259例Gilbert综合征UGT1A1基因检测分析

冯家立 章莉莎

1.华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科 (湖北 武汉， 430030) 2.华中科技大学同济医学院附属同济医院健康管理中心

Gilbert综合征(GS)是一种由于遗传性或获得性葡萄糖醛酸转移酶活性减低或缺乏，导致肝细胞摄取非结合胆红素障碍所致的非结合胆红素血症[1,2]。Gilbert综合征在人群中的发病率为3%～7%，患者家族成员中有25%～50%患有此病，表现为慢性、间歇性、非溶血性、间接胆红素增高血症，大多数患者无明显症状，少数患者伴有乏力、恶心、纳差、腹胀、肝区不适等非特异性症状[3]，其就诊率和诊断率不高，容易误诊。我院自2016年1月开展高胆红素血症易感基因位点检测，其结果与Gilbert综合征相关，本文回顾性总结、分析我院体检中心用该检测方法筛查的259例Gilbert综合征患者，以提高对本病的认识，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 259例受试者均来源于2016年1月至2018年12月华中科技大学同济医学院附属同济医院体检中心体检者，其中男性200例(77.2%)，女性59例(22.8%)；最小年龄为17岁，最大年龄为69岁，平均42.8岁，受试者年龄分布情况见表1。所有体检者总胆红素增高，以间接胆红素增高为主，血常规、肝功能、腹部B超结果均正常，排除溶血性黄疸和病毒性肝炎。

表1 259例受试者年龄分布情况

1.2 方法 259例受试者均自愿接受高胆红素血症易感基因位点检测。外周血DNA提取采用过柱法，使用外周血DNA提取试剂盒(DNeasy Blood & Tissue kit，美国QIAGEN公司)，针对高胆红素血症易感基因(UGT1A1)常见致病性位点，包括UGT1A1*28、p.Gly71Arg、p.Pro229Gln、p.Pro364Leu、p.Arg367Cys、p.Tyr486Asp，在保守区域设计特异性引物，采用PCR扩增和Sanger测序检测这些位点的基因序列。

1.3 诊断标准 Gilbert综合征主要诊断依据：①黄疸以间接胆红素增高为主，直接胆红素可增高或正常；②临床症状较轻；③血常规、肝功能、病毒性肝炎病原学等实验室检查无异常；④肝脏穿刺病理检查，组织学结构基本正常或呈慢性炎症改变；⑤基因诊断。

1.4 纳入及排除标准 纳入标准：符合以上Gilbert综合征主要诊断标准且资料完整。排除标准：不符合以上Gilbert综合征主要诊断标准，资料不完整，不确切。

1.5 统计学方法 采用SPSS 19.0软件进行数据统计分析。计数资料以例数(%)表示，组间比较采用χ2检验，P<0.05表示差异具有统计学差异。

2 结果

2.1 受试者Gilbert综合征易感基因位点突变情况 259例受试者均检测出UGT1A1基因外显子突变。见表2。

表2 受试者UGT1A1基因外显子突变情况 [例数(%)]

2.2 受试者Gilbert综合征易感基因位点突变在性别上的分布情况 见表3。

表3 受试者UGT1A1基因位点突变在性别上的分布 [例数(%)]

3 讨论

Gilbert综合征于1901年由法国医师Gilbert首先报道，多发生于青春期前后或成年期，男性多见，多有家族史，为常染色体显性遗传病。尿苷二磷酸葡萄糖苷酸基转移酶同工酶(UGT1A1)基因多态性是Gilbert综合征的分子遗传学基础。UGT1A1基因突变导致尿苷二磷酸葡萄糖苷酸基转移酶(UGT)蛋白表达水平下降，从而引起血清非结合胆红素水平升高，出现相应临床表现。

本文259例受试者均检测出UGT1A1基因外显子突变，以中青年男性多见，占所有检测者的77.2%，这与文献报道的Gilbert综合征患者男性多于女性的结论一致[3]。无肝脾肿大及明显肝区压痛，除胆红素增高外，其他肝功能无损害。Gilbert综合征以慢性间歇性或波动性轻度黄疸为首发表现和主要表现，全身状况良好，无明显自觉症状，个别患者在黄疸加深时有乏力、纳差、腹部不适的症状，疲劳、紧张、应激、饮酒、感染等常为发生和加重的诱因[5]。

Gilbert综合征临床容易漏诊、误诊，目前诊断方法有肝活检、饥饿试验、利福平试验、鲁米那治疗试验、基因检测。肝穿刺活检，在电镜下出现特征性的改变：肝细胞滑面内质网增生，线粒体数目增多，体积增大，脂褐素颗粒增多，肝细胞绒毛变短；饥饿试验：试验前及禁食48 h后分别作肝功能检查，其原理是人体饥饿条件下血红素分解代谢升高；脂肪分解引起体内游离脂肪酸增加，进而导致胆红素游离并释放进入外周血；饥饿导致肠道蠕动减弱，胆红素肠肝循环增加，饥饿试验判断标准为每日400 Kal饮食条件下，血浆间接胆红素升高大于100%，或者增加25.65 μmol/L为有诊断意义，试验敏感度约80%，特异性极高[6]；利福平试验：先在清晨空腹采血测定血清胆红素，然后口服利福平600 mg，4 h后再测血清胆红素。判定标准：口服利福平后血清间接胆红素水平大于基线值2倍者定为强阳性。鲁米那治疗试验：试验原理是鲁米那可以上调肝脏中葡萄糖醛酸转移酶活性，增强非结合胆红素与葡萄糖醛酸结合，降低血液中非结合胆红素浓度[7]。肝穿刺为有创性操作，饥饿试验试验持续时间较长，利福平试验和鲁米那试验需要服用药物，均不适合健康体检人群的筛查，因此，体检诊断的金标准是检测UGT1A1突变基因。Gilbert综合征以尿苷二磷酸葡萄苷酸基转移酶基因启动子区的基因多态性为遗传学基础[8]，检测UGT1A1基因的异常，主要包括UGT1A1基因启动子TATA盒内的TA重复次数多态性和发生在UGT1A1基因外显子区域的单碱基突变。据报道[9,10]，西方白人Gilbert综合征患者UGT1A1突变主要为UGT1A1*28，亚洲患者为p.Gly71Arg基因突变，高加索人患者主要是A(TA)8TAA型杂合子基因突变。我们的研究发现，大部分患者的突变类型为UGT1A1*28基因突变。

Gilbert综合征黄疸症状通常持续终身，但绝大多数患者无需特殊治疗，提高Gilbert综合征的诊断率可减少不必要的药物治疗，减轻经济和精神上的负担。Gilbert综合征患者应当避免导致黄疸加重的诱因，如感染、劳累、饥饿、饮酒、情绪波动等，并进一步观察随访。