精油和有机酸复合微囊缓释制剂对河田鸡免疫功能及抗氧化能力的影响

黄其春，郑新添，林秀娇

（1.龙岩学院生命科学学院，福建省家畜传染病防治与生物技术重点实验室，福建龙岩 364012；2.动物源性人兽共患病防控福建省高校工程研究中心，福建龙岩 364012）

我国促生长类药物饲料添加剂（中药类除外）已于2020 年开始全面退出。精油和有机酸具有提高生产性能、增强机体免疫力和抗氧化能力、改善肠道健康等功效，以及无污染、无残留、无耐药性等特点，其作为绿色饲料添加剂在动物生产中得以广泛应用[1-2]。研究表明，精油和有机酸可以发挥协同作用，在动物饲粮中复合添加精油和有机酸具有较好的应用效果[3-5]。但精油易挥发损失且具刺激性，难以控制其在动物肠道中缓慢释放[1]；有机酸反应时间慢，未受保护的有机酸难以到达肠道后段有效发挥作用[2]。这些问题导致精油和有机酸无法发挥更好的功效。采用微胶囊技术对精油和有机酸进行包被，可以克服未包被精油和有机酸的缺陷，不仅可改善饲料适口性，还能使精油和有机酸在肠道中缓慢释放出来，从而在整个胃肠道中发挥作用[6-8]。目前，精油和有机酸复合微囊缓释制剂（Microencapsulated Blend of Essential Oils and Organic Acids，MEOA）在猪、罗斯308 肉鸡、黄羽肉公鸡、樱桃谷肉公鸭等畜禽以及水产动物上的应用研究取得了一定效果[9-15]。河田鸡是福建省传统家禽良种，当地政府正致力于把河田鸡的品种优势转变为其产业发展的资源优势和经济优势，带动农民增收致富[16]。有关MEOA 在河田鸡生产中的试验研究尚未见报道。本试验拟研究MEOA 对河田鸡免疫功能及抗氧化能力的影响，以期为MEOA 在家禽生产中的推广应用以及助力河田鸡产业发展提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料 MEOA 由意大利Vetagro 公司生产，购自厦门某生物科技有限公司（产品质量标准编号为济南SJK 120058；生产批号为8904344），其组分含量为1.7%百里香酚、1.0%香兰素、25%柠檬酸、16.7%山梨酸，载体为脂肪（55.6%）。

1.2 试验设计和试验饲粮 选用上杭县润农农业开发有限公司提供的健康1 日龄河田鸡母雏15 340 只，随机分为对照组和试验组，每组7 670 只，分别饲养在2 栋鸡舍。对照组饲喂基础饲粮，试验组在基础饲粮中添加200 mg/kg MEOA。试验期为28 d。基础饲粮为上杭县五丰林下鸡养殖专业合作社常用配方生产的颗粒饲料，其组成及营养成分见表1。

表1 基础饲粮组成及营养成分

1.3 饲养管理 试验鸡采用地面垫料平养，饲养管理按上杭县五丰林下鸡养殖专业合作社常规要求进行，自由采食和饮水。7 日龄采用饮水方式接种新支二联苗，12日龄采用颈部皮下注射方式接种禽流感疫苗，14 日龄采用饮水方式接种法氏囊疫苗，20 日龄分别采用饮水、颈部皮下注射方式接种新城疫Ⅳ系疫苗和新支流疫苗。

1.4 样品采集与指标测定

1.4.1 生长性能 试验开始时记录试验鸡初生重，试验结束时在每组鸡舍中选择10 个均匀分布的不同部位，每个部位随机抽取20 只鸡进行空腹称重，评定试验鸡体重和平均日增重。

1.4.2 免疫器官指数 试验结束时，从每组中选取24 只体重接近平均体重的试验鸡进行屠宰，取胸腺、脾脏和法氏囊，用滤纸吸去血液，剥离脂肪并称重，然后计算各免疫器官指数。

免疫器官指数=（免疫器官重/活体重）×100%

1.4.3 血清生化和免疫指标 试验鸡屠宰前，翅静脉采血5 mL，常规方法制备血清，置于-80℃冻存备用。血清总蛋白、白蛋白、尿酸、免疫球蛋白（IgG、IgM、IgA）含量以及碱性磷酸酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性采用试剂盒（南京建成生物工程研究所）测定，具体操作步骤按试剂盒说明书进行。计算血清球蛋白含量：

球蛋白（g/L）=总蛋白（g/L）-白蛋白（g/L）

1.4.4 血清抗氧化指标 血清总超氧化物歧化酶（T-SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性以及总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）含量采用试剂盒（南京建成生物工程研究所）测定，具体操作步骤按试剂盒说明书进行。

1.5 统计分析 采用Excel 2007 软件进行t检验，以P＜0.05 为显著水平。结果均以平均值±标准差表示。

2 结果

2.1 MEOA 对河田鸡生长性能的影响 由表2 可知，试验组河田鸡末重和平均日增重较对照组分别提高了12.2%和12.0%（P＜0.05）。

表2 MEOA 对河田鸡生长性能的影响（n=10）

2.2 MEOA 对河田鸡免疫器官指数的影响 由表3 可知，与对照组相比，试验组河田鸡脾脏指数提高了20.8%（P＜0.05）。试验组和对照组河田鸡胸腺指数、法氏囊指数差异不显著。

表3 MEOA 对河田鸡免疫器官指数的影响（n=24）

2.3 MEOA 对河田鸡血清生化和免疫指标的影响 由表4 可知，试验组河田鸡血清总蛋白、球蛋白、IgG 含量以及碱性磷酸酶活性高于对照组（P＜0.05），血清尿酸含量低于对照组（P＜0.05）。试验组河田鸡血清白蛋白、IgM、IgA 含量以及谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性与对照组差异不显著。

表4 MEOA 对河田鸡血清生化和免疫指标的影响（n=24）

2.4 MEOA 对河田鸡血清抗氧化能力的影响 由表5 可知，与对照组相比，试验组河田鸡血清T-SOD、GSHPx 和T-AOC活性分别提高了9.9%、8.2% 和55.1%（P＜0.05），血清MDA 含量降低了19.9%（P＜0.05）。试验组和对照组河田鸡血清CAT 活性差异不显著。

表5 MEOA 对河田鸡血清抗氧化能力的影响（n=24）

3 讨 论

由于存在协同作用，精油和有机酸复合使用能够较好地改善动物健康，提高动物生产性能[3-5]。研究表明，饲粮中添加MEOA 能提高罗斯308 肉鸡和黄羽肉公鸡的日增重，改善其生长性能[11-13]。张杏莉[12]综合考虑生长性能等指标，建议MEOA 在黄羽肉公鸡饲粮中的适宜添加量为200 mg/kg。本试验所用MEOA 与张杏莉[12]研究所用MEOA 为同一产品，添加200 mg/kg MEOA 也提高了河田鸡日增重。除体重和日增重外，本试验还发现试验组和对照组河田鸡的成活率（96.9% vs 97.0%）相近，但试验组河田鸡采食量（13.3 g vs 12.7 g）、耗料增重比（1.58 vs 1.69）和欧洲效益指数（58.3 vs 48.6）好于对照组。其原因主要是微胶囊包被使精油和有机酸具有较好的稳定性，能在动物肠道中缓慢释放出来，增强精油和有机酸的作用效果，从而更好地促进动物生长[6-8]。除育雏阶段外，河田鸡的养殖主要以林下放养为主。本试验研究结合当地河田鸡养殖实际情况，针对河田鸡的育雏阶段，把试验期定为28 d，采用地面垫料平养方式进行育雏，育雏结束后就把河田鸡转移到林下放养。今后有待于深入研究MEOA 对林下放养阶段河田鸡的影响。

胸腺、脾脏和法氏囊是禽类的主要免疫器官，它们参与机体的细胞免疫和体液免疫。这些免疫器官的发育、成熟与否以及结构变化直接决定禽类免疫力的高低，其脏器指数可以在一定程度上反映雏鸡免疫功能的强弱[17]。本试验也发现，饲粮中添加MEOA 可提高河田鸡的脾脏指数，表明MEOA 可以促进雏鸡免疫器官的发育，增加机体的免疫功能。

血清生化和免疫指标可以反映机体营养代谢状态、健康状况以及组织器官功能的变化，在一定程度上可以间接反映动物的生长性能[18]。血清总蛋白、白蛋白含量升高反映机体对蛋白质的消化吸收与利用能力增加，而血清球蛋白、免疫球蛋白含量升高则可体现机体免疫力提高、抗病力增强。尿酸是家禽蛋白质代谢的终产物，血清中尿酸含量降低说明氮在家禽体内的沉积增加，饲粮中蛋白质消化利用率提高。碱性磷酸酶是消化代谢的关键酶，提高血清中碱性磷酸酶的活性有助于提高动物日增重。张杏莉[12]报道，MEOA 可提高黄羽肉公鸡血清总蛋白含量，降低其血清尿酸含量。张谋炎[14]研究发现，MEOA 可提高樱桃谷肉公鸭血清总蛋白含量和碱性磷酸酶活性。本试验结果表明，与对照组相比，试验组河田鸡血清总蛋白、球蛋白、IgG 含量以及碱性磷酸酶活性显著提高，而血清尿酸含量则显著降低，说明MEOA 能提高机体对蛋白质的利用率，促进蛋白质在河田鸡体内沉积，并提高机体的免疫力，从而促进河田鸡生长。这与本试验研究发现MEOA 可以提高河田鸡日增重的结果一致。

机体的抗氧化能力与机体健康密切相关[19]，其抗氧化能力越强，机体就越健康。SOD、CAT、GSH-Px等是机体酶促抗氧化系统，其活性升高反映机体清除自由基能力增强。T-AOC 是衡量机体抗氧化能力的一个综合指标，其数值越大说明机体的抗氧化能力越强。MDA是自由基引发的脂质过氧化终产物，其含量降低可以间接反映机体发生脂质过氧化程度较小。刘新泽等[20]研究表明，饲粮中添加0.1%（缓释甲酸+精油）复合酸化剂可以提高AA 肉仔鸡血清T-AOC，降低血清MDA 含量。本试验发现，饲粮中添加MEOA 可显著提高河田鸡血清T-SOD、GSH-Px 活性和T-AOC，显著降低血清MDA 含量，表明MEOA 能够提高河田鸡血清抗氧化能力，降低脂质过氧化作用对机体的损伤，但其作用机理有待深入研究。

4 结 论

本研究结果表明，饲粮中添加200 mg/kg MEOA可改善河田鸡免疫功能，增强抗氧化能力，进而提高生产性能。