盐酸特比萘芬喷雾剂皮肤用药安全性评价

张俊明 周艳艳 杨倚天 郑国安 吴金花 肖小华

摘要：目的 研究盐酸特比萘芬喷雾剂皮肤用药的安全性。方法 将喷雾剂多次涂于新西兰兔完整或破损皮肤处，观察药物对皮肤产生的刺激反应、反应强弱及可逆性;采用 Buehler 试验，观察豚鼠皮肤接触喷雾剂后产生的过敏反应及过敏强度;客观评价盐酸特比萘芬喷雾剂可能存在的毒性反应。结果 盐酸特比萘芬喷雾剂经皮给药试验结果表明，兔皮肤在给药期间至停药后72h，均无明显的红斑和水肿等皮肤刺激症状，原发性刺激记分及累计刺激指数均为0;激发后，豚鼠皮肤48h内均无红斑和水肿形成，致敏反应发生率均为0%;结论 盐酸特比萘芬喷雾剂经皮给药无明显致敏性、刺激性，具有良好的安全性。

关键词：盐酸特比萘芬喷雾剂;皮肤刺激性;皮肤致敏

【中图分类号】  R97【文献标识码】A 【文章编号】1673-9026（2022）13--01

1994年开始，盐酸特比萘芬应用于我国临床，作为广谱抗真菌药，可针对各种癣病如手癣、脚癣、股癣、体癣和花斑癣、皮肤念珠菌病和指甲真菌感染病等的治疗，抗真菌效果明显优于咪唑类（如硝酸咪康唑、酮康唑）、三唑类药物（如伊曲康唑、氟康唑）、非多烯类的灰黄霉素等。由于特比萘芬杀菌浓度与抑菌浓度相近，有效浓度是治疗真菌病药物中浓度最低的，故气雾喷剂应运而生，加之无需在感染部位进行操作，这减少了手和感染区域之间的接触，从而降低了病原体转移到健康皮肤区域的风险[1]。盐酸特比萘芬喷雾剂具有使用方便、疗效较好、应用范围广，患者依从性好等优势[2]。因此，评估该喷剂的用药安全性至关重要，下文主要通过皮肤致敏性、刺激性试验[3]，来评估盐酸特比萘芬喷雾剂的局部外用安全性。

1 试验材料

1.1 试验动物

普通级新西兰兔：16只雌雄各半，体重 2.1 ～ 2.5 kg，合格证编号：NO.430726210100260854，普通级Dunkin Hartley豚鼠，50只雌雄各半300.0～400.0g，NO.430726210100223712，来源：长沙市天勤生物技术有限公司，动物生产许可证号：SCXK（湘）2019-0015。动物使用许可证号：SYXK（赣）2018- 0008。环境控制（实测）：温度：23～26 ℃;日温差≤4 ℃;湿度：58%～70%;照明时间：12 h/12 h 明暗交替。每只动物上下午各喂1次，自由饮水。

2 试验药物

盐酸特比萘芬喷雾剂，批号：2104002;盐酸特比萘芬喷雾剂阴性对照，批号：2106001;均来源：华润三九（南昌）药业有限公司;原研对照品：兰美抒喷雾剂，批号：H1030，来源：Glaxo Smith Kline Consumer Healthcare GmbH﹠Co.KG;2，4-二硝基氯苯，批号：P436374，成都华夏化学试剂有限公司;橄榄油，分析纯，批号：C12004122，上海麦克林生化科技有限公司。

2 试验方法

2.1 盐酸特比萘芬喷雾剂兔皮肤刺激性试验

试验前24h，将实验兔脊柱两侧背部皮肤进行剪毛，范围为3cm×3cm。破损皮肤制作：一次性无菌注射针头在脱毛区皮肤上划“#”字形，均以损伤角质层、表皮渗血为度。采用同体左右侧自身对比法，对兔完整皮肤或破损皮肤给药，左侧依组别分别给予盐酸特比萘芬喷雾剂或兰美抒喷雾剂，右侧均给予盐酸特比萘芬喷雾剂阴性对照，用两层纱布加一层透明塑料纸覆盖，胶布封闭固定。4h后，用温水清洁给药部位。给药量为0.5ml，2次/d，连续7天。首次给药前以及每天末次给药去除药物后1h、末次给药去除药物后1、24、48、72h，在自然光线或全光谱灯光下肉眼观察皮肤反应，记录红斑及水肿、涂敷部位是否有色素沉着、出血点、皮肤粗糙或皮肤菲薄情况及消退时间，按表1给出的评分标准对涂敷部位皮肤刺激反应进行评分。

2.2 盐酸特比萘芬喷雾剂皮肤过敏性试验

试验前24h，分为阴性对照组、特比萘酚组、兰美抒组、阳性对照组，采用剪毛法，致敏阶段将豚鼠脊柱左侧肋腹部、激發阶段将豚鼠脊柱右侧肋腹部的被毛除去，约为3cm×3cm。在第0、7、14天分3次对豚鼠进行致敏，在豚鼠左侧脱毛区，依组别分别涂敷0.5ml的盐酸特比萘芬喷雾剂阴性对照、盐酸特比萘芬喷雾剂、兰美抒喷雾剂及1%的2，4-二硝基氯苯，用纱布和透明塑料纸覆盖，以胶布封闭固定6h后，用温水清洁给药部位。第28d进行激发，在豚鼠脊柱右侧背部皮肤脱毛区，如上法操作。每次致敏后，在去除药物1h和24h后观察;激发后，在去除药物0h、24h和48h后观察皮肤红斑、水肿和其他异常反应，按表2进行皮肤反应评分，并计算过敏反应发生率。

3 试验结果

3.1 兔皮肤刺激性试验结果

在给药观察期至末次给药后72h的观察期，完整/破损皮肤特比奈芬组、完整/破损皮肤兰美抒喷雾剂组给药部位均未见红斑和水肿，无明显出血点及皮肤菲薄的异常情况。各组原发性刺激记分和累积刺激指数为均0分;各组皮肤刺激强度均为无刺激性，结果见表3。

3.2 豚鼠皮肤过敏性试验结果

在第0h、24h及48h观察激发部位，阴性对照组、特比萘酚组、兰美抒组、均未见明显的红斑和水肿，按皮肤反应评分标准分值均为0，过敏反应发生率均为0，致敏强度均为无致敏性反应。阳性对照组于去除药物后0h，均出现不同程度的红斑及水肿，其中1只出现严重红斑;致敏24h后仍各有不同程度的红斑和水肿，其中雌性更为明显，部分出现中度水肿;48h时红斑水肿程度减轻，按皮肤反应评分标准红斑1～3分，水肿1～2，致敏率为100%，致敏强度为极强致敏。

4 讨论

盐酸特比萘芬喷雾剂能高度选择性地抑制真菌麦角鲨烯环氧化酶，阻断真菌细胞膜形成过程中的麦鲨烯环氧化反应而干扰真菌固醇的早期生物合成，从而发挥抑菌和杀灭真菌的作用[4， 5]。兔皮肤刺激试验试验结果显示，盐酸特比萘芬喷雾剂和兰美抒喷雾剂给药后，对兔完整皮肤和破损皮肤在给药期间及停药后72h的观察期内，与阴性对照皮肤给药部位比较无明显区别，各组原发性刺激记分及累计刺激指数均为0，提示给药部位皮肤均无刺激性;豚鼠皮肤过敏性试验结果表明阴性对照组、特比萘酚组、兰美抒组致敏率均为0%，对豚鼠皮肤均不产生皮肤过敏反应，而阳性对照组中豚鼠激发部位出现中度红斑水肿，少数至重度红斑及中度水肿，致敏率为100%，对豚鼠皮肤具有极强致敏反应，说明盐酸特比萘芬喷雾剂未引起皮肤过敏反应。综上，盐酸特比萘芬喷雾剂皮肤局部用药无明显致敏性、刺激性，具有良好的安全性。

参考文献：

[1] 邢文善， 路芳， 王秋香. 盐酸特比萘芬药物制剂的研究进展[J]. 中国药房， 2016，27（04）： 553-555.

[2] BROWN M， EVANS C， MUDDLE A， et al. Efficacy， Tolerability and Consumer Acceptability of Terbinafine Topical Spray versus Terbinafine Topical Solution： A Phase IIa， Randomised， Observer-Blind， Comparative Study[J]. American Journal of Clinical Dermatology， 2013，14（5）： 413-419.

[3] 国家食品药品监督管理总局. 药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则 [EB/OL]. https：//www.nmpa.gov.cn/xxgk/ggtg/qtggtg/20140513120001448.html.

[4] 蔡云香， 薛小燕， 张克辉， 等. 盐酸特比萘芬喷雾剂、氟康唑滴液与派瑞松乳膏治疗外耳道真菌病的疗效对比[J]. 中国医药指南， 2017，15（31）： 49-50.

[5] BALFOUR J A， FAULDS D. Terbinafine. A review of its pharmacodynamic and pharmacokinetic properties， and  therapeutic potential in superficial mycoses[J]. Drugs， 1992，43（2）： 259-284.