新生儿坏死性小肠结肠炎患儿血清PAF、IL-17的表达及其与临床预后的关系*

赵绪稳 张同强 王金虎 杨福江 杜晓斌 马 林 胡 博

天津市儿童医院(天津大学儿童医院) 300074

坏死性小肠结肠炎(Necrotizing enterocolitis,NEC)是多种因素引起的肠黏膜缺血缺氧性损伤所致小肠及结肠局部或弥漫性坏死疾病,该病主要发生在新生儿群体[1]。新生儿NEC在发病早期一般无典型的症状表现,但是进一步发展可引起肠穿孔及腹膜炎等严重并发症,对新生儿的智力发育造成不良影响,甚至造成患儿死亡,所以对NEC早期诊断及评估有重要的意义[2]。血小板活化因子(Platelet activating factor,PAF)由机体上皮细胞、巨噬细胞、血小板等多种细胞产生,促进血小板聚集及释放氧自由基、血管的扩张以及增加血管通透性,此外也参与胃肠黏膜损伤以及血栓形成的炎症反应疾病过程[3]。白细胞介素-17(Interleukin-17,IL-17)是T细胞来源细胞因子,能刺激上皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞等,起到致炎的作用。目前,关于PAF与IL-17在新生儿NEC的诊断以及预后评估价值的研究报道较少。本文通过回顾性分析的方式,检测新生儿NEC血清PAF、IL-17表达水平,探讨其在患儿临床诊断及预后预测中的价值,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析2020年1月—2022年1月医院新生儿科收治的120例新生儿NEC患儿为实验组,实验组患儿纳入标准：符合《实用新生儿学》[4]对于NEC的相关诊断标准,均是新生儿病患;无先天性代谢性疾病;患儿临床资料完整并在纳入研究前未用其他方法治疗者;患儿家属知情同意并且签署同意书。排除标准：消化道畸形的患儿及合并感染的患儿;围生期缺血疾病的患儿;合并其他感染性疾病的患儿;中途放弃治疗出院的患儿。实验组患儿男71例,女49例;胎龄34～41周,平均胎龄(37.82±1.22)周;早产儿70例,足月儿50例;Bell标准分级：Ⅰ期34例,Ⅱ期62例,Ⅲ期24例。同时选择在医院正常出生的105例健康新生儿为对照组。对照组患儿男65例,女40例;胎龄34～41周,平均胎龄(38.01±1.25)周;早产儿58例,足月儿47例。两组新生儿在性别、年龄资料对比差异无统计学意义(P>0.05)。本次研究经医院医学伦理委员会批准同意。

1.2 方法

1.2.1 血清标本检测：采集新生儿足底静脉血4ml作为血液标本,注入血液试管中保存,血样标本置于离心机以3 000r/min速度持续离心15min分离血清,将血清标本置于-80℃低温下保存待检。应用双抗夹心酶联免疫吸附法测定血清PAF水平,应用酶联免疫吸附法检测血清IL-17水平,相关检测操作均严格参照试剂盒说明书进行。

1.2.2 Bell标准分级：Ⅰ期：表现为全身非特异性症状以及胃肠道表现,经腹X线检查显示肠间隙增宽,肠壁增厚但无肠壁积气。Ⅱ期：除了Ⅰ期典型征象,还可见肠鸣音消失以及腹痛加重,经X线检查见肠扩张、肠梗阻,肠壁积气征或者合并门静脉积气表现。Ⅲ期：全身出现进行性恶化情况,表现心动过缓、严重呼吸暂停、酸中毒以及弥散型的血管内凝血表现,多伴腹膜炎体征,经X线检查常见肠穿孔。分析不同分期患儿PAF、IL-17的血清水平。

1.2.3 预后结局：新生儿出生后60d,记录患儿的生存情况,对实验组患儿预后情况进行评价,预后良好：患儿获得全肠道营养支持,或者虽然未达到全肠道营养供应,但是患儿生命体征稳定,出院后的情况良好;预后不良：新生儿在60d死亡。分析PAF、IL-17的血清水平对NEC患儿不良预后的预测价值。

2 结果

2.1 两组新生儿血清PAF、IL-17水平比较 同对照组的患儿比较,实验组的患儿血清PAF、IL-17指标水平明显更高(P<0.05),见表1。

表1 两组新生儿血清PAF、IL-17水平比较

2.2 实验组不同Bell分期者血清PAF、IL-17水平 随着Bell分期的不断增加,血清PAF、IL-17水平也逐渐升高,Ⅲ期>Ⅱ期>Ⅰ期,两两资料比较,差异具有统计学意义(P<0.05),见表2。

表2 不同Bell分期者血清PAF、IL-17水平比较

2.3 血清PAF、IL-17对新生儿NEC的诊断价值 新生儿NEC的临床诊断,PAF、IL-17单项检测,在诊断灵敏度、特异性、准确度无明显的差异,而PAF、IL-17联合,诊断的灵敏度、特异度、准确度分别为85.36%、85.85%、86.85%,联合指标的诊断灵敏度与准确度均高于单项检测,见表3。

表3 血清PAF、IL-17对新生儿NEC的诊断价值分析

2.4 血清PSF-IL-17对预测新生儿NEC不良预后的价值 对患儿的预后进行随访,随访显示在实验组的NEC患儿中,7例患儿在60d存在病死情况,血清PAF、IL-17水平预测新生儿NEC预后不良的AUC面积分别为0.681(0.602～0.753)、0.704(0.626～0.771)。血清PAF≥64.21μg/L预测新生儿NE患儿60d的病死情况,预测的灵敏度、特异度分别是64.25%、94.13%;血清IL-17≥20.81ng/L预测新生儿NEC 60d病死率的灵敏度、特异度分别是74.16%、89.26%。

3 讨论

多项研究显示病原微生物感染以及炎症反应为新生儿NEC发病的主要原因,多种白细胞介素、白三烯与PAF等炎症介质参与到新生儿NEC的发生及发展过程[5]。PAF主要是内毒素和细胞因子诱导生成的磷脂介质,这一介质作用主要能提升血管通透性、促进血小板活化及白细胞凝聚,刺激花生四烯酸释放,对于心脏存在负性激励的作用[6]。血小板活化因子存在广泛致血小板聚集作用,可使中性粒细胞聚集以及增加血管通透性。杨红等[7]的研究中,分析NEC的早产儿在PAF水平的差异,通过ELISA法检测结果显示,早产儿NEC的PAF浓度明显高于健康足月儿血液中PAF的浓度,证实早产儿NEC发病,血液中PAF浓度增高,并且反映了PAF在病理情况下参与到NEC的发病中。孙子梅等[8]研究结果显示同对照组的大鼠比较,NEC模型组大鼠肠组织PAF水平升高。这些研究证实了PAF在NEC的发生发展中起到一定的作用。本文结果显示,实验组的患儿在血清PAF水平显著高于对照组,同时实验组患儿随着Bell分期的增加,血清PAF水平也升高,差异显著,证实PAF对于早期诊断新生儿NEC有积极作用。PAF作为可促进血管扩张及参与胃肠黏膜损伤的物质,PAF通过缺氧及内毒素协同作用诱发肠坏死,此外PAF可引发肠上皮细胞中EE-钙粘连素络氨酸磷酸化,增加肠黏膜通透性,促进细菌内毒素进入肠上皮细胞,导致炎症介质失控性分泌,进而诱发NEC[9]。IL-17是重要的细胞因子,在宿主防御、自身免疫疾病发病以及肿瘤中起到重要作用,相关研究也渐渐成为医学、免疫学研究热点内容,IL-17可推动自身免疫性疾病的炎症病变,这些细胞因子同新生儿NEC发病存在一定的联系[10]。本文显示,实验组IL-17水平高于对照组,并且随着Bell分期的增加,IL-17水平升高。

本文中,PAF、IL-17联合检测在诊断新生儿NEC的敏感度与准确度方面高于单项监测,AUC值为0.821。此外新生儿NEC若是处理不及时也可出现不良预后情况,主要不良预后为死亡,本次纳入实验组的120例患儿,出生后60d的病死例数7例,血清PAF、IL-17对于预测新生儿NEC患儿60d病死率,敏感度分别为64.25%、74.16%,特异度则是分别为94.13%、89.26%,提示检测血清PAF与IL-17对于新生儿NEC预后的预测有一定的价值,为临床预防提供科学参考借鉴。

综上所述,血清PAF、IL-17检测在新生儿NEC的诊断以及预后评估中有积极作用,并能预测患儿病情严重程度,可作为患儿诊疗及干预的重要参照指标。