，所以鉴定蚯蚓除了一般的外部形态鉴定外，还必须进行解剖，对其有重要鉴别特征的盲肠和受精囊的形态特征进行观察，从而获得正确的鉴定结果。

1.2.1 威廉环毛蚓的形状特征

体长96～150 mm，宽5～8 mm。体节数88～156，背面颜色青黄，或灰青色。背中线深青色。环带于14～16 节，戒指状，无刚毛。身体上刚毛较细，前段腹面并不粗而疏。13～22（Ⅷ）在受精囊孔间，13～21 在雄孔之间。雄生殖孔在18 节两侧一浅交配腔内。陷入时呈纵裂缝（图2A-1），内壁有褶皱，褶皱间有刚毛2～3 条，在腔底突起上为雄孔，突起前面常有一乳突。受精囊3 对（图2A-2），在6/7～8/9 节间，孔在一横裂中小突上。无受精囊腔。隔膜8/9，9/10 缺失。盲肠简单（图2A-3）。受精囊的盲管内端2/3 在平面上，左右弯曲，为纳精囊，与管分明（图2A-4）。

图2 沪地龙解剖鉴别要点

1.2.2 通俗环毛蚓的形状特征

本种身体大小、色泽及内部构造和前种相似。体长130～150 mm，宽5～7 mm。环带位于14～16 节，戒指状，无刚毛。体上刚毛环生，13～18（Ⅷ）在受精囊孔间，9～13 在雄孔间。雄生殖孔在18 节两侧一浅交配腔内（图2B-1）。唯受精囊腔较深广，前后缘均隆肿（图2B-2），外面可见腔内大小乳突各一。雄交配腔亦深广，内壁多皱纹，有平顶乳突3 个。盲管内端2/3 在同一平面上左右弯曲，与外端1/3 的管状有明显区别（图2B-3）。受精囊在第9 节呈一定角度的弯曲（图2B-4）。

1.2.3 栉盲环毛蚓的形状特征

体长100～150 mm，宽5～9 mm，背面及侧面有深紫颜色或紫红色，刚毛圈不白。环带占3 节，无刚毛。身体前部刚毛虽粗，在2～9 节并不特殊粗。28～34（Ⅷ）在受精囊孔间，20～36 在雄孔之间。雄生殖孔在一“十”字形突的中央，常由一浅囊状皮褶盖住（图2C-1），内侧有一个或多个乳头，其排列变化很大。受精囊孔3 对，位6/7 至8/9 节间，孔常常陷入（图2C-2），孔的内侧腹面在刚毛圈前或后，有乳头突，排列较规则。盲肠复式，其腹侧有栉状小囊（图2C-3）。副性腺有索状短管。盲管较受精囊本体长，内端3/4 稍粗，或直或稍弯曲（图2C-4）。以上特征符合蚯蚓分类的描述[11]。

1.3 沪地龙药材的特征

沪地龙长8～15 cm，宽0.5～1.5 cm。全体具环节，背部棕褐色至黄褐色，腹部浅黄棕色；受精囊孔3 对，在6/7 至8/9 环节间。第14～16 环节为生殖带，较光亮。第18 环节有一对雄生殖孔。通俗环毛蚓的雄交配腔能全部翻出，呈花菜状或阴茎状；威廉环毛蚓的雄交配腔呈纵向裂缝状；栉盲环毛蚓的雄生殖孔内侧有1 或多个小乳突[1]。沪地龙药材形态见图3。

图3 沪地龙药材形态

2 沪地龙的养殖方法

2.1 饲养地的选择

根据蚯蚓喜欢安静的生活习性，养殖蚯蚓的地点须选择在离公路50 m 以远的地方，周围没有化工厂，没有噪声源、震动源等工厂企业。有自然水源。空气清新。土壤要求腐殖土，pH 为6.5～7.5。

2.2 饲养地土地的分隔

饲养蚯蚓的土地四周需挖水沟，其中分成多个畦，每畦宽度根据需要可达1.5～2.0 m，两畦间挖一宽30～50 cm，深30 cm 的沟。经常保持周围和中间沟内的水量达2/3 高度（冬天需降至1/4 高度）。土壤的湿度保持在60%～70%。水沟中可种植芹菜或养殖黄鳝和泥鳅。水质要求卫生安全无污染，可利用附近的河水及雨水。

2.3 蚯蚓种苗的投放

蚯蚓的投放选择在春秋二季，气温在15～20 ℃之间。在蚯蚓苗地里挖出蚯蚓，选取符合沪地龙3 个种基原要求的蚯蚓，并挑选活动能力强、无损伤的蚯蚓，按每亩地放30～50 kg 鲜蚯蚓，分撒在用水浇湿的土地里，蚯蚓将自动钻入泥土中。

2.4 不同蚯蚓饲料的投放对蚯蚓生长的影响

选用发酵至少6 个月的牛粪、猪粪、鸡粪或人工有机肥。按每亩田4～6 t 的量投放。可一次投放，也可分2 次投放。在畦上适时投放菜叶和粉碎或切断的秸秆。

为摸索牛粪（上海光明奶牛场供）、猪粪（崇明新村乡饲养场供）、鸡粪（崇明西新村农家供）或人工有机肥（上海聚源有机肥有限公司）对蚯蚓生长和繁殖的效果，比较在同一块地（分隔3 块）投放相同量的饲料，1 年后蚯蚓的生长情况（图4），结果表明牛粪和猪粪作为养殖蚯蚓饲料的效果最好。

图4 不同蚯蚓饲料对蚯蚓增长的影响

在上海4 月间的崇明区三星镇西新村养殖地里按每亩地放入30 kg 鲜活蚯蚓（经鉴定为威廉环毛蚓），随后按每亩地放4 t 经发酵后的牛粪，田里种芋艿。次年4 月分散选择3 个1 m2的土地，挖取蚯蚓称重，并计算每亩地里蚯蚓的产量。第3 年、第4 年仍旧按该方法操作，3 年后的蚯蚓生长情况见图5。结果表明，在牛粪作为蚯蚓饲料的养殖下，蚯蚓3 年的繁殖量达到500 kg，可以进行收获。

图5 蚯蚓养殖年度产量

3 不同蚯蚓饲料的投放对蚯蚓生长土地容重的影响

人工养殖蚯蚓必须与农作物套养，否则养殖地不能获得经济效益，农民也就会失去养殖的积极性。而植物的生长好坏又与土质的改善有密切的关系。不同蚯蚓饲料的投放对蚯蚓生长地土质的改善有不同的结果。土壤的容重的改变是土地质量变化的重要指标。土壤的容重降低，表示土壤的团粒结构更好，更有利于作物的良好生长。按照测定土壤容重通常使用的环刀法[12]，对不同蚯蚓饲料投放的蚯蚓生长土地进行容重的测定，土壤容重改变的测试结果如下（表1）。由此可见，虽然牛粪和猪粪做饲料使蚯蚓的生长达到近乎相同的效果，但对于土壤的改善作用牛粪较猪粪的效果更胜一筹。所以在猪粪和牛粪同时可得的情况下，使用牛粪效果更好。

表1 不同蚯蚓饲料投放后蚯蚓地容重变化

4 套种作物的选择

使用农作物套种养殖蚯蚓的方法是本课题的创新点。如在农田里单独养殖蚯蚓，不但浪费土地资源，而且不可能达到理想的经济效益，蚯蚓的人工养殖方法就无法推广。所以必须在蚯蚓地里套种农作物，以期获得蚯蚓和农作物双双得利的效果。由于使蚯蚓生长良好的土壤其湿度要求在60%～70%的程度，所以必须选择能在这一土壤湿度下也能生长良好的作物品种，以适应蚯蚓喜潮湿土地的特性。此外，在夏天能有叶大能遮阳的植物，则更能降低土壤表面的温度，有利于蚯蚓晚间外出觅食。经试验，花菜、芋艿、玉米和卷心菜等能符合这一要求，而地瓜、马铃薯和山药等作物因不宜在60%～70%的土地湿度中生长，故不宜作为和蚯蚓套种的作物。由于养殖蚯蚓能使土壤松软，蚯蚓排出的粪便能增加土壤的肥力，套种作物的产量也获得了提高，从而明显地提高农民获得的经济效益，见表2。

表2 不同农作物在蚯蚓养殖地产量的增减

5 田间管理和病虫害防治

根据套种作物的生长习性，调节生长密度。经常除草。尽量不用杀虫药和除草剂，如作物生长的要求必须使用，应按国家的规定使用低毒和最小有效剂量。使用前一星期起降低水沟里的水量。蚯蚓养殖地内要经常灌水，其中水沟的水要经常保持在2/3 的高度。盛夏土地的表面也要常喷水。在蚯蚓的养殖中要注意除去蚯蚓的天敌，如野鼠、家鼠、黄鼬、蜈蚣和蚂蚁等，防止他们进入养殖区造成对蚯蚓的损害。

6 地龙的规范化生产

6.1 蚯蚓的捕捉方法

①利用插秧前稻田灌水后，蚯蚓自动游到田埂上避水，此时进行人工抓捕。②在养殖的蚯蚓田里，当一季作物收割后，在水沟里放水。此时蚯蚓自动爬到土埂上避水，可进行人工抓捕。③在一种作物收割后至另一种作物栽种前的间歇期内挖土捕捉蚯蚓。④选择在每年的4～5 月或10 月捕捉蚯蚓。⑤温和湿润的天气，在蚯蚓养殖地人工挖掘。⑥严格禁止用电击方法捕捉蚯蚓。

6.2 地龙的加工

6.2.1 地龙的加工方法

将捕捉的蚯蚓用清水冲去体表的泥沙，分批放入草木灰中2 min，蚯蚓即失去活动能力。取出后用清水冲去表面草木灰，逐条加入到蚯蚓剖切机内。经全剖切后的蚯蚓用清水淘洗2～3 次，除去泥沙。逐条挂在竹杆上至室外晒干。也可将洗净的蚯蚓放在挂空的尼龙网或不锈钢网上晒干。如遇下雨天，则可分摊放入具细孔的不锈钢盘内，置60 ℃烘房中烘8 h 至干。

6.2.2 质量标准及检测结果

地龙药材的标准按《中华人民共和国药典》一部地龙项记载的要求执行[1]。内容包括检查杂质不得过6%、水分不得过12.0%、总灰分不得过10.0%、酸不溶性灰分不得过5.0%、重金属不得过30 mg/kg、每1 000 g 中含黄曲霉素B1不得过5 µg，黄曲霉素G2、黄曲霉素G1、黄曲霉素B2和黄曲霉素B1的总量不得过10 µg。水溶性浸出物不得少于16.0%。该基地地龙药材经上海市食品药品检验院检测（报告书编号：YW202105450），杂质为0.2%，水分为10.3%，总灰分为5.9%，酸不溶性灰分为1.0%，重金属符合规定。黄曲霉素B1小于检出限0.5 µg/kg，黄曲霉素B20.2 µg/kg、黄曲霉素G10.5 µg/kg、黄曲霉素G20.2 µg/kg，和黄曲霉素B1的总量小于10 µg/kg。水溶性浸出物为25.9%。

6.3 地龙的包装、储藏和运输

6.3.1 地龙的包装

干燥后的地龙药材在包装前应仔细检查是否已充分干燥，并清除杂质和异物。后置药用级的塑料包装中，包装袋表面贴上药材的溯源码。溯源码包括生产企业、地龙基源、栽培方式和环境、养殖管理、采收加工的时间和方法。

6.3.2 地龙的储藏

地龙药材应储存于阴凉干燥的仓库里，仓库的地面应有木质或塑料堆放架。库房注意防虫防鼠。

6.3.3 地龙的运输

地龙的运输应遵循及时、准确、安全、经济的原则。将固定的运输工具清洗干净，每件地龙捆扎好，遮盖严密，及时运往贮藏地点。不得雨淋、日晒，长时间滞留在外，不得与其他有毒、有害物质混装，避免污染。

7 小结

中药的规范化种植和管理是确保中药质量安全有效的重要环节。国家药品监督局等4 部委今年再次颁布了《中药材生产质量管理规范（GAP）》的要求[7]，说明中药材规范化种植和管理的重要性。动物类药材养殖往往较植物类药材的种植更具复杂性。本课题组数年来对沪地龙的养殖不断的进行探索，在此基础上提出了沪地龙规范养殖的新方法，为解决沪地龙规模化和可持续的人工养殖、缓解沪地龙的资源紧缺提供了可行的途径。