血清25-(OH)D3及AMH与卵巢反应性的相关性及预测冻融胚胎移植术妊娠结局价值

王向宇 胡 滨

1.河南省唐河县妇幼保健院(473400)；2.郑州大学第二附属医院

体外受精-胚胎移植(IVF-ET)为目前临床常用的辅助生殖技术，冻融胚胎移植(FET)是IVF-ET技术的补充并已广泛用于不孕症治疗中。临床证实行FET的患者活产率更高，且引起卵巢过度刺激综合征的概率较低，是一种安全有效的辅助生育措施[1-2]。卵巢反应性是辅助生殖中控制性超促排卵是否顺利的影响因素之一[3-4]。血清25-(OH)D3是血液循环中维生素D(VitD)的活性形式，研究证实VitD可参与卵泡发育、性激素生产及胚胎种植，其与女性卵巢功能及子宫内膜容受性相关，对女性内分泌及生殖过程产生影响[5-6]；抗缪勒管激素(AMH)能够用于评价卵巢储备功能[7]，临床多用于评价控制性超促排卵中卵巢反应性，而关于血清25-(OH)D3水平与卵巢反应性的研究较少，且探究血清25-(OH)D3与AMH对妊娠结局的影响研究很少。本研究对此进行探讨，为临床FET术获得良好妊娠结局提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性收集2020年3月-2021年3月郑州大学第二附属医院收治的首次行FET的不孕患者139例临床资料。纳入标准：①不孕与男方或输卵管异常有关；②首次行FET术；③临床资料完整。排除标准：①合并其他内科疾病、内分泌系统疾病；②合并代谢性疾病；③合并子宫畸形、肿瘤、宫腔病变、宫腔粘连、子宫内膜异位严重；④合并家族病史或血栓性疾病；⑤合并甲状腺、肾上腺功能疾病。卵巢反应性评价标准：获卵数≤5为卵巢低反应，5<获卵数≤15为正常反应，获卵数>15为卵巢高反应。本研究经本院伦理委员会审批，患者均签署知情同意书。

1.2 控制性超促排卵方案与FET术

所有受试者均在上1个月经周期黄体中期皮下注射促性腺激素释放激素激动剂(Fertirelin，北京百奥莱博科技有限公司)1.33mg行垂体降调节；14d后使用卵泡刺激素(普丽康，荷兰N.V.Organon)促排卵，若出现3个卵泡直径达到1.8cm时肌内注射人绒毛膜促性腺激素(上海莼试生物技术有限公司)10000U；36h后于阴道B超指导下行穿刺取卵，将其放置体外培养4h后加入精子，受精之后14～20h内观察原核是否正常受精，选取5～6d可冷冻的囊胚进行玻璃化冷冻保存。

1.3 观察指标

在IVF治疗前1个月经周期第2～5d取晨空腹静脉血，采用酶联免疫吸附测定法检测血清25-(OH)D3、AMH水平，试剂盒为上海酶联生物公司生产。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 各组一般情况

根据临床获卵情况将139例分为低反应组、正常反应组、高反应组。3组患者年龄、外源性促性腺激素刺激天数及总量、获卵数、成熟卵子数及优质胚胎数存在差异(P<0.05)，体质指数无差异(P>0.05)。见表1。

表1 各组一般情况比较

2.2 不同特征患者血清25(OH)D3、AMH水平

血清25(OH)D3水平低反应组低于另外两组，AMH水平低反应组、正常反应组、高反应组依次升高；妊娠组25(OH)D3、AMH水平均高于未妊娠组(均P<0.05)。见表2。

表2 不同卵巢反应性及妊娠结局患者血清25(OH)D3、AMH水平比较

2.3 25(OH)D3、AMH水平、年龄与卵巢反应性相关性分析

Person相关性分析结果显示，卵巢反应性与血清25(OH)D3、AMH水平均呈正相关(r=0.390、r=0.780)，与年龄呈负相关(r=-0.686)(均P<0.05)，见表3。

表3 各指标与卵巢反应性相关性分析

2.4 25(OH)D3、AMH预测FET术妊娠结局价值

ROC曲线分析显示，血清25(OH)D3、AMH及联合检测预测FET术妊娠结局效能见表4，两项指标联合诊断价值较高(P<0.05)。

表4 各指标对FET术妊娠结局的预测价值

3 讨论

卵巢储备功能多与患者年龄高、不孕时间长等因素有关，在辅助生育治疗手段中，患者卵巢对外源性促性腺激素反应性不同导致术后妊娠结局不一，故卵巢反应性是治疗的关键性指标，能够帮助临床制定有效的促排卵方案[8-9]。在IVF-ET治疗时，患者出现卵巢低反应的概率高达20%以上，在此情况下，患者获卵概率下降，能够供给移植的胚胎数量较少，妊娠结局不良[10-11]；卵巢高反应的患者多对外源性促性腺激素的反应程度高[12]，寻求合适的指标评价患者卵巢反应性是其获得良好妊娠结局的重点。

本研究结果显示，患者血清25(OH)D3、AMH水平越高其卵巢反应性越高，妊娠结局良好的患者血清25(OH)D3、AMH水平较未妊娠患者高。究其原因：VitD多参与人体钙磷代谢及生殖过程，普通的VitD需要经过皮肤代谢转化为活性的25-(OH)D3才能起作用，卵巢是25-(OH)D3的靶器官，25-(OH)D3与VitD受体结合使子宫内膜容受性分子HOXA10的表达量上升，进而改善患者子宫内膜容受性，而后通过刺激卵巢内胰岛素样生长因子结合蛋白-1的分泌改善患者黄体功能[13]，故25-(OH)D3活性代谢产物与卵巢功能的调节具有相关性，能够改善细胞颗粒的发育状况，影响患者卵泡发育及卵巢反应性，其水平上升预示着卵巢反应性升高，患者获得良好妊娠结局的可能性提高。AMH具有刺激卵泡发育，防止卵泡消耗过量而提升卵巢的储存功能，郭钰英等[14]研究显示，AMH水平对妊娠率影响很大。与本研究中AMH预测患者FET术妊娠结局有较高诊断价值结果具有相似性，这可能因为：AMH水平升高预示着患者卵巢反应性上升，AMH是评价患者卵巢功能优劣的有效指标，卵巢反应性高代表患者可能获卵数更多，获得优质胚胎的可能性提高，因而获得良好妊娠结局的可能性随之提升。本研究尚存在局限性，在今后的研究中将会进行改进，使研究结果更具有临床指导意义。

综上所述，血清25-(OH)D3、AMH指标均能作为卵巢反应性的评价指标，且随着两项水平升高卵巢反应性上升；血清25-(OH)D3联合AMH对FET术患者妊娠结局具有较高的预测价值，其水平升高提示患者妊娠的概率提高。提示临床可通过监测该指预测患者妊娠情况，进而改善妊娠结局。