ELISA 单试剂抗-HCV 反应性献血者的HCV 基因分型及归队研究

张锐

汕头市中心血站供血服务科，广东汕头 515000

丙型肝炎病毒（HCV）是一种丙型肝炎病毒[1-3]，该病毒具有显著异源性和高度可变性， 主要传染源包括急性临床型和无症状患者、 慢性患者及病毒携带者[4]。 调查显示。 民众中对于该病毒的认知度普遍较低[5]。 无偿献血者中可能存在携带病毒的情况，因此，采血机构应该加强对HCV 的筛查[6]。 基于此，选取该站2019 年1 月—2020 年12 月301 名ELISA单试剂检测抗-HCV 反应性献血者为研究对象，主要分析ELISA 单试剂抗-HCV 反应性献血者的HCV基因分型及归队，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取该站301 名ELISA 单试剂检测抗-HCV 反应性献血者为研究对象，其中男180 名，女121 名；年龄18～50 岁， 平均 （36.11±2.74） 岁； 体质指数（BMI）21～32 kg/m2，平均（26.64±1.48）kg/m2；收缩压110～140 mmHg，平均（122.42±10.71）mmHg；舒张压65～90 mmHg，平均（79.41±7.64）mmHg；初次献血者151 名，第2 次献血者92 名，2 次以上献血者58 名；文化程度：小学30 名，中学51 名，高中120 名，本科及以上100 名。该研究经过医学伦理委员会批准。纳入标准： ①均符合健康献血者检查标准且无过敏反应；②研究方法和目的已被献血者明确；③献血者知情并同意。排除标准：①年龄不足18 周岁；②常规体检有问题。

1.2 方法

采集献血者静脉血5 mL，分为3 份，分别用于血清学检测、PCR 定性检测及HCV 基因分型（PCR检测呈阳性者）。 HCV 基因分型呈阴性者，在献血者信息系统中将其转入“归队”程序。 由该站检验科经过专门培训认证的专业技术人员， 用全自动酶免分析后处理系统（澳斯邦FAME24/20，爱康AE268）及其配套试剂（批号V940710、V941210、V941410）和珠海丽珠试剂（批号2019061008、2019081408、2019101808）等做单试剂筛查；HCVPCR 检测 （批号201901263等，中山大学达安基因股份有限公司）。 操作过程严格按仪器及试剂说明进行。 HCV 基因分型委托浙江迪安诊断技术股份有限公司完成。

2 结果

ELISA 筛查抗-HCV 献血者，其中HCV NAT 无反应占比男性大于女性，HCV NAT 反应占比及HCV 分型阳性数占比男性小于女性，ELISA 筛查抗-HCV 献血者HCV PCR 反应情况、基因分型与性别分布，见表1。

表1 抗-HCV 献血者HCV PCR 反应情况、基因分型与性别分布[n(%)]

HCV1b＞HCV2a＞HCV3a＞HCV6a。PCR 反应性献血者HCV 基因分型阳性者HCV 亚型分布情况，见表2。

表2 PCR 反应性献血者HCV 基因分型阳性者HCV 亚型分布情况[n(%)]

PCR 无反应性献血者6 个月后再次接受血清学和NAT 检测，212 名中有182 名再次接受检测，其中2 种方法均合格的献血者有102 名， 将其纳入次轮归队程序。 经过第二轮的归队程序后，有81 名献血者回归献血者队伍，归队为26.91%（81/301）。

3 讨论

丙型肝炎病毒是一种丙型肝炎病毒。临床资料表明， 人体感染HCV 后所产生的保护性免疫力很差，甚至部分患者会因此出现肝硬化或肝癌[7-8]。 感染机制尚未明确，可能与细胞免疫病理反应可有关[9-11]。既往研究显示，ELISA 单试剂检测抗-HCV 反应性献血者的HCV 基因分型，可作为血液筛查解除屏蔽进而归队的依据[12-15]。

该次研究结果显示：301 名通过ELISA 筛查抗-HCV 献血者， 男性180 名，138 名HCV NAT 无反应，占比达到76.67%，高于女性的61.16%（74/121）；HCV NAT 反应占比男性为10.56%， 小于女性的34.71%；HCV 分型阳性数，男性为6.11%，小于女性的14.05%。 与吴凡等[16]学者的研究结果相符，其研究中， 纳入305 名ELISA 筛查抗-HCV 献血者，男174 名，128 名HCV NAT 无反应，占比达到73.56%，高于女性的58.77%（77/131）；HCV NAT 反应占比男性为10.75%， 小于女性的35.81%；HCV 分型阳性数，男性为9.77%（17 名），小于女性的15.74%。

另外，PCR 反应性献血者HCV 基因分型阳性者HCV 亚型分布分别为：HCV2a 占25.00%，HCV3a 占17.86%，HCV6a 占14.28%，HCV1b 占42.86%，结果显示：分布情况为HCV1b＞HCV2a＞HCV3a＞HCV6a。

受邀再次接受血清学和NAT 检测的212 名HCV NAT 无反应者， 有182 名同意再次接受检测，并且有102 名2 种方法均合格。 经过第二轮的归队程序后，有81 名献血者回归献血者队伍，回归率为26.91%（81/301）。 与邵雷等[18]学者的研究结果相符，其研究中，受邀再次接受血清学和NAT 检测的256 名HCV NAT 无反应者， 有178 名同意再次接受检测，并且有112 名2 种方法均合格。 经过第二轮的归队程序后，有85 位献血者回归献血者队伍，回归率为23.94%（85/355）。

综上所述，ELISA 单试剂抗-HCV 反应性献血者的HCV 基因分型及归队在血站研究中具有重要意义，不仅可屏蔽HCV 阳性者，还可体现出人文关怀作用，值得广泛推广应用。