朱晓晨
丙型病毒性肝炎可以通过血液进行传播,且传染性较强,HCV 慢性感染能引发肝脏慢性炎症坏死与纤维化,少部分患者会发生肝硬化以及肝细胞癌(HCC),对患者的身体健康以及生命安全造成了严重影响,随着当下社会逐渐对疾病的认知,丙型病毒性肝炎已经列为严重的社会与公共卫生问题。HCV 1989 年发现,后经过深入研究发现了多种检测方式[1,2]。国内外HCV ELISA 试剂已经逐渐完善并广泛应用于临床诊断,但上述试剂属于检查试剂范畴,当下国内多数选择3 代ELISA 试剂对丙型病毒性肝炎进行诊断,尽管第3 代试剂较之第4 代价格较低,但是可能发生更高的假阳性率以及漏诊情况。本研究选择2 种国产ELISA 试剂对标本检出HCV 阳性样本采用RIBA 检测诊断结果,现报告如下。
1.1材料来源 选取2019 年7 月~2020 年7 月本血站无偿献血者中经过2 种HCV ELISA 检测后至少1 种试剂检测结果为阳性的样本150 份。
1.2方法 选择第3 代(北京万泰生物药业股份有限公司)以及第4 代(珠海丽珠试剂股份有限公司)ELISA 试剂。RIBA 由MP 生物医学公司提供,使用RIBA 对150 份阳性标本进行检测。
2.1HCV ELISA 试剂检测结果分析 150 份标本中,2 种ELISA 试剂检测结果均为阳性的标本125 份,1 种试剂检测结果阳性的标本25 份,其中第3 代ELISA 试剂检测结果阳性150 份,第4 代ELISA 试剂检测结果阳性125 份。125 份2 种ELISA 试剂检测结果均为阳性的样本经过RIBA 验证,确定阳性样本120 份,阳性率为96%;20 份第3 代ELISA 试剂单独检测结果阳性的标本经RIBA 验证,确定阳性1 份,阳性率为5%(1/20);5 份第4 代ELISA 试剂单独检测结果阳性的标本经RIBA 验证,确定阳性2 份,阳性率为40%(2/5)。说明2 种ELISA 试剂对HCV 检测均为阳性的检测准确率较高。
2.2假阳性与真阳性标本的S/CO 值对比 150 份标本经RIBA 验证,假阳性标本25 份,真阳性标本125 份。真阳性标本S/CO 值(>1.0 且≤10.0)高于假阳性标本(>1.0 且≤2.0)。说明对于HCV ELISA 试剂应当确定S/CO 界限值,小于界限值的标本应当选择RIBA验证。
2.3假阳性标本的RIBA 条带分析 影响假阳性结果出现的RIBA 条带中,Core 条带16 条,占比为64%;NS3-1 条带5 条,占比为20%;NS3-2 条带2 条,占比为8%;NS4 条带2 条,占比为8%,无NS5 条带。说明Core 条带使ELISA 试验结果呈现假阳性的几率很高,NS5 条带不会影响ELISA 试验结果。
HCV 的传播途径为血液传播,并且感染性较强,所以,需要关注的是如何快速准确的诊断,其对于患者的治疗意义较大[3,4]。关于引发肝损害的机制,当下认定与激活病毒特异性细胞毒性T 细胞有关,也有可能是通过非特异性炎性反应细胞产出细胞因子,尤其是γ 干扰素所导致。丙型肝炎主要的传播途径为血液和血制品,导致慢性肝炎或者病情发展为肝硬化以及肝癌,所以,有必要建立一种对HCV 具有高灵敏度、高特异性以及高稳定性的检测措施,对丙型肝炎感染的早期诊断以及治疗意义重大[5]。随着医学研究的不断深入,医疗技术也随之更新,检测方式呈现多元化[6]。在临床应用中,会发生不同试剂对同一项目的检查此类情况,但是,其检测功能和效果并不稳定,所以进行对比测试的同时,需要明确和结果是否一致[7]。在常规结果对比当中,需要采取确认与验证实验,还需要对精密度情况进行判定。血液作为珍惜资源,抗-HCV阳性是成品作废的主要因素,根据相关要求,献血者的血液检测需要高灵敏度,以此来保证血液的安全性,同时还要有低假阳性率,降低血液浪费量[8,9]。ELISA 是检测抗-HCV 的主要方法,其优势在于高灵敏度、强特异性以及高自动化程度,并且检测成本较低[10,11]。但是其缺陷在于可能发生假阳性结果,主要原因为标本溶血、细菌感染、长期保存等。在本研究中,在使用第3、4 代ELISA 试剂中,任何一种试剂结果呈现阳性血液都无法利用于临床,使得血液报废,同时献血者也会被列入黑名单中,无法进行献血,此类方式尽管可以保证血液安全,同时有浪费资源的缺陷。根据相关研究表明,相对于第3 代试剂,第4 代抗-HCV ELISA试剂的优点在于有足够高的灵敏度,能确保血液安全性,同时出现的假阳性更少,能有效提升检出率,也减少了血液浪费,降低献血者的流失[12,13]。
综上所述,HCV ELISA 检测试剂均存在一定假阳性,尤其是S/CO 值较低的,或者2 种试剂中有1 种试剂呈现阴性结果,需要考虑是否为HCV 假阳性,同时针对于RIBA 条带分析发现,Core 条带会使得ELISA结果呈现假阳性,为减少不确定结果,是否将带条带Core 报告作为阴性,还需要深入研究。