血清前列腺特异抗原、糖类抗原153、神经元特异性烯醇化酶在乳腺癌中的表达及其与新生血管和预后的相关性

於潇潇，张玲玲，张小霞，金 慧

（1.南通市肿瘤医院检验科；2.南通市肿瘤医院乳腺科，江苏 南通 226361）

乳腺癌是源于乳腺腺体、血管、淋巴及乳头等乳腺相关的组织病变，该疾病早期症状不明显，导致患者很难及时就医，从而使得治疗效果不理想，甚至导致死亡。目前，对乳腺癌的诊断方法主要是通过影像学检查与肿瘤标志物检查，影像学检查方式简单，但容易造成漏诊，血清肿瘤标志物检测具有简便无创、测定结果定量客观、费用相对低廉等优点，且患者接受高，在临床上应用广泛。糖类抗原153（CA153）是肿瘤细胞产生的特异性糖蛋白抗原，具有抗原性，可以用于早期发现乳腺癌、判断疗效和检测预后[1]。前列腺特异抗原（PSA）是一种具有组织特异性的丝氨酸蛋白酶，包括总前列腺特异性抗原（TPSA）、游离前列腺特异性抗原（FPSA），有研究表明PSA可作为乳腺癌患病风险的评估指标[2]。神经元特异性烯醇化酶（NSE）是神经组织和神经内分泌组织中特有的酸性蛋白酶，参与神经内分泌组织相关的肿瘤的发展[3]。血管内皮生长因子（VEGF）通过诱导血管生成和淋巴管生成来促进乳腺癌的进展。本研究旨在探讨血清PSA、CA153、NSE在乳腺癌中的表达及其与新生血管和预后的相关性，为后期疾病的临床治疗提供参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料回顾性分析南通市肿瘤医院2017年9月至2019年8月收治的176例乳腺癌患者和92例良性乳腺结节患者的临床资料，分别将其作为恶性组与良性组；另回顾性分析同期120例健康体检者的体检资料，将其作为健康组。健康组研究对象年龄31～59岁，平均（46.29±10.79）岁；体质量指数（BMI）20～25 kg/m2，平均（22.09±1.21） kg/m2。良性组患者年龄29～59岁，平均（47.36±10.28）岁；BMI 20～26 kg/m2，平均（22.26±1.27） kg/m2。恶性组患者年龄31～62岁，平均（49.29±11.62）岁；BMI 20～26 kg/m2，平均（21.96±1.19） kg/m2；TNM分期[4]：Ⅰ ～ Ⅱ期84例，Ⅲ期51例，Ⅳ期41例。对比3组研究对象一般资料（年龄、BMI），差异无统计学意义（P＞0.05），组间可比。纳入标准：恶性组患者符合《中国抗癌协会乳腺癌诊治指南与规范（2015版）》[5]中的相关诊断标准；良性组患者符合《乳腺疾病防治指南》[6]中的诊断标准者；良性组与恶性组患者均经影像学检查、病理组织活检等确诊；入院前未接受乳腺癌相关治疗者等。排除标准：妊娠期与哺乳期女性；合并心脑血管疾病；合并全身性重度感染性疾病、其他良恶性肿瘤者；合并血液系统、内分泌系统及自身免疫系统重度病变者等。本研究经院内医学伦理委员会批准。

1.2血清PSA、CA153、NSE水平检测方法采集3组研究对象空腹静脉血5 mL，经3 000 r/min转速离心10 min后取血清，利用全自动化学发光免疫分析仪（Roche Diagnostics GmbH，型号：cobas 6000 e 601）检测血清TPSA、FPSA、CA153及NSE水平。各指标参考值：TPSA（0～0.36 ng/mL），FPSA（0～0.02 ng/mL），CA153（0～25 U/mL），NSE（0～17.0 ng/mL），高于参考值上限为阳性[7-8]。

1.3免疫组织化学染色采用免疫组织化学染色检测恶性组和良性组患者病理组织VEGF阳性表达情况。以乳腺癌患者癌组织和乳腺结节患者结节组织作石蜡包埋标本。将标本制成3～4 μm厚的切片，经脱蜡、水化、煮沸、修复后，利用抗VEGF单克隆抗体进行SP染色，DAB显色，最后进行复染，出现在细胞膜和细胞质内的棕黄色颗粒为阳性表达标准。根据阳性细胞百分比计分，无阳性细胞为0分；阳性细胞占比≤ 10%为1分；10%＜阳性细胞占比≤ 50%为2分；50%＜阳性细胞占比≤ 75%为3分；阳性细胞占比＞75%为4分；根据着色强度由浅到深分别记为0、1、2、3分。将上述2项评分相乘，最终得分0～2分为（-），3～5分为（+），6～9分为（++），10～12分为（+++），≤ 2分为阴性，＞2分为阳性[9]。

1.4随访通过电话和门诊对恶性组和良性组患者定期进行为期2年的随访，计算1、2年生存率。

1.5观察指标①比较3组研究对象血清PSA、CA153、NSE水平。②比较恶性组与良性组患者血清VEGF表达水平。③比较恶性组与良性组患者生存情况。④分析血清PSA、CA153、NSE表达水平与VEGF表达情况、生存率的相关性。

1.6统计学方法使用SPSS 20.0统计学软件分析数据，使用S-W法检验计量资料数据是否服从正态分布，对于符合正态分布的计量资料以(±s)表示，多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用SNK-q检验；计数资料以[ 例(%)]表示，采用χ2检验；应用K-M法绘制患者随访2年内的生存曲线，并采用log-rank检验进行比较；采用Pearson相关系数法分析血清PSA、CA153、NSE表达水平与VEGF表达情况、生存率的相关性。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组研究对象血清PSA、CA153、NSE水平比较与健康组比，良性组和恶性组患者血清TPSA、FPSA、CA153及NSE水平均升高，且恶性组高于良性组，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表1。

表1 3组研究对象血清PSA、CA153、NSE水平比较( ±s)

表1 3组研究对象血清PSA、CA153、NSE水平比较( ±s)

注：与健康组比，*P＜0.05；与良性组比，#P＜0.05。TPSA：总前列腺特异性抗原；FPSA：游离前列腺特异性抗原；CA153：糖类抗原153；NSE：神经元特异性烯醇化酶。

组别 例数TPSA(ng/mL)FPSA(ng/mL)CA153(U/mL)NSE(ng/mL)健康组120 0.26±0.10 0.02±0.01 18.65±4.43 7.04±2.12良性组 92 0.52±0.18* 0.04±0.01* 32.26±9.57*18.56±4.61*恶性组176 0.84±0.21*# 0.09±0.02*# 45.59±12.95*# 25.32±6.65*#F值 397.929 808.993 251.061 450.192 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2恶性组与良性组患者VEGF水平比较恶性组患者VEGF阳性表达率高于良性组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 恶性组与良性组患者VEGF水平比较[ 例(%)]

2.3恶性组与良性组患者生存曲线比较随访第1年内，恶性组患者出现21例死亡病例（11.93%），良性组患者出现2例死亡病例（2.17%）；随访第2年内，恶性组患者出现13例死亡病例（7.39%），良性组未出现死亡病例；随访2年内恶性组患者总生存率80.68%（142/176）低于良性组97.83%（90/92），差异有统计学意义（χ2=15.272，P＜0.05），见图1。

图1 恶性组与良性组患者生存曲线

2.4血清PSA、CA153、NSE表达水平与VEGF阳性表达水平、生存率的相关性Pearson相关系数法分析结果显示，血清TPSA、FPSA、CA153、NSE表达水平与VEGF均呈正相关（r= 0.663、0.617、0.652、0.587），与生存率呈负相关（r= -0.514、-0.493、-0.501、-0.472），差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表3。

表3 血清PSA、CA153、NSE水平与VEGF、生存率的相关性

3 讨论

乳腺癌是临床上常见的恶性肿瘤，该疾病的致病因素多而杂，包括内分泌激素的分泌水平、生活方式、遗传因素以及基因突变等，早期乳腺癌可以在乳腺上摸到肿块，大多不伴有疼痛，有些患者同时伴有乳腺胀痛，甚至双侧乳腺胀痛，部分乳腺癌病灶可远端转移至肺、肝、脑等位置，造成治疗难度进一步增大[10]。因此，要提高乳腺癌治愈率，恢复患者健康，需要尽早对疾病进行确诊。目前，肿瘤标志物诊断乳腺癌相对便捷，在临床上应用较为广泛。

PSA为激肽释放酶（KLK）基因家族中KLK3的一种表达物，能够对细胞生长进行有效的刺激，促进血管形成，对细胞基层进行降解，在恶性肿瘤特别是前列腺癌、卵巢癌、乳腺癌等性激素相关肿瘤的发生、发展中均会产生显著作用[11]；PSA具有两种分子形式，分别为TPSA和FPSA，有研究表明，在乳腺恶性肿瘤切除术后，FPSA表达水平低，提示了游离状态的PSA的产生与肿瘤密切相关[12]。CA153是黏蛋白1（MUC-1）分泌到血液中一种可溶性片段，在细胞癌变后，细胞膜表面的唾液酸酶和蛋白酶活性会增强，从而破坏细胞骨架，导致CA153从细胞脱落进入血清中；相关研究显示，CA153对于早期乳腺癌的诊断虽特异性高但灵敏度较低，临床常用于浸润性和转移性乳腺癌的监测[13]；NSE主要特异性地存在于神经内分泌细胞的胞质中，其在起源于神经内分泌细胞的恶性肿瘤中也有异常表达信号[14]。VEGF是一种对血管生长有促进作用的细胞因子，其在癌细胞中能够通过促进内皮细胞增殖和构建血管来推动肿瘤发展；同时还能增加微血管的渗透性，加速细胞进出血管，从而促进癌细胞的侵袭和转移[15]。本研究中，与健康组比，良性组和恶性组患者血清中TPSA、FPSA、CA153及NSE表达水平均升高，且恶性组高于良性组；恶性组患者VEGF阳性表达率高于良性组，提示TPSA、FPSA、CA153、NSE及VEGF在乳腺癌病情诊断中有十分重要的意义，且VEGF在乳腺癌患者体内的高表达，反映了乳腺癌患者体内血管生长速度较良性乳腺结节患者快，且微血管密度更高。

雷巧等[16]研究中对100例乳腺癌患者进行了7～24个月的术后随访，结果发现，发生术后转移的乳腺癌患者血清F-PSA、TPSA及CA153水平均显著高于未转移组，提示血清FPSA、PSA及CA153均可作为预测乳腺癌预后的重要标志物。裴生新等[17]研究中，将86例乳腺癌患者分为良性组与恶性组，并对比分析了两组患者的PSA、CA153等指标的表达情况，结果发现，PSA、CA153在恶性组患者体内显著高于良性组，说明PSA、CA153的升高能够提示乳腺癌的疾病进展和预后情况。本研究结果显示，随访2年内恶性组患者总生存率80.68%低于良性组97.83%，提示乳腺癌患者预后质量明显低于良性乳腺结节患者。通过相关性分析得出，血清TPSA、FPSA、CA153、NSE表达水平与VEGF呈正相关，与生存率呈负相关，提示血清TPSA、FPSA、CA153、NSE水平越高，VEGF水平也越高，进而促进肿瘤血管的生长，导致预后质量下降。

综上，肿瘤标志物血清TPSA、FPSA、CA153、NSE与VEGF均呈正相关，与生存率呈负相关，表明可通过检测PSA、CA153、NSE表达水平来反映血管新生速度，对乳腺癌的发展与预后具有重要意义，值得临床推广应用。