基于微RNA-22-3p探讨双醋瑞因联合依托考昔治疗痛风性关节炎的作用机制

安丽欣，张倩，李昆，刘耔序，石蕊

作者单位：秦皇岛市第一医院风湿免疫科，河北 秦皇岛066000

痛风是由嘌呤代谢异常导致的反复发作性疾病［1］。有研究指出，40 岁以上男性人群是痛风性关节炎的高发人群［2］。目前临床中在对痛风性关节炎病人进行治疗时采用的传统药物多具有多种不同不良反应，因此亟待寻找不良反应少、新型、自源头有效阻断痛风发生药物［3］。研究结果表明，在急性痛风性关节炎病人体内包括白细胞介素（IL）-1等炎性细胞因子起到重要作用，且IL-1 阻断剂已逐渐成为对痛风性关节炎病人的选择之一，因此双醋瑞因联合依托考昔联合应用已逐渐成为重要的临床治疗方案，但其作用机制仍未见报道［4］。有研究认为，微RNA（miR）-22-3p 簇具有调节炎症反应的作用［5］。因此本研究拟选择痛风性关节炎病人作为研究对象，基于miR-22-3p分析双醋瑞因联合依托考昔治疗痛风性关节炎的作用机制，为临床应用提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料选择2021 年3—9 月秦皇岛市第一医院收治的80例痛风性关节炎病人作为研究对象，并依照随机信封法分为观察组和对照组，每组40例。观察组中男34 例，女6 例，年龄（48.92±5.19）岁，体质量指数（BMI）（25.49±0.74）kg∕m2，对照组中男35 例，女5 例，年龄（49.18±5.23）岁，BMI（25.37±0.68）kg∕m2，同期选择50 例高尿酸血症病人作为高尿酸组，其中男42 例，女8 例，年龄（48.39±6.02）岁，BMI（25.34±0.72）kg∕m2，三组性别、年龄及BMI 等一般资料差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究经秦皇岛市第一医院伦理委员会审议并批准（院字〔2020〕13号）。

1.2 纳入与排除标准

1.2.1纳入标准（1）符合美国风湿病协会痛风诊断标准；（2）纳入前3 个月内未使用过激素类药物者；（3）纳入前接受痛风性关节炎药物治疗；（4）临床资料完整，知情并签署知情同意书。

1.2.2排除标准（1）精神障碍等疾病者；（2）伴有肝、肾、心、脑和造血系统等严重原发性疾病者；（3）无法合作者；（4）伴有严重肝肾功能不全者；（5）病人及家属未签署知情同意书者。

1.3 治疗方法对照组给予依托考昔进行治疗，每天一次口服120 mg 依托考昔，持续治疗一周。观察组在对照组基础上给予每天一次口服50 mg 双醋瑞因。高尿酸组病人每天口服50 mg 苯溴马隆进行排尿酸治疗。病人治疗期间足量饮水，避免关节损伤，避免高嘌呤食物，严格戒酒，避免情绪紧张、过度劳累、久处湿冷环境。

1.4 观察指标治疗后参照《中药新药临床指导原则》中标准对病人治疗临床疗效进行判断，共分为治愈、显效、有效、无效。治愈：病人关节活动正常，红肿、疼痛等症状消失，症候积分减少95%以上；显效：病人关节活动不受限制，红肿、疼痛症状消失，症候积分减少70%～94%；有效：病人关节活动受轻度限制，关节红肿、疼痛症状基本消失，症候积分减少30%～69%；无效：病人关节活动情况无明显改善，病人关节红肿、疼痛情况未见好转，症候积分减少30%以下。治疗前及治疗后采用数字等级量表（NRS-11）对病人关节疼痛进行调查，满分11 分，分数越高疼痛越严重。同时对病人症状体征积分进行评估，共包括三个维度分别为关节压痛、关节急性红肿及关节活动障碍情况，采用三级评分法，分数越高临床症状越严重。治疗前后采集受试者空腹静脉血，行实验室指标检查包括C 反应蛋白（CRP）、血沉、肌酐、尿酸，并行ELISA 检测受试者血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-1、IL-6、IL-8 水平；采用密度梯度离心法分离外周血中单个核细胞（PBMCs），提取外周血PBMCs 中总RNA 水平，后采用实时荧光定量PCR 法进行检测其中miR-22-3p 及U6 基因水平，并以2-ΔΔCt对基因相对表达水平进行计算。

1.5 统计学方法采用SPSS 23.0 软件进行数据分析，结果数据近似正态分布以描述，组间比较采用t检验，多组间两两比较采用单因素的方差分析，采用Spearman 相关性检验分析miR-22-3p 探讨双醋瑞因联合依托考昔治疗痛风性关节炎疗效相关性，采用线性回归模型分析miR-22-3p 与尿酸水平关系。计数资料（临床疗效）以例（%）表示，行χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组临床疗效比较研究结果显示，观察组病人治疗临床总有效率为97.50%，显著高于对照组的90.00%（P＜0.05），见表1。

表1 痛风性关节炎80例临床疗效比较∕例（%）

2.2 两组病人NRS-11 及症状体征积分比较研究结果显示，治疗前两组病人NRS-11及症状体征积分差异无统计学意义（P＞0.05），治疗后两组病人NRS-11 及症状体征积分均显著低于治疗前（P＜0.05），观察组病人治疗后NRS-11 及症状体征积分均显著低于对照组（P＜0.05）。见表2。

表2 痛风性关节炎80例数字等级量表（NRS-11）及症状体征积分比较∕（分，）

表2 痛风性关节炎80例数字等级量表（NRS-11）及症状体征积分比较∕（分，）

2.3 两组病人血中实验室指标比较治疗前两组病人血中CRP、血沉、肌酐、尿酸差异无统计学意义（P＞0.05），治疗后两组病人CRP、血沉、肌酐、尿酸均明显低于治疗前（P＜0.05），且治疗后观察组均显著低于对照组（P＜0.05）。见表3。

表3 痛风性关节炎80例血中实验室指标比较∕

表3 痛风性关节炎80例血中实验室指标比较∕

注：CRP为C反应蛋白。

2.4 两组病人治疗前后炎性因子水平比较治疗前两组病人血中IL-1、IL-6、IL-18、TNF-α 差异无统计学意义（P＞0.05），治疗后两组病人IL-1、IL-6、IL-18、TNF-α 均显著低于治疗前（P＜0.05），且治疗后观察组均显著低于对照组（P＜0.05），见表4。

表4 痛风性关节炎80例治疗前后炎性因子水平比较∕（ng∕L，）

表4 痛风性关节炎80例治疗前后炎性因子水平比较∕（ng∕L，）

注：IL-1为白细胞介素-1，IL-6为白细胞介素-6，IL-8为白细胞介素-8，TNF-α为肿瘤坏死因子。

2.5 三组病人治疗前后miR-22-3p 水平比较治疗前观察组和对照组病人血中miR-22-3p 水平差异无统计学意义（P＞0.05），治疗后两组病人miR-22-3p水平显著高于治疗前（P＜0.05），观察组高于对照组，（P＜0.05）；治疗前高尿酸组病人血中miR-22-3p 水平均明显高于观察组和对照组（P＜0.05）。见表5。

表5 痛风性关节炎80例和高尿酸血症50例治疗前后miR-22-3p水平比较∕

表5 痛风性关节炎80例和高尿酸血症50例治疗前后miR-22-3p水平比较∕

2.6 治疗后观察组病人血中miR-22-3p 与尿酸的关系本组研究结果显示，治疗后观察组病人血中miR-22-3p 与尿酸水平呈显著负相关关系，其相关性模型为Y=-119.58X+488.87，R²=0.914 3。

2.7 治疗后观察组病人血中miR-22-3p 与治疗疗效的关系研究结果显示，痛风性关节炎病人血中miR-22-3p 与双醋瑞因联合依托考昔治疗临床疗效呈显著性负相关关系（r=-0.64，P＜0.05）。

3 讨论

痛风临床中共表现3 个阶段即急性痛风发作期、高尿酸血症、慢性痛风［6］。有研究指出，痛风病程迁延难愈，临床中主要表现为关节畸形、痛风石、尿酸性尿路结石、慢性间质性肾炎等［7］。单钠尿酸盐结晶是目前公认的痛风致病因子，一般情况下关节软骨浅层是尿酸盐结晶主要形成部位。痛风病人临床中主要表现为痛风石性痛风、反复发作性急性关节炎、尿酸性肾病、尿酸性尿路结石、关节残疾畸形、肾功能不全［8-9］。

近年来流行病学研究结果表明，全球范围内痛风的临床发病率和患病率均呈现明显逐年上市趋势［10］，且也伴随出现一定的年轻化趋势。治疗药物是目前痛风治疗的主要手段，并具有较高的临床疗效，但采用药物方案治疗过程中均可能导致病人出现不同程度不良反应［11］。有学者通过表观遗传学研究显示，在痛风的治疗过程中遗传因素在其中扮演重要角色，且表观遗传学的可逆性也提示其可称为对痛风进行靶向治疗和早期诊断的方案之一［12］。本组研究结果显示，治疗后观察组病人NRS-11及症状体征积分均明显低于对照组，治疗后观察组病人CRP、血沉、肌酐、尿酸、IL-1、IL-6、IL-18、TNF-α均明显低于对照组。分析认为，采用双醋瑞因联合依托考昔治疗痛风性关节炎后可有效提高病人治疗临床疗效，降低病人体内炎性因子及实验室指标，改善病人临床症状。

作为体内基因重要的表达调控因子，miRNA 在多种细胞的分化、生长、发育、凋亡过程中扮演重要的角色，且miRNA 表达失调可能导致机体出现不同程度的炎症性疾病、免疫功能紊乱、自身免疫性疾病，但miRNA 在痛风发生发展中的作用机制仍鲜有报 道［13-14］。miR-22-3p 是 体内中的高度保守miRNAs，并在体内炎症调节、免疫应答等方面扮演重要角色。类风湿关节炎病人滑膜组织、PBMC 中smiR-22-3p 呈明显的高表达状态，与TNF-α、IL-1 等炎性因子关系密切，在系统性红斑狼疮病人PBMCs 中miR-22-3p 表达则显著降低［15-16］。研究发现，相较于健康者或间歇期痛风病人，在原发性急性痛风性关节炎病人体内miR-22-3p 呈现明显的低表达状态［17-18］。本研究显示观察组病人治疗后miR-22-3p水平明显高于对照组，分析病人各指标与尿酸水平关系结果显示，治疗后观察组病人血中miR-22-3p与尿酸水平呈显著负相关关系，其相关性模型为Y=-119.58X+488.87。进一步分析miR-22-3p 与病人治疗疗效关系显示，痛风性关节炎病人血中miR-22-3p 与双醋瑞因联合依托考昔治疗临床疗效呈显著性负相关关系。分析认为，采用双醋瑞因联合依托考昔治疗痛风性关节炎后可有效调控病人体内miR-22-3p 水平，进而有效调控病人体内尿酸水平，改善病人治疗疗效。

但本研究临床样本数较少，且并未对病人体内miR-22-3p 的动态变化水平进行监测，有待后续持续研究和追踪。