不同产地蝉蜕药材的质量研究*

钟 可，王票票，吕丽娟

(1贵州中医药大学药学院，贵州 贵阳 550025；2贵州中医药大学药用动物(昆虫类)研究中心，贵州 贵阳 550025)

蝉蜕来源于蝉科(Cicadidae)昆虫黑蚱CryptotympanapustulataFabricius的若虫羽化时脱落的皮壳。性寒，味甘、咸，归肺、肝经，具有疏散风热、利咽、透疹、明目退翳等功效[1]。药理实验证明蝉蜕有镇咳祛痰平喘、抗炎、镇静止痛解痉、抗惊厥、抗凝等作用[2]，其含有的化学成分主要为甲壳素、氨基酸和微量元素[3-5]，主产于浙江、山东、河南、河北、四川、江苏、湖北、广西、贵州等省，是常用的昆虫类动物药之一[6]。近年来，蝉蜕的价格上涨，市面上出现以次充好的蝉蜕中药材，蝉蜕的质量控制备受关注[7]，但是目前2020年版《中国药典》中缺乏蝉蜕的浸出物、水分、灰分的定性定量指标，难以评判蝉蜕药材质量的优劣。因此，本文通过对蝉蜕浸出物、灰分、水分含量测定进行研究，为中药蝉蜕的质量控制提供参考。

1 实验仪器及试药

1.1 实验仪器

分析天平(瑞士梅特公司)、数显恒温水浴锅(上海双捷实验设备有限公司)、干燥器、蒸发皿、电热恒温鼓风干燥箱(上海博讯公司)、烧杯、漏斗、锥形瓶、移液管、胶头滴管、玻璃棒、冷凝管、铁架台、量筒、马弗炉、坩埚、电炉、托盘、扁形称量瓶。

1.2 实验试剂及药材来源

娃哈哈纯净水、无水乙醇(天津市富宇精细化工有限公司)。中药材蝉蜕购于贵州省贵阳市东升药材市场，产地分别是贵州、四川、广西、河南。由贵州中医药大学药学院钟可副教授鉴定为蝉科(Cicadidar)昆虫黑蚱CryptotympanapustulataFabricius的若虫羽化时脱落的皮壳，粉碎，过二号筛，混合均匀，制成供试品。

2 方法

2.1 浸出物含量测定

2.1.1 水溶性浸出物含量测定

参照2020版《中国药典》四部(通则2201)[8]。水溶性冷浸法：取中药材蝉蜕供试品粉末4 g，精密称定，置250 mL的锥形瓶中，精密加水100 mL，密塞，冷浸，时时振摇6 h，再静置 18 h，用干燥滤器迅速滤过，精密量取续滤液20 mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴锅上蒸干后，在105 ℃的烘箱内干燥3 h，置干燥器中冷却30 min，迅速精密称定重量。计算供试品中浸出物的百分含量(%)。水溶性热浸法：取中药材蝉蜕供试品粉末4 g，精密称定，置250 mL的锥形瓶中，加入水100 mL，密塞，称定重量，静置1 h后，锥形瓶连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1 h。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液 25 mL，于已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴锅上蒸干后，于105 ℃的烘箱内干燥3 h，置干燥器中冷却30 min，迅速精密称定重量。计算供试品中浸出物的百分含量(%)。

2.1.2 醇溶性浸出物含量测定

醇溶性冷浸法：以不同浓度的乙醇(10%、20%、30%、50%、70%、90%、100%)作溶剂，每种浓度的乙醇设置三组平行，按照 2.1.1的冷浸法实验步骤操作，计算供试品中浸出物的百分含量(%)。醇溶性热浸法：以不同浓度的乙醇(10%、20%、30%、50%、70%、90%、100%)作溶剂，每种浓度的乙醇设置三组平行，按照 2.1.1的热浸法实验步骤操作，计算供试品中浸出物的百分含量(%)。

2.1.3 不同产地蝉蜕浸出物的含量测定

根据以上实验结果，筛选出中药蝉蜕最佳浸出物含量测定法对不同产地蝉蜕进行浸出物含量测定。

2.2 不同产地蝉蜕灰分的测定

照2020版《中国药典》四部(通则2302)总灰分测定法[8]。蝉蜕供试品粉碎，过二号筛，混合均匀后，取供试品2 g置炽灼至恒重的坩埚中，称定重量(准确至0.01 g)，缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500～ 600 ℃，使完全灰化并至恒重。根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量(%)。

2.3 不同产地蝉蜕水分的测定

照2020版《中国药典》四部(通则0832)水分测定中烘干法[8]。取蝉蜕供试品2 g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过10 mm，精密称定，开启瓶盖在100～105 ℃干燥5 h，将瓶盖盖好，移置干燥器中，放冷30 min，精密称定，再在上述温度干燥1 h，放冷，称重，至连续两次称重的差异不超过5 mg为止。根据减失的重量，计算供试品中含水量(%)。

3 结果

3.1 浸出物含量测定

3.1.1 水溶性浸出物含量测定

取贵州产蝉蜕粉末作为供试品，照2.1.1项下方法进行水溶性浸出物及醇溶性浸出物含量测定，结果分别见表1-表4。

表1 水溶性浸出物冷浸法含量测定结果(n=3)Tab.1 Determination results of water-soluble extract by coldleaching method(n=3)

表2 水溶性浸出物热浸法含量测定结果(n=3)Tab.2 Determination results of water-soluble extractby hot leaching method(n=3)

表3 醇溶性浸出物冷浸法含量结果(n=3)Tab.3 Determination results of alcohol-soluble extractby cold leaching method(n=3)

表4 醇溶性浸出物热浸法含量结果(n=3)Tab.4 Determination results of alcohol-soluble extractby hot leaching method(n=3)

续表4

实验结果显示，蝉蜕水溶性冷浸法浸出物含量为2.01%，水溶性热浸法浸出物含量为4.03% ，表明中药蝉蜕的水溶性浸出物测定热浸法优于水溶性冷浸法。

3.1.2 醇溶性浸出物含量

由表4可知：70%醇溶性热浸法得到蝉蜕的浸出物含量为7.18%，水溶性热浸法浸出物含量为4.03%，水溶性冷浸法浸出物含量为2.01%，50%醇溶性冷浸法的浸出物含量为1.92%，实验结果表明：70%醇溶性热浸法的浸出物含量最高，为蝉蜕药材浸出物最佳测定法。

3.1.3 不同产地蝉蜕浸出物含量的测定

实验结果表明，不同产地蝉蜕的浸出物含量在5.90% ～7.68%之间，其中河南产浸出物含量最高，为7.68%；最低为四川产蝉蜕，浸出物含量为5.90%。见表5。

表5 不同产地蝉蜕浸出物含量测定结果(n=3)Tab.5 Determination results of extract content of cicada sloughfrom different producing areas(n=3)

3.2 不同产地蝉蜕灰分含量的测定

实验结果表明(表6)，不同产地蝉蜕的灰分含量在11.74% ～ 22.78%之间，其中四川产灰分含量为22.78%，广西产灰分含量为18.64%，贵州产灰分含量为12.92%，河南产灰分含量为11.74%。平均值为16.52%。

表6 不同产地蝉蜕灰分含量测定结果(n=3)Tab.6 Determination results of ash content of cicada sloughfrom different producing areas(n=3)

3.3 不同产地蝉蜕水分含量的测定

实验结果表明(表7)，不同产地蝉蜕的水分含量在7.63% ～ 9.31%之间，其中贵州产的水分含量为9.31%，四川产的水分含量为8.95%，广西产的水分含量为8.75%，河南产的水分含量为7.63%。

表7 不同产地蝉蜕水分含量测定结果(n=3)Tab.7 Determination results of moisture content of cicadaslough from different producing areas(n=3)

4 结果与讨论

中药蝉蜕浸出物含量测定结果表明：蝉蜕的水溶性热浸法浸出物含量最高，为4.03%；蝉蜕的醇溶性冷浸法是以50%乙醇浸出物含量最高，为1.92%；蝉蜕的醇溶性热浸法以70%乙醇浸出物含量最高，为7.18%。因此蝉蜕的浸出物含量测定以70%乙醇热浸法提取最佳。不同产地的蝉蜕浸出物含量在5.90%～7.68%之间，河南(7.68%)，广西(7.49%)，贵州(7.33%)，四川(5.90%)。整体来看，蝉蜕浸出物含量不高，但是在蝉蜕药材活性成分或指标成分不清或含量低的情况下，浸出物可作为其质量控制指标之一，然而目前还未规定蝉蜕浸出物含量测定的质量标准。本实验通过测定蝉蜕浸出物的含量，确定了最佳的蝉蜕浸出物提取方法，以70%乙醇热浸法提取率最高，建议按醇溶性浸出物热浸法测定，乙醇浸出物不得少于5.0%。

中药蝉蜕灰分含量测定结果表明：蝉蜕灰分含量在11.74%～22.78%之间，四川(22.78%)、广西(18.64%)、贵州(12.92%)、河南(11.74%)。灰分的含量相对来说较高，根据以上结果分析，蝉蜕灰分含量偏高可能是由于蝉生活习性、收集、加工、运输、储存等环节有其他无机物污染或掺杂。因蝉的若虫在地下度过两三年才破土而出；采收时蝉蜕掉落在泥土上，加工环节、储存环境等也可能导致蝉蜕携带上杂质，让壳衣混入泥沙和其他杂质[9]。为保证蝉蜕药材的质量，灰分不应过高；应尽可能在晴朗天气采收，避免沾染更多泥土；采收加工过程中应尽可能避免更多泥土等杂质混入，储存环境保持干燥与洁净。目前《中国药典》还未限定蝉蜕灰分的含量，为保证蝉蜕药材质量，以平均值的±20%为限度制定限量范围，建议质量标准中增加蝉蜕灰分含量限定项，不得超过20.0%。

蝉蜕水分含量在7.63%～9.31%之间，贵州(9.31%)、四川(8.95%)、广西(8.75%)、河南(7.63%)，其中河南产地水分含量最少，整体来看，水分的含量较低，低于10%以下。目前还未规定蝉蜕水分含量测定的质量标准，若药材含水量过大，则容易发霉变质。降低蝉蜕药材含水量可在净制后将其及时晒干或烘干，储存时考虑环境是否通风干燥等，建议蝉蜕的水分含量不得超过10.0%。