右旋糖酐铁分散片安全试验评价研究

张俊明 周艳艳 王丽华 伍锡栋 郑国安 黎砚书

关键词：右旋糖酐铁分散片;急性毒性试验;长期毒性试验

【中图分类号】  R4【文献标识码】A 【文章编号】1673-9026（2022）15--02

本品主要成份为右旋糖酐铁，为氢氧化铁与重均分子量（Mw）5000～7500的右旋糖酐的络合物。缺铁性贫血是一种常见的临床疾病，是贫血类型中最常见，对患者的身心健康、儿童的生长发育、孕妇孕育过程自身的健康及胎儿的生长发育有着极大的影响，严重者危及生命[1]-[6] ，通过不同途径的补充或是增加机体对铁的吸收、储存和利用，减少或避免缺铁性贫血造成的严重后果。临床一般采用口服补铁比较多，尤其是对于儿童及孕产妇满足机体的需要，右旋糖酐铁分散片是口服应用比较广泛的第三代口服补铁剂，临床研究其在体内易吸收、疗效好，不良反应少等的优势，尤其是长期用药耐受较好，联合用药疗效更明显[7]  ，为论证其长期服用引起的安全性问题，本实验观察右旋糖酐铁分散片灌胃给药对小鼠产生的急性毒性反应和对大鼠产生的长期毒性反应，为临床安全用药提供剂量信息及防范不良反应监测提供依据。

1 材料

1.1动物

SPF级ICR小鼠，6～7周龄，雌雄各半，18～22g，购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司，生产许可证号：SCXK（湘）2016-0002，合格证号：NO.4300470042533;SPF级Wistar大鼠，6～7周龄，雌雄各半，80～120g，购自长沙市天勤生物技术有限公司，生产许可证号：SCXK（湘）2014-0010，合格证号：NO43006700016508，动物使用许可证号：SCXK（赣）2018-0008。

1.2藥物

右旋糖酐铁分散片 批号：170424，25mg/片，江西华太药业有限公司提供

1.3仪器

AU480全自动生化分析仪，贝克曼库尔特株氏会社;兽用全自动血液细胞分析仪，深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司;徕卡TP1020脱水机、徕卡HI1210摊片机、徕卡RM2126轮转式切片机，均由上海徕卡仪器有限公司。

2 方法

2.1 急性毒性试验

选合格SPF级ICR小鼠40只，按体重随机分为对照组和右旋糖酐铁分散片3000mg.kg-1组，每组20只，雌雄各半，1日内分3次灌胃给药，间隔4h，每次给药量40ml.kg-1，给药后观察各组动物的毒性反应及死亡数情况，每天1次，连续观察14d，观察期结束后的动物进行大体解剖，观察腹腔、盆腔、胸腔、颈部、心、肝、脾、肺、肾及脑等主要脏器及组织的变化，对有异常的脏器及组织取出进行病理组织学检查。

2.2 长期毒性试验

选合格SPF级Wistar大鼠200只，按体重随机分为对照组、右旋糖酐铁分散片右旋糖酐铁分散片93.8、187.5及375.0mg.kg-1剂量组，每组50只大鼠，雌雄各半。对照组给予纯化水，给药组给予相应组别的右旋糖酐铁分散片混悬液，每天给药1次，每周给药6天，连续灌胃给药6个月，试验期间每天定时观察动物外观体征、行为活动、腔道分泌物、呼吸、二便及给药后其它毒性反应，每周定期测定摄食量及体重，于给药后3个月、6个月各组均取20只动物，停药后1个月各组均取10只动物，均雌雄各半，麻醉后腹腔动脉采血制备全血及血清标本，分别进行血常规及生化指标检测，解剖观察、取脏器、称湿重，计算脏器系数，脏器用4%甲醛溶液固定、包埋、切片及HE染色后进行组织学病理学检查。

2.3 统计学方法

用DAS3.0软件进行统计学分析，数据均数±标准差表示（x±s），进行组间t检验、秩和检验分析。

3 结果

3.1 右旋糖酐铁分散片急性毒性试验结果

给药期间及连续观察14d，各组小鼠一般状况、自主活动无异常，生理腔道未见异常分泌物。观察期试验组小鼠均存活，未见明显毒性反应症状，解剖观察重要脏器心、肝、脾、肺、肾及脑未发现异常;雄性小鼠第2d体质量减轻，与对照组比较具有统计学意义（p<0.05），雌性小鼠体质量与对照组比较无统计学意义（p>0.05），结果见表1;观察期试验组小鼠每天每只摄食量与对照组比较无统计学意义（p>0.05），见表2。

3.2 右旋糖酐铁分散片长期毒性试验结果

3.2.1 右旋糖酐铁分散片对大鼠一般情况的影响

试验给药期间各组大鼠精神状态、外观体征、行为活动、腺体分泌、呼吸均未见异常，各组大鼠均无死亡，无毒性症状出现，停药后各项观察指标均未见异常改变。

3.2.2 右旋糖酐铁分散片对大鼠体重及摄食量的影响

试验期间与对照组比较，大鼠体质量增长变化无统计学意义（p>0.05），结果见表3 ;试验组大鼠给药早期给药组摄食量较对照组有增加的趋势，给药后期较对照组有减少的趋势，停药后给药组大鼠有增加的趋势。

血液学指标试验组雄性大鼠试验期血液学指标无异常，与对照组比较无统计学意义（p>0.05）;试验组雌性大鼠给药3个月中、高剂量组WBC计数减少，给药6个月中、高剂量组PLT计数增加，与对照组比较具有统计学意义（p>0.05），停药后均能恢复，结果见表4、5。

3.2.4 右旋糖酐铁分散片对大鼠生化指标的影响

生化指标试验组雄性大鼠肝及肾功能检测值无明显异常，与对照组比较无统计学意义（p>0.05），血糖及血清离子代谢出现统计学意义（p<0.05），但均无生物学意义;雌性大鼠肝功能中剂量组给药6个月中剂量TP减少，停药后TP及ALB均增加，与对照组比较具有统计学意义（p<0.05）。

3.2.5 右旋糖酐铁分散片对重要脏器系数及组织形态学的影响

给药3个月、6个月及停药1个月，对各组大鼠脏器进行规范的剖检，肉眼观察未见异常器官组织;脏器系数试验组雄性大鼠中剂量组给药3个月脾脏系数增加，中剂量组给药6个月心脏系数减少，雌性大鼠中剂量组心脏系数减少，停药后低剂量组肾脏和子宫系数增加与对照组比较具有统计学意义（P﹤0.05）;组织病理学检查对照组及高剂量组主要病变为肝细胞的空包变性、点及灶状坏死，心脏心肌细胞局灶性变性及慢性炎细胞浸润，但发生率及病变程度对照组与高剂量组间无明显区别。

4 讨论

右旋糖酐铁分散片是临床用量比较多的补充缺铁性贫血，作为第三代具有明显优势的口服制剂，临床研究较多的是疗效、长期用药的耐受性及不同人群用药过程中出现的不良反应，而对于用药安全性方面研究的报道较少，通过对其临床前试验研究我们发现如下。

小鼠灌胃给药急性毒性试验，右旋糖酐铁分散片大剂量灌胃给予，小鼠耐受性比较好，在灌胃给药剂量达到3000mg.kg-1，相当于临床60kg成人用药剂量（5mg.kg-1）的600倍时，用药后的小鼠未出现明显急性毒性作用，后期的观察也未发现明显的毒性临床症状，但对于缺铁性的模型能否耐受大剂量有待进一步去考察研究。

大鼠反复灌胃给药毒性试验，连续6个月灌胃给予较大剂量的右旋糖酐铁分散片，发现长期用药大鼠体质量正常增长，给药早期大鼠摄食量有增加的趋势，后期有减少的趋势，停药后能够恢复，提示用药早期补铁剂的增加有利于大鼠对摄食的增加，给药后期随着机体对需鐵量的内外平衡及给药容量的增加对摄食量有影响，停药后能够恢复;长期补铁对大鼠血液学影响不明显，尤其是补铁后的RBC和HGB2个指标的检测值，发现试验过程中和对照组无明显的区别，无统计学意义，无明显的剂量相关性，停药后也无明显的数值变化（p>0.05），提示对正常发育的大鼠在试验过程中，长期给予补铁剂，对RBC和HGB无明显影响;长期补铁对大鼠血清生化检测值影响不明显，对应各脏器的功能无明显影响，另从试验各观察期解剖大体观察无明显异常，个别脏器系数在不同观察期出现增加或减少的情况（p<0.05），但从组织病理学未发现于此相关的异常结果，提示与试验药物无明确的相关性。长期毒性试验在187.5mg.kg-1（相当于临床用药量的37.5倍）以上时，血液学出现WBC计数减少、PLT计数增加，停药后能恢复，其余血液学指标及主要肝肾功能检测无明显异常，病理学主要为肝空泡变性、肝点灶状坏死及炎性细胞浸润，心脏的局灶性坏死及炎性细胞浸润，这些组织病理学改变在对照组与给药组间无明显区别，可能与大鼠正常衰老有关。另肝是各种物质代谢洁场所，未发现其它明显的与给药相关的器质性改变，提示在187.5mg.kg-1以下剂量组给药无明显毒性反应，用药相对是安全的。

综上所述，右旋糖酐铁分散片大剂量灌胃给予小鼠3000mg.kg-1剂量时，无明显毒性反应，大鼠长期毒性试验灌胃给187.5mg.kg-1以下时，无明显的毒性反应，对长期口服补铁的患者相对是安全的。有研究报道血清铁蛋白过高会加重原有肝性疾病的程度，长期口服补铁剂对于血清及主要贮铁脏器中含铁量的变化有无明显的影响，将会进一步研究分析及另行撰文。

参考文献：

[1] 吴敏敏. 综合论述儿童缺铁性贫血的治疗[J]. 中国实用医药，2020，15（2）：193-194

[2]赖智权，冯文浩，黄文汉，等. 成人缺铁性贫血临床分析[J].数理医学药学杂志，2019，32（2）：394-395

[3]冯幼琪. 儿童保健门诊婴幼儿营养性缺铁性贫血的[J]. 中国实用医药药，2019，19（3）：180-181

[4] 郑康杰，李明珠. 儿童青少年缺铁性贫血防治研究进展[J]. 中国学校卫生，2017，38 （9）：1435-1437

[5] 吴炜林，曹臻.妊娠期铁缺乏对母胎影响的研究进展[J].现代预防医学，2016，43（21）：893-3894

[6]旷满华.儿童缺铁性贫血影响因素和铁剂治疗安全性的系统评价 [D].湖南衡阳：南华大学，2016.

[7]陈杰超，赵忠全，邢德强，等 . 右旋糖酐铁联合五维赖氨酸治疗婴儿营养性缺铁性贫血的综合疗效[J]. 现代医学，2020，48（8）：88-92.

基金项目：江西省药品监督管理局科研项目，基金编号：2019JS37