血清肝细胞生长因子评估儿童肺炎支原体肺炎的临床价值

李超

肺炎支原体作为引发小儿呼吸道感染的一个主要病原，同时也是所有年龄段患儿发生社区获得性肺炎的一个主要原因，近些年这一疾病发生率明显提高，特别是在婴幼儿人群中[1]。肺炎支原体通常寄居在呼吸道上皮细胞，所以肺炎支原体感染通常会导致呼吸道感染，包括上呼吸道感染、气管炎、支气管炎、肺炎，但近些年随着研究不断深入，发现肺炎支原体感染容易导致肺外并发症[2]。肺炎支原体肺炎在儿童社区获得性肺炎患儿中占比达到10%～40%，而且儿童重症肺炎支原体肺炎以及难治性支原体肺炎病例数明显增多[3]。尽管大部分肺炎支原体肺炎患儿无严重症状表现，预后良好，部分患儿以自限性为主，但也一些患儿合并肺外并发症，这对患儿身体健康有严重影响，而且影响其家庭生活质量。当前对于重症肺炎支原体肺炎并未形成统一诊断标准，文章从2019年1月—2021年6月茂名市人民医院择取60例儿童肺炎患儿和20名健康儿童作为研究对象，探讨在儿童肺炎支原体肺炎评估中实施血清肝细胞生长因子水平检测的临床价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

从2019年1月—2021年6月茂名市人民医院择取60例肺炎支原体肺炎患儿作为研究组，按照病情严重程度将研究组患儿分为两组，20例重症肺炎支原体肺炎患儿纳入研究一组，年龄3～14岁，平均（7.36±3.41）岁，男6例，女14例；40例非重症肺炎支原体肺炎患儿纳入研究二组，年龄3～14岁，平均（5.78±3.67）岁，男17例，女23例；另外择取20名健康体检儿童作为对照组，年龄3～14岁，平均（6.69±3.33）岁，男10例，女10例。经检验组间对比差异无统计学意义（P＞0.05）。本次研究经医院伦理委员会审批，家属知晓且同意参与本次研究。纳入标准：经肺部影像学检查、痰培养、血培养以及血清MP-IgM检查确诊，符合第8版《诸福棠实用儿科学》[4]对应诊断标准，可以配合检查，临床资料完整。排除标准：合并其他病原感染、重症肺炎病史、反复呼吸道感染病史、慢性肺疾病病史、心血管疾病、先天性或继发性免疫抑制或缺陷、支气管哮喘、结缔组织疾病、肝肾疾病、不配合、临床资料不全等。

1.2 方法

所选研究对象均于晨起空腹状态采集1.5 mL静脉血，并用抗凝管收集，置于室温条件下20～30 min，之后对血液标本予以离心处理，离心速度为3 000 r/min，离心时间为5 min，离心半径为13.5 cm，获取上层清液，并置于-80℃冰箱内进行保存。通过酶联免疫吸附法对血清肝细胞生长因子水平进行检测，先将试剂盒取出，置于25℃环境下30 min，全程在该温度下进行，将酶标板取出，以标准品次序为准，在空白微孔内加入50 μL标准品溶液，之后再加入样品50 μL，在空白对照中加入蒸馏水50 μL，样品孔内加入生物素10 μL，在除空白对照孔外各孔加入酶标记溶液100 μL，用封口胶对酶标板密封处理，置于37℃环境进行孵育，时间为1 h，之后对酶标板进行充分清洗3～5次，确保各孔水压充足，洗涤之后通过吸水纸拍干，之后在除空白对照孔外各孔内加入显色剂A和B，每种50 μL，置于25℃条件下避光反应15 min，最后加入终止液50 μL，终止反应，并进行观察。通过全自动生化分析仪测定研究组患儿的血清C-反应蛋白浓度、乳酸脱氢酶浓度，其中血清C-反应蛋白浓度通过乳胶免疫比浊法进行检测，先将试剂盒装载在贝克曼库尔特AU5800试剂仓中，将校准品取出，并通过加样枪吸取95 μL，将其置于样品杯内，上机定标，定标之后，利用贝克曼库尔特生化分析仪查看定标曲线合格与否，待定标合格之后，实施质量控制程序，将质控液取出，通过加样枪吸取75 μL置于样品杯内，质控合格之后进行血清样本测定。静脉血采集之后，置于分离胶促凝管内，按照3 000 r/min速度离心处理5 min，获得上层清液，置于样品杯内，装载在贝克曼库尔特AU5800分析仪上进行测定。通过乳酸底物法对血清乳酸脱氢酶浓度进行测定，先将试剂盒装载在贝克曼库尔特AU5800试剂仓中，将生化多项校准品取出，并通过加样枪吸取98 μL，将其置于样品杯内，上机定标，定标之后，利用贝克曼库尔特生化分析仪查看定标曲线合格与否，待定标合格之后，实施质量控制程序，将配套两水平生化多项质控品取出，通过加样枪吸取85 μL置于样品杯内，质控合格之后进行血清样本测定。静脉血采集之后，置于分离胶促凝管内，按照3 000 r/min速度离心处理5 min，获得上层清液，置于样品杯内，装载在贝克曼库尔特AU5800分析仪上进行测定。

1.3 观察指标

（1）对比研究组与对照组的血清肝细胞生长因子、C-反应蛋白、乳酸脱氢酶水平差异。（2）临床特征与实验室特点：涉及到年龄、住院时间、胸片类型、性别、入院前发热时间、入院前咳嗽时间以及实验室检查（白细胞、中性粒细胞、血红蛋白、血小板、丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶）结果。（3）对照研究一组和研究二组的血清肝细胞生长因子（＜4 500 pg/mL）、血清C-反应蛋白浓度（0.8～8 mg/L）、乳酸脱氢酶浓度（135.0 ～ 215.0 U/L）[5]。

1.4 统计学方法

本次研究通过SPSS 22.0统计学软件分析，计量资料以（）表示，采用t检验。计数资料以n（%）表示，采用χ2检验。以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 研究组与对照组的血清肝细胞生长因子、C-反应蛋白、乳酸脱氢酶水平对比

研究组血清肝细胞生长因子水平、C-反应蛋白、乳酸脱氢酶水平高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 研究组与对照组的血清肝细胞生长因子、C-反应蛋白、乳酸脱氢酶水平对比（）

表1 研究组与对照组的血清肝细胞生长因子、C-反应蛋白、乳酸脱氢酶水平对比（）

组别 例数 血清肝细胞生长因子（pg/mL） 血清C-反应蛋白浓度（mg/L） 乳酸脱氢酶浓度（U/L）研究组 60 6 507.82±1 895.89 11.56±4.52 297.85±56.96对照组 20 4 175.23±248.56 3.25±1.02 154.05±15.88 t值 - 9.294 13.264 17.609 P值 - ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.2 研究一组与研究二组血清肝细胞生长因子、血清C-反应蛋白浓度、乳酸脱氢酶浓度对比

研究一组的血清肝细胞生长因子、血清C-反应蛋白浓度、乳酸脱氢酶浓度明显高于研究二组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 研究一组与研究二组血清肝细胞生长因子、血清C-反应蛋白浓度、乳酸脱氢酶浓度对比（）

表2 研究一组与研究二组血清肝细胞生长因子、血清C-反应蛋白浓度、乳酸脱氢酶浓度对比（）

组别 例数 血清肝细胞生长因子（pg/mL） 血清C-反应蛋白浓度（mg/L） 乳酸脱氢酶浓度（U/L）研究一组 20 7 667.89±1 962.56 17.89±5.56 337.02±120.33研究二组 40 5 682.67±1 352.66 9.89±2.43 256.89±54.34 t值 - 4.067 6.147 2.837 P值 - ＜ 0.001 ＜ 0.001 0.005

2.3 研究一组与研究二组临床特征与实验室特点对比

从临床特征与实验室特点分析，研究一组年龄大于研究二组，住院时间比研究二组长，支气管肺炎类型的胸片患者多于研究二组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表 3。

表3 研究一组与研究二组临床特征与实验室特点对比

表3 （续）

3 讨论

肺炎支原体属于原核生物，可以自行繁殖，介于细菌、病毒之间，同时也是儿童时期肺炎等呼吸道感染的主要病原。上呼吸道感染患儿通常会出现咳嗽、咯痰、咽红等现象，而下呼吸道感染患儿则会出现咳嗽以及发热等症状，咳嗽以阵发性剧烈干咳为主，与百日咳症状相似，可以持续数周，对患儿睡眠状况有不良影响，甚至引发呼吸困难症状[6]。肺炎支原体肺炎属于下呼吸道感染，发热属于重要表现，发热时间可以持续超过1周，大约50%的肺炎支原体肺炎患儿会出现这一症状。肺炎支原体肺炎患儿大多数起病缓慢，但也有部分患儿发病急，潜伏期通常在2～3周，症状严重程度不同，通常伴随发热症状，另外还会出现头痛、刺激性咳嗽、胸骨下疼痛、畏寒、厌食、咽痛等现象[7]。近些年，婴幼儿肺炎支原体肺炎发生率明显提高，而且以急性发病为主，病程较长，主要表现为喘憋、呼吸困难、喘鸣音等，同时重症病例也明显增加，一些患儿甚至出现肺坏死、胸腔积液等严重并发症，所以需要予以重视，对其及时诊断与治疗，以改善治疗效果[8]。

肝细胞生长因子作为一种细胞因子，对急性受损组织可以起到保护作用，同时可以起到促进受损组织再生作用，最初是在成年大鼠干细胞内作为有丝分裂原内发现，同时可以在某些肿瘤细胞内表现出细菌毒性作用。肝细胞生长因子主要来源于肺泡巨噬细胞、支气管上皮细胞、中性粒细胞，不仅对急性肺损伤有修复作用，同时对肺部炎症也有改善作用[9]。据相关研究指出，军团肺炎病例的血清内肝细胞生长因子水平明显比健康人群高，而且死亡患者明显高于存活患者[10]。同时也有研究指出，急性呼吸窘迫综合征、急性肺损伤患者的肺泡液内肝细胞生长因子水平明显升高，其升高与死亡率有一定相关性[11-12]。如果肺炎支原体肺炎患儿病情严重，则会出现局部缺氧缺血，还会伴随酸中毒，另外一些肺炎支原体肺炎患儿还会出现肺损伤，甚至发展为致死性疾病，在多种促炎因子作用下对肝细胞生长因子合成产生刺激。细菌性肺炎、军团菌肺炎患者中肝细胞生长因子水平明显升高，这也是肺炎支原体肺炎患儿血清肝细胞生长因子水平升高的证明[13-15]。本次研究中，重症肺炎支原体肺炎、非重症肺炎支原体肺炎、健康儿童的血清肝细胞生长因子两两对比中发现，重症肺炎支原体肺炎、非重症肺炎支原体肺炎患儿的血清肝细胞生长因子明显高于健康儿童，说明肺炎支原体肺炎患儿血清肝细胞生长因子水平提升提示血清肝细胞生长因子参与肺炎支原体肺炎的发病机制。

综上所述，在儿童肺炎支原体肺炎评估中，血清肝细胞生长因子水平检测具备显著临床价值，可以评估病情严重程度，还为儿童肺炎支原体肺炎后期临床评估诊断标准指定提供了借鉴内容。