潘凌峰 王 楹 伍小松* 蒋小丰 印遇龙
(1.湖南农业大学动物科学技术学院,湖南省畜禽安全生产协同创新中心,长沙 410128;2.湖南普菲克生物科技有限公司,长沙 410011)
随着生活水平的不断提高,人们对肉、蛋和奶的品质需求也越来越高。而在畜禽养殖端,高密度规模化养殖带来了可观的经济收益,但也使得动物在饲养过程中更容易遭受各种应激,造成动物免疫力降低,生长性能下降。在饲粮中添加一定剂量的抗生素是传统饲养模式中常见的做法,但这严重危害肉品质及畜产品安全。我国自2020年7月开始禁止促生长抗生素在畜禽饲料中添加使用,因此,开发绿色安全、高效的新型饲料添加剂产品成为目前畜禽养殖业亟待解决的问题之一。
植物提取物具有多种生物活性功能,近年来越来越多的研究表明植物提取物可作为一种饲料添加剂合理应用于畜禽饲料中[1]。我国松科植物资源丰富,有30多种松树,分布在云南、四川和湖南等地,全国针叶林面积约0.7亿hm2,年产松针、树皮和嫩枝约3亿t,而这些资源大部分被遗弃或作薪柴使用[2]。松树皮中含有丰富的多酚、多糖等活性功能成分。早在20世纪60年代,法国科学家从法国海洋松的松树皮中提取出富含黄酮类化合物的天然活性物质——碧萝芷[3],其具有很强的抗氧化能力,现在已经作为多种疾病的治疗药物[4]。另外,多酚类物质对致病微生物也有控制和影响作用[5],多糖还具有改善免疫力的作用。与中草药相比,松树皮来源广、价格低、易规模化生产,在畜禽养殖生产中具有广阔的应用前景。因此,本研究旨在通过在肉鸡无抗饲粮中添加不同剂量的松树皮提取物,探讨其对肉鸡的生长性能、屠宰性能、肉品质和抗氧化能力等的影响,以期为其在肉鸡生产中的应用提供参考。
云南松树皮在65 ℃下烘干,粉碎,采用70%乙醇浸提,过滤,70 ℃干燥,得到松树皮提取物,其中多酚含量24.2%、多糖含量3.5%。
试验选用252羽1日龄、健康状态良好的温氏天露黑五肉鸡,采用单因素试验设计,将试验鸡随机分成3个组,每组6个重复,每个重复14羽(公母各占1/2)。对照组饲喂基础饲粮,低剂量松树皮提取物组和高剂量松树皮提取物组分别在基础饲粮中添加250和1 000 mg/kg松树皮提取物。试验期51 d。
试验所用基础饲粮由湖南粒丰生物科技有限公司提供,基础饲粮分2个阶段:生长前期为1~21日龄,生长后期为22~51日龄。基础饲粮组成及营养水平见表1。
表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)
续表1项目Items含量 Content1~21日龄 1 to 21 days of age22~51日龄 22 to 51 days of age预混料 Premix1)0.500.50合计 Total100.00100.00营养水平 Nutrient levels2)代谢能 ME/(MJ/kg)12.5412.97粗蛋白质 CP19.7719.58钙 Ca1.000.92总磷 TP0.660.65赖氨酸 Lys1.161.10蛋氨酸 Met0.590.57色氨酸 Trp0.190.18苏氨酸 Thr0.800.77
试验于湖南汨罗市某鸡场进行,试验鸡采用地面平养。试验开始前,对鸡舍地面、饮水器和食槽等进行充分清洗消毒。试验第1周鸡舍光照时间23 h,而后逐渐过渡到试验第4周为每天18 h光照,直到试验结束。试验开始鸡舍温度为37 ℃,以后每天降0.4 ℃,降至25 ℃稳定至试验结束。试验期间肉鸡自由饮水采食,并按常规程序进行免疫。
1.5.1 生长性能
试验期间分别于试验第22和52天早上空腹称取每个重复的试验鸡体重,计算平均日增重(ADG);以重复为单位记录投料量和剩余料量,计算平均日采食量(ADFI)和各阶段料重比(F/G)。
1.5.2 屠宰性能及器官指数
试验结束时,每个重复选取2羽健康、活体重接近重复平均体重的肉鸡屠宰。根据《家禽生产性能名词术语和度量统计方法》(NY/T 823—2004)测定屠宰率、全净膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率。鸡放血处死后,脱毛,去脚角质层、脚趾壳和喙壳后的重量为屠体重;在此基础上去除气管、食道、嗉囊、肠道、脾脏、胰脏、胆囊、心脏、肝脏、腺胃、肌胃、肺脏、腹脂、头脚和生殖器官的重量为全净膛重。将肝脏、脾脏、胸腺、法氏囊和腹脂分别分离出来并称重,计算器官指数。其指标计算按如下公式:
屠宰率(%)=100×(屠体重/宰前体重);
全净膛率(%)=100×(全净膛重/宰前体重);
胸肌率(%)=100×(胸肌重/全净膛重);
腿肌率(%)=100×(腿肌重/全净膛重);
腹脂率(%)=100×(腹脂重/全净膛重);
器官指数(%)=100×(器官重/宰前体重)。
1.5.3 肉品质和抗氧化能力
屠宰性能测定时,分别在屠宰后45 min和24 h时,使用便捷式pH计(205,Testo,德国)于胸肌和腿肌分别检测3个点pH,取平均值得到不同时间胸肌、腿肌pH。屠宰后在胸肌、腿肌上分别取一块体积、形状相近的肉样5 g,称重后置于滴水损失测定管中,于4 ℃冰箱内垂直放置24 h后取出再次称重。滴水损失计算公式为:
滴水损失(%)=100×[(样本初重-
样本24 h后重量)/样本初重]。
另取一块体积、形状相近的胸肌、腿肌样品,重量约20 g,称重后用蒸煮袋真空密封,而后于水浴锅内加热至中心温度70 ℃,取出后吸干表面水分再次称重,根据如下公式计算蒸煮损失:
蒸煮损失(%)=100×[(蒸煮前重量-
蒸煮后重量)/蒸煮前重量]。
屠宰后胸肌、腿肌的亮度(L*)、红度(a*)和黄度(b*)值使用便捷式色差仪检测(NR20XE,3nh),分别选取3个部位检测取平均值。
肌肉中丙二醛(MDA)含量采用南京建成生物工程研究所试剂盒于多孔化学发光仪(Varioskan flash,ThermoFisher Scientific,美国)上检测,操作方法严格参照试剂盒说明书进行。
1.5.4 血清和肝脏生化指标
屠宰性能测定时,肉鸡称活体重后颈静脉处死,使用无抗凝剂采血管收集血液,静止30 min,而后在1 500×g下离心10 min,收集血清待测。肉鸡采血处死后,解剖取肝脏组织样,待测。血清和肝脏中高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)、白蛋白(ALB)、葡萄糖(GLU)和总蛋白(TP)含量严格按照南京建成生物工程研究所试剂盒说明书进行检测。
采用Excel 2010对试验数据进行初步整理后,利用SPSS 25.0软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA),并用Duncan氏法进行多重比较,结果数据以“平均值±标准差”表示,P<0.05表示差异显著。
由表2可知,在肉鸡生长前期(1~21日龄),与对照组相比,饲粮添加不同剂量的松树皮提取物对肉鸡ADFI无显著影响(P>0.05),但饲粮添加250 mg/kg松树皮提取物(低剂量松树皮提取物组)使肉鸡ADG提高了14.39%(P<0.05),而饲粮添加1 000 mg/kg松树皮提取物(高剂量松树皮提取物组)却显著降低了肉鸡ADG(P<0.05)。此外,与对照组相比,饲粮添加250 mg/kg松树皮提取物使1~21日龄F/G降低了16.97%(P>0.05)。21日龄肉鸡体重以低剂量松树皮提取物组最高,为326.57 g,显著高于对照组(P<0.05);而以高剂量松树皮提取物组最低,为215.83 g,显著低于对照组(P<0.05)。
在肉鸡生长后期(22~51日龄),与对照组相比,饲粮添加不同剂量的松树皮提取物对肉鸡ADFI无显著影响(P>0.05);饲粮添加250 mg/kg松树皮提取物对肉鸡ADG和F/G无显著影响(P>0.05),但饲粮添加1 000 mg/kg松树皮提取物显著降低了肉鸡ADG和F/G(P<0.05)。51日龄肉鸡体重以低剂量松树皮提取物组最高,为1 135.73 g,显著高于对照组(P<0.05);而以高剂量松树皮提取物组最低,为907.71 g,显著低于对照组(P<0.05)。
在肉鸡生长全期(1~51日龄),与对照组相比,饲粮添加250 mg/kg松树皮提取物使肉鸡ADG提高了7.85%(P<0.05),而饲粮添加1 000 mg/kg松树皮提取物则显著降低了肉鸡ADFI和ADG(P<0.05)。3组肉鸡F/G之间无显著差异(P>0.05),但以低剂量松树皮提取物组最低,为3.51,较对照组降低了9.30%。
表2 松树皮提取物对肉鸡生长性能的影响
由表3可知,与对照组相比,饲粮添加不同剂量的松树皮提取物对肉鸡屠宰率无显著影响(P>0.05),但饲粮添加250和1 000 mg/kg松树皮提取物均能显著降低肉鸡的腹脂率(P<0.05);饲粮添加不同剂量的松树皮提取物对肉鸡全净膛率、胸肌率和腿肌率等屠宰性能指标均无显著影响(P>0.05)。此外,与对照组相比,饲粮添加松树皮提取物对肉鸡肝脏指数和脾脏指数均无显著影响(P>0.05),但饲粮添加1 000 mg/kg松树皮提取物显著提高了肉鸡胸腺指数(P<0.05);饲粮添加1 000 mg/kg松树皮提取物有提高肉鸡法氏囊指数的趋势,但差异不显著(P>0.05)。
表3 松树皮提取物对肉鸡屠宰性能及器官指数的影响
由表4可知,与对照组相比,饲粮添加250和1 000 mg/kg松树皮提取物均可显著降低肉鸡胸肌滴水损失(P<0.05),但对胸肌其他指标无显著影响(P>0.05)。从腿肌肌肉品质来看,与对照组相比,饲粮添加不同剂量的松树皮提取物均可显著提高45 min时的pH和肉色L*值(P<0.05),饲粮添加1 000 mg/kg松树皮提取物可显著提高肉色b*值(P<0.05),同时饲粮添加250 mg/kg松树皮提取物能显著降低腿肌失水率(P<0.05);饲粮添加松树皮提取物对腿肌其他指标无显著影响(P>0.05)。
表4 松树皮提取物对肉鸡肉品质的影响
松树皮提取物对肉鸡肌肉抗氧化能力的影响如图1所示,与对照组相比,饲粮添加250和1 000 mg/kg松树皮提取物均能显著降低肉鸡腿肌中MDA含量(P<0.05),且低剂量松树皮提取物组腿肌中MDA含量显著低于高剂量松树皮提取物组(P<0.05);饲粮添加松树皮提取物对肉鸡胸肌中MDA含量无显著影响(P>0.05)。
由表5可知,与对照组相比,饲粮添加250 mg/kg松树皮提取物能显著提高肉鸡血清中HDL-C和ALB含量(P<0.05),并且显著降低肝脏中LDL-C含量(P<0.05);饲粮添加1 000 mg/kg松树皮提取物可显著降低血清中TG含量(P<0.05),显著提高血清中FFA、HDL-C和ALB含量(P<0.05),显著降低肝脏中LDL-C含量(P<0.05)。
松树皮中含有多酚等生物活性物质,前人已有研究表明,松树皮提取物具有改善动物健康和生长性能的作用。崔莲花等[6]在育肥猪饲粮中分别添加1 000、2 000和4 000 g/t的松树皮提取物,结果发现3个试验组ADG和F/G均有改善的趋势。本试验中,与对照组相比,在无抗饲粮中添加250 mg/kg松树皮提取物显著提高了肉鸡生长前期和全期ADG,生长全期F/G也以250 mg/kg松树皮提取物添加组最优,但饲粮添加1 000 mg/kg松树皮提取物则显著降低了生长各阶段ADG,这可能与高剂量松树皮提取物影响了肉鸡采食量有关。王占彬等[7]在艾维因肉鸡饲粮中分别添加200和400 g/t松树皮提取物,探讨其对肉鸡生长性能的影响,结果也发现200 g/t松树皮提取物添加组效果最佳。松树皮提取物中富含多酚,而多酚具有涩味,高剂量添加会影响动物的采食量,进而影响动物的生长性能[8]。刘晓华等[9]研究也表明,饲粮添加1 400 mg/kg茶多酚会显著影响肉鸡生长性能。上述结果在一定程度上可佐证松树皮提取物中多酚影响肉鸡采食量,进而影响生长性能。此外,本试验中,饲粮添加250和1 000 mg/kg的松树皮提取物均显著提高了肉鸡血清中ALB含量,其中250 mg/kg松树皮提取物添加组血清ALB含量最高。ALB主要由肝脏合成,是血液中最主要的蛋白质,其含量反映了动物机体蛋白质的合成代谢状况[10]。周洪松等[11]研究表明,血清中ALB含量与动物生长速度呈正相关,其原因可能是ALB作为组织蛋白的原料,其含量较高能够促进组织蛋白的合成,因此能够促进动物生长,Benlloch等[12]也有类似报道。
数据柱标记不同字母表示差异显著(P<0.05)。
表5 松树皮提取物对肉鸡血清和肝脏生化指标的影响
极高的能量代谢率会导致家禽腹脂率升高,严重影响胴体品质,降低屠宰性能和饲料转化率[13];同时,肉鸡体内腹脂沉积过多还会诱发肉鸡腹水综合征和猝死症等代谢疾病[14],因此,降低腹脂率在家禽生产中具有重要意义。本试验中,与对照组相比,饲粮添加250和1 000 mg/kg松树皮提取物均能够显著降低肉鸡的腹脂率,且呈剂量依赖性。肉鸡腹脂沉积与饲粮能量摄入、饲养周期、肠道菌群及脂肪代谢等都有关联。肉鸡脂质代谢及其调控与哺乳类动物大不相同,肉鸡脂肪细胞内的脂肪生成十分有限,主要来源是肝脏内合成和肠道中消化吸收,其中肝脏是肉鸡脂肪合成的主要场所[15-16],占90%以上。植物多酚具有调控机体脂质代谢的作用,Bajerska等[17]研究发现,多酚可降低大鼠血清TG、低密度脂蛋白以及内脏脂肪含量;Bansode等[18]研究也表明,多酚可显著降低大鼠血清TG含量;Lockyer等[19]研究发现,富含多酚的橄榄叶提取物能够降低动物血清中TC和LDL-C含量;Li等[20]研究表明,茶多酚能够通过调节核转录因子-κB(NF-κB)信号通路降低肉鸡血清中LDL-C和TC含量,改善脂质代谢。本试验分析了肉鸡血清和肝脏中脂质代谢相关指标,结果表明饲粮添加250 mg/kg松树皮提取物能显著提高血清中HDL-C的含量,并且显著降低了肝脏中LDL-C的含量;饲粮添加1 000 mg/kg松树皮提取物可显著降低血清中TG含量,同时显著提高血清中FFA和HDL-C的含量。HDL-C可将血液中多余的TG和TC等转运到肝脏进行分解代谢,因此被誉为血管脂质“清道夫”,侯福银等[21]、Anhê等[22]研究也发现,多酚能够提高血清和肝脏中HDL-C含量,降低LDL-C含量,从而改善脂质代谢。尽管还缺乏分子水平的验证,上述结果在一定程度上可以说明松树皮提取物可促进脂肪酸代谢,减少肝脏脂质合成,从而降低腹脂率。
肉品质通常包括肉色、pH、嫩度、风味和系水力等。其中系水力是指屠宰后肌肉保持水分的能力(一般用滴水损失、失水率等来衡量),系水力高则表明肌肉鲜嫩、多汁,系水力低的肌肉其营养物质容易流失[23]。此外,屠宰后不同时间肌肉pH反映了肌肉中糖原的酵解速率,也是衡量肉品质的重要指标之一。本试验中,饲粮添加250和1 000 mg/kg松树皮提取物均显著降低了肉鸡胸肌滴水损失,且均显著提高了腿肌45 min时的pH和肉色L*值,同时饲粮添加250 mg/kg松树皮提取物还显著降低了腿肌的失水率。进一步研究发现,饲粮添加250和1 000 mg/kg松树皮提取物均显著降低了肉鸡腿肌中MDA含量。有报道指出,植物多酚可提高肌肉中自由基清除能力,保护肌肉细胞膜完整,减少蛋白质损伤等,从而改善肉品质[24],这可能与植物多酚可通过调节丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)通路和其他抗氧化基因表达来提高机体抗氧化能力相关[25]。Zhao等[26]研究表明,饲粮添加主要成分为绿原酸的杜仲提取物能提高热应激下肉鸡胸肌24 h时的pH,降低滴水损失、蒸煮损失和胸肌MDA含量。以上研究结果提示,松树皮提取物发挥调控动物脂质代谢、降低肉鸡腹脂率和腿肌失水率的功效与其中多酚的抗氧化能力相关。
综上所述,在温氏天露黑五肉鸡饲粮中添加250 mg/kg松树皮提取物可提高其生长性能,降低腹脂率,改善脂质代谢和肉品质,增强机体抗氧化能力。