血清IL-17A、TGF-β对高级别CIN患者术后复发的预测价值

徐琦

北京市西城区妇幼保健院,北京 100054

宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)为宫颈癌前病变,若不能及时有效治疗,可发展为原位癌[1]。宫颈锥切术因创伤小,广泛应用于高级别CIN患者中,但术后仍存在复发风险[2]。研究指出,CIN患者术后复发可能导致宫颈癌风险增加[2]。因此,寻找可预测高级别CIN患者术后复发的相关指标十分必要。转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)可调节细胞的增殖、分化,抑制免疫功能,促进血管生成,在组织损伤、修复及重塑过程中有重要作用[3]。研究指出,在CIN患者及宫颈癌患者中TGF-β表达明显上升[4]。白细胞介素(interleukin,IL)-17A是一种炎症细胞因子,在多种恶性肿瘤的发生发展中起着重要的作用,与宫颈癌发生、发展密切相关[5]。本文分析血清IL-17A、TGF-β对高级别CIN患者术后复发的预测价值。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选取2019年1月—2020年6月本院收治的高级别CIN患者223例,年龄24～63岁,平均(31.10±3.52)岁;病程1～5年,平均(3.08±0.98)年。本研究符合《赫尔辛基宣言》并经医院医学伦理委员会批准,所有患者均签署知情同意书。

纳入标准:①符合《妇产科学》[6]中关于高级别CIN的诊断标准,且经薄层液基细胞学、宫颈活组织病理学检查确诊;②均首次接受宫颈锥切术治疗。排除标准:①有既往宫腔手术史;②合并心脑血管疾病;③合并严重脏器功能损伤;④身体其他部位癌变或肿瘤;⑤妊娠期、哺乳期女性;⑥合并免疫缺陷综合征;⑦合并各种急慢性感染性疾病;⑧合并阴道上皮内瘤变。

1.2 术后复发评估及分组方法

术后每3个月对患者进行1次细胞学检查,至术后1年时经病理学检查统计所有患者术后复发情况,根据结果分为复发组与未复发组。

1.3 资料收集

收集两组患者资料,包括年龄、产次、月经状况(绝经、未绝经)、是否累及腺体、锥切方式[宫颈冷刀锥切术(cold knife conization,CKC)、宫颈环形电切除术(loop electrosurgical excision of cervix,LEEP)]、切缘状态(阴性、阳性)。

1.4 IL-17A、鳞状上皮细胞癌抗原、TGF-β水平测定

取患者术前空腹静脉血5 mL,3 000 r/min离心10 min,离心半径为15 cm,分离上层血清,采用酶联免疫吸附法测定IL-17A、鳞状上皮细胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCC)水平,采用免疫发光法测定TGF-β水平。

1.5 Hr-HPV病毒载量检测

术前,采用无菌宫颈刷在宫颈表面顺时针刷5圈,将宫颈刷置于含有0.9%无菌氯化钠溶液的EP管中,适当摇动后,收集1 mL样本,低温13 000 r/min离心10 min,去上清,加入50 μL细胞裂解液于100 ℃金属浴10 min,低温13 000 r/min离心10 min保留上清,采用第二代杂交捕获法检测13种高危型HPV,HPV≥1.0 ng/L为阳性。

1.6 统计学处理法

采用SPSS 25.0软件进行数据处理。计数资料采用χ2检验,计量资料采用独立样本t检验。Logistic回归分析血清IL-17A、TGF-β水平与高级别CIN患者术后复发的关系。绘制ROC,并计算曲线下面积(area under the curve,AUC)值,检验血清IL-17A、TGF-β预测高级别CIN患者术后复发的价值。AUC值>0.9为预测性能较高,0.71～0.90为预测性能一般,0.5～0.7为预测性能较低,<0.5为预测性能无。采用R4.1.0统计软件和“rmda”软件包,以净受益率为纵坐标,高风险阈值为横坐标,绘制决策曲线,分析联合血清IL-17A、TGF-β水平的预测模型预测高级别CIN患者术后复发的价值。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 复发组与未复发组患者资料比较

223例高级别CIN患者经宫颈锥切术后1年复发19例,复发率为8.52%。复发组血清IL-17A、TGF-β水平高于未复发组(P<0.05;表1)。

表1 复发组与未复发组患者资料比较

2.2 Logistic回归分析结果

将高级别CIN患者术后复发情况作为因变量(1=复发,0=未复发),将基线资料比较差异有统计学意义的变量作为自变量,逐个纳入作Logistics回归分析,后将P条件放宽至<0.2,纳入符合条件的变量(IL-17A、TGF-β)作为自变量(均为连续变量),建立多元回归模型。结果显示,高级别CIN患者术前高水平血清IL-17A、TGF-β可能是患者术后复发的危险因素(P<0.05;表2)。

表2 Logistic回归分析结果

2.3 血清IL-17A、TGF-β预测高级别CIN患者术后复发的ROC曲线

将高级别CIN患者术后复发情况作为状态变量(1=复发,0=未复发),将术前血清IL-17A、TGF-β水平作为检验变量,绘制ROC曲线,结果显示,术前血清IL-17A、TGF-β水平预测高级别CIN患者术后复发风险的AUC均>0.80,预测价值理想(图1、表3)。

图1 血清IL-17A、TGF-β预测高级别CIN患者术后复发的ROC曲线图

表3 血清IL-17A、TGF-β预测高级别CIN患者术后复发ROC结果分析

2.4 血清IL-17A、TGF-β预测高级别CIN患者术后复发的决策曲线

结果显示,当阈概率为0～0.31或0.62～1时,净受益率≥0;血清IL-17A与TGF-β联合预测高级别CIN患者术后复发的净获益率优于单独预测(图2)。

图2 血清IL-17A、TGF-β预测高级别CIN患者术后复发的决策曲线图

3 讨 论

董学彩等[7]研究显示,60例行宫颈锥切术的CIN患者术后2年内有6例复发,复发率为10%。本文223例患者经宫颈锥切术后1年复发19例,复发率为8.52%,与上述结论相似,提示高级别CIN患者术后有较高的复发风险。研究指出,术后复发会增加再次手术时的负担及宫颈癌发生风险,且会影响患者心理,不利于预后[8]。

研究指出,免疫功能紊乱在CIN的发生、发展过程中有重要作用[9]。Th17为重要炎症细胞,在机体防御反应和自身免疫性疾病中有重要临床意义,且与多种感染性、免疫性疾病密切相关[10]。IL-17A是Th17分泌的主要炎症介质,有趋化中性粒细胞生理效能的作用,还可促使细胞释放炎症因子,促进细胞的增殖[11]。研究指出,CIN、宫颈癌患者IL-17A水平显著高于健康人群[12]。TGF-β是一类调节细胞生长和分化的细胞因子,在细胞的分化、增殖、血管生成中可起到重要作用[13]。当细胞异常增生或恶变时,TGF-β信号通路的组成部分发生改变,通过抑制肿瘤免疫应答、增加细胞外基质数量,从而促进肿瘤血管生成[14]。研究指出,TGF-β在CIN和宫颈癌患者中呈异常过表达[15]。本文结果显示,复发组血清IL-17A、TGF-β水平高于未复发组,说明术前血清高水平IL-17A、TGF-β与术后复发有关。文献[16]报道,IL-17A可促进肿瘤坏死因子α、IL-6等导致炎性反应的发生,且随着CIN级别的升高而加重。术前血清IL-17A过表达进一步释放炎症因子,促进细胞增殖,影响宫颈锥切术治疗效果,增加术后复发风险[17]。而TGF-β可调节细胞生长、分化及血管形成,参与机体抗肿瘤免疫等,且与CIN的发生发展密切相关[18]。若术前血清TGF-β异常过表达可通过自分泌方式调节细胞生长,增加细胞外基质的产生,为肿瘤的生长和发展提供更好的环境,增加术后复发风险[19]。

为进一步证实血清IL-17A、TGF-β水平与高级别CIN患者术后复发的关系,本文Logistic回归分析、ROC曲线及决策曲线结果显示,联合血清IL-17A、TGF-β水平预测高级别CIN患者术后复发的净受益率优于单纯血清IL-17A或TGF-β。

综上所述,血清IL-17A、TGF-β水平与高级别CIN患者术后复发有关,且具有一定价值,联合预测净受益率更高。