蛋鸡大肠杆菌病的诊疗和防治措施技术

王明月

中图分类号：S856.9 文献标识码：C文章编号：1673-1085（2023）06-0027-04

大肠杆菌病是家禽养殖中发病最多的一种细菌性传染病，纵观临床上一些合并感染和继发感染的病例，多数能从典型病变器官或组织中分离出大肠杆菌。大肠杆菌病一年四季均可发生，可感染任何日龄的蛋鸡。大肠杆菌在自然环境和体内普遍存在，当蛋鸡受到环境卫生差、饮水和饲料污染、换料、饲养密度过大、日粮营养不足、通风不良以及天气突变、免疫应激等刺激，产生强烈的应激反应，增加蛋鸡大肠杆菌病的发生率。

目前临床上原发性大肠杆菌少见，多为蛋鸡感染沙门氏菌、马立克氏病、支原体、新城疫、禽流感、鸡传染性支气管炎、慢性呼吸道病等疾病，导致机体抵抗力下降而出现继发性大肠杆菌病。鸡大肠杆菌病对蛋鸡养殖危害较大，在产蛋阶段发生大肠杆菌，轻则影响产蛋，重则致死；种鸡影响种蛋孵化率、出雏率以及健雏率低，引起巨大经济损失，因此做好诊治和预防工作非常重要。

1 症状

出生雏鸡感染大肠杆菌会引起脐炎、败血症、肠炎等，临床可见雏鸡脐部闭合不全，发炎红肿，有血痂，腹部大，精神差，一般会在7 d内死亡；另一种以腹泻为主，粪便较稀，颜色灰白，有的呈绿色，食欲下降；病重者食欲废绝，腹部肿胀、糊肛，突然倒地死亡；有的呼吸困难，最后衰竭致死。

蛋鸡育雏阶段和育成阶段感染大肠杆菌，以混合感染和继发感染为主，多数情况下会因应激和合并其它疾病引起败血症、心包炎、肝周炎、气囊炎等。发病后精神状态变差，羽毛杂乱无光泽，鸡冠萎缩、苍白无血色，食欲差，严重的食欲废绝，不愿活动，体重减轻，排黄色或者白色的稀粪。

产蛋期的蛋鸡很敏感，此阶段感染大肠杆菌病，不仅引起产蛋性能下降，而且鸡群死淘率增加，养殖户损失重大。原因：一方面易受环境应激和饲养管理粗放影响，大肠杆菌病以原发病为主；另一方面，一般是感染禽流感、新城疫等病毒性传染病后继发大肠杆菌，造成产蛋量不高，为60%～70%，产蛋高峰上不去、产蛋高峰维持时间短，产下的蛋大多为软壳蛋、白皮蛋，症状严重的病鸡在5 d内死亡，死后腹部膨胀。

2 实验室诊断

鸡继发性大肠杆菌的诊断比较复杂，需要根据临床表现和病理特点筛出引起特征性症状的疾病有哪些，然后根据血清学和分子生物学技术一一排除，找出致病的主要病原。蛋鸡大肠杆菌病的诊断鉴定，根据临床症状、病理剖检，往往要与实验室技术相结合才能确诊。实验室诊断技术常用的有两种，一种是最常见的细菌分离鉴定方法，另一种就是16S rRNA PCR鉴定方法，能够快速诊断大肠杆菌。

2.1 细菌分离鉴定方法

2.1.1 细菌分离培养 确保取样和接种过程在无菌条件下进行。先取出患病蛋鸡的肝、肾、心、脾，用接种环分别从上述病料切口处插入2～3 cm勾取少量，划线接种于普通营养琼脂培养基上，做好标记，在37℃恒温箱中培养24 h观察结果。若在营养琼脂培养基上有菌落生长，且呈灰白色或淡黄色圆形、半透明、表面光滑，可初步判定符合大肠杆菌菌落特征。

2.1.2 鉴别培养 将上述分离菌选2～3个典型的接种于麦康凯培养基和伊红美蓝培养基，37℃培养24 h。在麦康凯培养基上生长圆形的桃红色菌落，且菌落中心颜色较周围颜色深；在伊红美蓝培养基上菌落为深紫色，带有金属光泽，可进一步增加分离菌是大肠杆菌的可能性。

2.1.3 涂片镜检 将2.1.1和2.1.2分离的菌落涂片、革兰氏染色，在显微镜下观察，为两端粗短、中等大小的革兰氏阴性杆菌，无荚膜或芽孢，符合大肠杆菌的形态特征。此时基本就可断定分离菌为大肠杆菌。

2.1.4 生化鉴定 分离菌接种于蔗糖、葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇等糖发酵生化管、三糖铁培养基、M.R试验、V.P试验等，37℃培养24～48 h。若发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、乳糖，且产酸；三糖铁培养基底部变黄，有少量气体；M.R试验阳性，V.P试验阴性。根据伯杰氏细菌鉴定手册，生化特性符合大肠杆菌特征，可确诊为大肠杆菌。

2.2 16S rRNA PCR鉴定方法

引物设计按照GenBank中公布的大肠杆菌16S rRNA通用引物设计，由专门的生物公司合成。使用试剂盒法提取细菌DNA，PCR扩增反应体系和反应条件可参考李蕴玉等[1]或徐睿等[2]的文章，扩增产物经琼脂糖凝胶检测目的条带，将PCR产物进行序列测定，测序结果与GenBank数据库中登录基因序列进行同源性分析，当同源性为99%以上时，从分子生物学角度即证实分离菌株为大肠杆菌。

3 治疗方法

一般采用中西结合的方式对患病鸡群进行药物治疗，治疗同时要额外给病鸡补充多种维生素，提高机体抵抗力，还要同步加强环境消毒和带鸡消毒强度，每天粪便一清，每隔3 d带鸡消毒一次，根据具体情况适时更换消毒药。

3.1 抗生素治疗

药物仍是养鸡生产上控制大肠杆菌的主要手段，但部分养殖户用药盲目，导致病情不见好转。建议有条件的养殖场一定在治疗前进行细菌培养和药敏试验，考虑本场饲养鸡群日龄、经济条件、用药史、发病程度，首选价廉质优、广谱、高敏药物进行治疗。常用的治疗抗生素药物和用法：阿莫西林，每升水60 mg，饮水给药；氨苄西林60 mL配水1 L，饮水给药；氟苯尼考1 g拌料2.5 kg，混勻拌料饲喂；丁胺卡那霉素6 mg/kg体重肌注；盐酸多西环素1 g拌料1 kg，混匀拌料饲喂。以上五种药物可选择其中两种交替使用，需连续用药4 d。为巩固疗效，可多用药2 d。

3.2 中草药治疗

中医认为蛋鸡大肠杆菌病属“疫疬”范畴，认为其是因疫毒内侵、肺胃热盛、血瘀气滞所引发的，因此在治疗时要遵循清热解毒、活血行气的原则和要求，进而达到清肺胃热、凉血止痢的目的。蛋鸡临床上大部分都是继发或混合感染，治疗中要辨证施治。

治疗时，可用加味三黄汤治疗，取大黄20 g+黄芪30 g+黄连30 g，加入适量水煎熬成药液去渣温服，每只病鸡服用10 mL，早晚各1次，连服3～5 d，治愈率高达95%以上。或主要成分为诃子、鱼腥草、穿心莲、黄芩、白头翁、金银花提取物等组成的康养宝，500 g兑水4 000 kg，全天饮水，连用4 d；后期每隔一月饮一次，可有效预防大肠杆菌。

3.3 治疗提醒

如果蛋鸡反复出现用药就好、停药即犯的情况，并且开产还有软壳蛋和白壳蛋、采食略低的情况，剖解死鸡肠系膜发黑，肌胃发黑。说明前期治疗没有找到主要的病因，或者没有消除原发病，因此会导致大肠杆菌病频繁复发。这时要注意原发病因素，如霉菌及其毒素、温和型流感、非典型新城疫等的影响。

4 预防措施

4.1 优质种源是基础

优质的种源是保证后期大肠杆菌病少发的一个基础。母鸡体内携带大肠杆菌，会通过蛋直接传给下一代雏鸡。因此，不要贪图便宜，应优先从质量可靠、信誉高、大肠杆菌净化较好的种鸡场选苗，不然后期增加药费和其它附带的损失要远远高于少花的鸡苗钱。

4.2 良好管理是核心

大肠杆菌是条件性致病菌，良好的饲养管理是保证该病少发的核心所在。采用全进全出的饲养方法，可有效避免交叉感染；尽可能采用封闭式管理，减少或杜绝鸡群与大肠杆菌的污染物接触。及时做好防寒保暖和避暑工作，避免冷热应激，给产蛋鸡营造舒适的环境，保持最适舍内温度19～22℃、湿度65%左右。结合蛋鸡日龄灵活调整密度，避免过度拥挤。保持圈舍安静，减轻噪音应激，确保蛋鸡健康生长。定时清理鸡粪，保持场地整洁，粪便统一堆放发酵处理；时刻保持鸡舍通风良好，防止氨气浓度升高损伤鸡呼吸道黏膜。定期对场区道路、鸡舍内、器具等进行彻底消毒，对种鸡场孵化车间、设备、种蛋、水槽、料槽、墙面、地面等进行全面消毒，降低蛋鸡大肠杆菌发病概率。污染严重或常发病鸡场适当增加消毒频次， 一般3～5 d要进行一次彻底消毒。

4.3 均衡营养的日粮和洁净的饮水是关键

均衡营养的日粮和洁净的饮水是提高鸡群体质、保证大肠杆菌少发的关键措施。鸡群采食劣质、低水平、营养成分不平衡的日粮，抵抗力便会下降，尤其蛋鸡采食受污染的饲料，感染大肠杆菌的患病率更高。因此，加强饲料的采购、贮存和加工等环节的卫生管理，从源头上防止饲料发霉、变质，减少大肠杆菌的污染。结合蛋鸡日龄，选优质预混料，合理配制日粮，保证营养均衡，满足蛋鸡生长和产蛋对多种营养物质的需求，并提高蛋鸡的体质和抗病力。

饮水不洁是诱发蛋鸡大肠杆菌病的另一重要因素，因此选择自来水、深井水作为蛋鸡饮用水源。定期监测水质，经常清理水井、水塔和水箱等储水设施以及输水管道，用醛类、碘类等刺激性小的消毒剂适时消毒，尤其要注意除去水线里的生物膜。

4.4 投药预防是难点

定期投药是预防大肠杆菌一个不可缺少的有效措施，也是一个难点。要根据兽医专家的建议，根据不同日龄、不同发病史和不同流行季节合理科学用药，切不可滥用。冬季和春季是蛋鸡大肠杆菌病的高发季节，养殖场户应在兽医建议下结合饲养条件、发病情况制定可行的投药预防计划，定期给予高效价廉无残留或低残留的中西药拌料或饮水预防细菌性疾病，同时每隔半个月给2～3 d的多种维生素，在饲料中长期拌入双歧杆菌、酵母菌、乳酸菌等微生态制剂，维持和有效调节蛋鸡肠道菌群平衡，提升蛋鸡抵抗力。注意预防性用药和治疗性用药的区别，避免耐药性发生。

4.5 免疫接种是保障

大肠杆菌有多种血清型，目前市场在售的大肠杆菌疫苗还做不到涵盖每一个血清型，因此了解本地区流行的大肠杆菌血清型，接种适合本场大肠杆菌血清型的疫苗，结合本场实际制定完善的免疫程序，并严格执行，可实现对大肠杆菌病的有效防控。当前常用疫苗包括大肠杆菌病灭活疫苗、大肠杆菌病多价蜂胶疫苗等，推荐使用大肠杆菌蜂胶二联灭活疫苗，蛋鸡在1～2月龄时首免，肌注0.5 mL；开产前复免，肌注0.5 mL。接种疫苗后1周内产生抗体，免疫保护期为1年，确保整个产蛋周期内均有较强的免疫力。对大肠杆菌已污染的鸡场可以用本场分离的大肠杆菌菌株制作灭活菌苗进行免疫接种。同时加强其它疾病的預防接种，防止继发大肠杆菌感染。

参考文献：

[1] 李蕴玉，葛成，焦贺静，等.秦皇岛地区育成鸡大肠杆菌血清型鉴定及耐药性分析[J].中国兽医杂志，2019，55 （08）：71-76.

[2] 徐睿，季芳，李梦龙.鸡致病性大肠杆菌16S rRNA PCR鉴定方法的建立[J].现代畜牧兽医，2016（07）：1-5.