河南产南鹤虱挥发油的GC-MS分析

蒋文琪 王雅琴 陈山珊 曾境昱 赖晨楠 欧阳明 张伟云*

1.厦门医学院药学系/厦门市中药生物工程重点实验室，福建 厦门 361023；2.福建中医药大学，福建 福州 350122；3.青蛙王子(福建)婴童护理用品有限公司，福建 漳州 363005

南鹤虱为伞形科植物野胡萝卜(DaucuscarotaL.)的干燥成熟果实，具有杀虫消积功效，医者常常将其用于去除体内虫积等[1]。《新修本草》中将本品单独作散剂服用，用以驱蛔虫、杀蛲虫；《小儿药证直诀》收载了安虫散，将南鹤虱与金玲子、大腹子、白矾等同用，可较好地缓解人体内的虫痛发作。

南鹤虱中的化学成分类型主要包括挥发油、萜类、黄酮类、香豆素类、甾体类、脂肪酸类等[2-5]，学者对挥发油的研究兴趣较为浓厚。从南鹤虱中提取的挥发油也称为鹤虱油，其质地较为粘稠，颜色为暗棕红色，久闻令人心情愉悦，具有香甜、辛辣、刺激的气味。南鹤虱挥发油常被添加至香囊、香油、肥料等产品中。例如，上海制皂厂在香皂生产过程中添加南鹤虱精油，以增加所制香皂香味[6]。

南鹤虱主要产于江苏、湖北、陕西、河南等省[7]，湖北[8- 9]、陕西[10]等产地的南鹤虱挥发油化学成分已被研究和报导，而河南产南鹤虱挥发油中主要化学成分未见有学者研究报道，本研究利用水蒸气蒸馏法从河南产南鹤虱中提取挥发油，并利用GC-MS初步分析其化学成分和相对含量，以期为后续研究其生物活性并确定构效关系奠定基础，为南鹤虱的药用、综合利用等提供参考。

1 仪器与试药

1.1 仪器 筛网(10目)、电子天平、电热套、2000 mL圆底烧瓶、0.45 μm微孔滤膜、气质联用仪(Agilent 7890B/7000)。

1.2 试药 实验所用河南产南鹤虱(使用前过10目筛)购自漳州集发医药有限公司，经厦门医学院药学系向云亚老师鉴定为伞形科植物野胡萝卜(DaucuscarotaL.)的干燥成熟果实。甲醇、正己烷均为色谱级。

2 方法

2.1 水蒸气蒸馏法提取南鹤虱 称取100 g河南产南鹤虱，与1000 mL的蒸馏水共同加入2000 mL圆底烧瓶中，浸泡1 h，电热套设定温度为150 ℃，将药材缓缓加热至微沸，沸腾后，维持该状态，持续加热蒸馏2 h，停止加热。重复上述实验操作3次，收集蒸馏液，取上层淡黄色油状液体层，加入无水硫酸钠干燥，备用。

2.2 GC-MS条件与测定 移取上述提取物，用一定比例甲醇和正己烷溶解稀释后，用0.45 μm微孔滤膜将样品过滤保存至2 mL样品瓶中，待测。

用Agilent Mass Hunter Qualitative Analysis B.06.00分析软件在NIST MS谱库中分析。部分分析条件参考文献[10]，升温程序为柱温从 40 ℃ 保持1 min，以20 ℃·min- 1的速度升温至 100 ℃，保持2 min；再以5 ℃·min-1升温至220 ℃保持2 min，最后以60 ℃·min-1升至280 ℃，保持5 min。柱子参数：载气为高纯氦，总流速 40 mL·min-1，柱内流速1.1 mL·min-1，进样口温度250 ℃，进样量1 μL。GC和MS接口温度270 ℃。质谱条件：电子轰击能量70 eV，离子源温度230 ℃，扫描质量范围(m/z) 15～500 amu。

3 结果

3.1 水蒸气蒸馏法提取河南产南鹤虱所得GC-MS图谱 根据实验方法中的条件及参数提取河南产南鹤虱中的挥发油，并采取GC-MS解析其中化学成分，图1为实验所获得的色谱图。观察色谱图可以发现，提取所得大部分化学成分的保留时间处于18～26 min。

3.2 水蒸气蒸馏法提取河南产南鹤虱主要化学成分鉴定 通过采用GC-MS分析，在NIST MS谱库中搜索主要化合物的种类，并对主要化合物应用峰面积归一化法计算各成分相对含量，综合各项分析鉴定，所得河南产南鹤虱主要化学成分见表1。其中，共发现67个色谱峰，鉴定得出42种主要化合物。在已鉴定的42个化合物中，单萜及倍半萜类化合物占60.73%，单萜及倍半萜含氧衍生物占23.32%。在单萜及倍半萜化合物中烯类化合物主要包括β-榄香烯(相对含量为0.27%)，1-石竹烯 (相对含量为0.41%)，β-芹子烯 (相对含量为24.87%)，α-芹子烯 (相对含量为14.58)，β-荜澄茄烯 (相对含量为1.67%)，氧化石竹烯 (相对含量为0.35%)，β-芹子烯相对含量最高。

表1 水蒸气蒸馏法提取河南产南鹤虱所得主要化学成分

4 讨论

本研究利用GC-MS分析河南产南鹤虱挥发油，在42个化合物中包含文献报导过的烯类化合物，例如β-芹子烯[4]、β-榄香烯[11]、1-石竹烯[7]、α-芹子烯[12]、β-荜澄茄烯[12]、氧化石竹烯[12]。其中，本研究中所得相对含量最高的化合物为β-芹子烯(24.87%)，而文献报导同样利用水蒸气蒸馏法提取的陕西省南鹤虱挥发油中共含有34种化合物，β-芹子烯相对含量仅有0.52%[10]。由此可见，不同产地南鹤虱挥发油中的化学成分所对应的相对百分含量差距较大。另外，文献[11]报导相对含量较高的化合物，如U-红没药烯、氧化异佛尔酮,Furan, 2, 2- methylenebis等化合物在本研究中未检出或相对含量极低。有学者从南鹤虱挥发油中共鉴定出16种化合物，包括了氧化异佛尔酮 (34.67%)、Furan, 2, 2-methylenebis (15.28%)等，但不包含U-红没药烯[8]，说明不同产地南鹤虱挥发油中化学成分种类也有不同，这可能与地域对应的气候、土壤等条件对相关物质积累有影响，另外，也可能与不同提取方法、相同提取方法但具体实验条件不同等因素都有关系，尚需对应实验验证和深入研究。

续表1 表1 水蒸气蒸馏法提取河南产南鹤虱所得主要化学成分

在河南产南鹤虱的主要化学成分中，发现其中相对含量最大的化学成分为β-芹子烯，占24.87%，目前关于β-芹子烯的药理活性及用途报导较少，因此可对其进一步研究，为河南产南鹤虱的药理活性及应用提供思路。

5 结论

采用水蒸气蒸馏法及气相色谱-质谱联用技术分析河南产南鹤虱中化学成分，共鉴定得到42种主要化合物，对所得化合物进一步分类，其中烯烃类成分占比最高，含量较大的化学成分如β-芹子烯、α-芹子烯、正十四烷等。本研究结果可为河南产南鹤虱今后的研发奠定基础。