HBsAg和HBV DNA定量水平在慢性HBV感染自然史中的变化

薛占成，韩海燕，周 秀

武警特色医学中心检验科，天津 300162

血清HBsAg 和HBV DNA 均以肝内闭合环状DNA（cccDNA）为模板合成［1-2］，二者具有相关性，但这种相关性因慢性乙型肝炎（CHB）感染自然史所处阶段不同而不同。本研究对2015 年4 月—2020 年8 月在武警特色医学中心就诊的144 例CHB 感染自然史中免疫耐受期（IT）、免疫清除期（IC）、低复制期（LR）、和再活动期（RA）患者血清样本HBsAg 水平进行了评估，并分析其与HBV DNA 的相关性，探讨血清HBsAg 浓度对RA 期和LR 期CHB的预测价值。

1 资料与方法

1.1 研究对象

144 例样本均为2015 年4 月—2020 年8 月在武警特色医学中心就诊的慢性乙型肝炎患者，所有患者均未进行抗病毒治疗，诊断符合2019年《慢性乙型肝炎防治指南》诊断标准。

1.2 分组标准

IT46 例，IC28 例，LR24 例，RA46 例。分组标准依据2019年《慢性乙型肝炎防治指南》。

1.3 标本采集及检测

采集患者空腹静脉血2 管，分别做HBV DNA 和HBV血清标志物定量检测。HBV DNA 定量检测采用上海宏石SLAN-96P 型荧光定量PCR 仪，试剂盒为湖南圣湘乙型肝炎病毒核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）；HBV 血清标志物定量检测采用罗氏电化学发光分析仪，试剂盒采用罗氏配套试剂盒。

1.4 统计学方法

采用Graph Pad prism 5 统计软件进行数据分析。计量资料符合正态分布的数据用均数标准差表示，不符合正态分布的数据以中位数和四分位数间距表示，多组间比较采用Kruskal-WallisH秩和检验，进一步两组间比较采用Mann-WhitneyU检验，相关性分析采用Spearman 秩相关检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HBsAg定量在自然史中的变化

CHB 各时期HBsAg水平由高到低，见表1和图1A。IT组［4.863 （4.607～5.097）log10IU/mL］、IC 组［4.115（3.487～4.410）log10IU/mL］、RA 组［3.750（3.188～5.097）log10IU/mL］、LR组［3.413（2.606～3.672）log10IU/mL］。

图1 HBsAg和HBV DNA在CHB自然史不同时期的变化及相关性

表1 HBsAg和HBV DNA在CHB自然史不同时期的变化[M(P25～P75)，log10 IU/mL]

2.2 HBsAg和HBV DNA在CHB自然史不同时期的变化

CHB 各期HBV DNA 水平由高到低。IT 组［7.987（7.576～8.248）log10IU/mL］、IC 组，［6.698（6.447～6.912）log10IU/mL］、RA 组［4.519 （4.076～5.187）log10IU/mL］、LR组［2.854（2.805～2.950）log10IU/mL］，见表1和图1B。

2.3 CHB自然史各时期HBsAg与HBV DNA的相关性

HBsAg和HBV DNA在CHB自然史各个时期的相关性不同，HBsAg和HBV DNA仅在IC期和RA期具有相关性（r=0.387 3、0.740 1，P=0.041 7、0.039 2）；整个CHB 时期HBsAg 和HBV DNA 具有相关性（r=0.546 9，P＜0.000 1），见表2和图1C～G。

表2 CHB自然史各时期HBsAg与HBV DNA的相关性

2.4 ROC曲线分析

HBsAg＞4.208 log10IU/mL 的截断值（16 129 IU/mL）用于预测IT 期敏感度为90.38%，特异度为92.47%；HBsAg＞3.455 log10IU/mL 的截断值（2 852 IU/mL），用于预测IC 期敏感度为78.60%，特异度为79.10%；HBsAg＞3.444 log10IU/mL 的截断值（2 530 IU/mL），用于预测LR期敏感度为68.18%，特异度为78.07%；HBsAg＞3.505 log10IU/mL 的截断值（3 200 IU/mL），用于预测RA 期敏感度为74.31%，特异度为80.21%；当机会曲线下面积等于0.5时，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3和图1H。

表3 CHB自然史各时期HBsAgCut-off值

3 讨论

我国《慢性乙型肝炎防治指南（2019 年版）》［3］明确指出，根据HBV DNA 载量、HBeAg、HBeAb 及ALT 等，CHB 通常分为IT、IC、LR、RA4 个时期。本研究结果表明，HBsAg 在CHB 自然史中是不断变化的，在IT 组最高，其次为IC和RA，LR组最低。此结果与Nguyen等［4］、Jaroszewicz 等［5］和周洪波等［6］研究结果一致。IT 期CHB 患者处于HBV 感染早期，体内并未激发出针对HBsAg 的免疫反应，因此患者血液中HBsAg处于高水平。随着机体针对HBsAg 的体液免疫和细胞免疫的发生和增强，患者机体进入IC期，机体免疫清除能力远超病毒抗原产生能力，既患者进入HBV感染的晚期。

本研究结果表明，HBV DNA 在CHB 自然史中是不断变化的：在IT 组最高，其次为IC 和RA，LR 组最低。HBV DNA 是病毒复制的指标，与患者的免疫状态相关。在IT 期最活跃，IC 期次之。此结果与张学平等［7］和戴小波等［8］研究结果一致。研究提示，HBsAg 定量水平和HBV DNA 的变化都与患者免疫状态相关，我们的研究结果显示HBsAg 与HBV DNA 总体相关，而在HBV 持续感染的不同时期的相关性不同：IC 期和RA 期CHB 患者HBsAg与HBV DNA 具有相关性。IT期和LR 期无相关性，此结果与王慰等［9］的研究报告一致。血清HBsAg 和HBV DNA 都以cccDNA 为模板合成［10］，而HBsAg 既是HBV 组成成分，又以非传染性的球形颗粒和管型颗粒存在于血清中，但HBV DNA 只存在于HBV 中，是检测HBV 复制的指标, 在HBV 感染患者血清中HBsAg 颗粒含量远超具有感染性的HBV，导致在CHB 患者不同自然史阶段，HBV DNA 与HBsAg比值不相同。

综上所述，HBV DNA 载量下降是评价抗病毒治疗有效的指标之一，HBsAg 水平下降则是机体通过免疫调节清除HBV 及非传染性颗粒的表现。动态监测两者的变化,特别是使用HBsAg 预测HBV 再激活对临床诊断有较大的参考价值。