王海鲜 吴茅
结核性浆膜炎是最常见的肺外结核,且近几年发病率逐渐升高。早期临床症状不典型,难以根据积液生化常规及临床表现诊断。目前结核性浆膜炎的诊断金标准是结核杆菌的培养及病理组织的活检,但两者的诊断阳性率均较低,且耗时长。近年来,随着细胞图文报告形态学的研究,发现浆膜积液中淋巴细胞比例的升高在结核性浆膜炎诊断中具有重要价值。本文探讨临床诊断为结核性浆膜炎的患者积液图文报告的淋巴细胞百分比与腺苷脱氨酶(ADA)、乳酸脱氢酶(LDH)、总蛋白的相关性。
1.1 临床资料 收集2013年1月至2019年12月本院浆膜炎伴有积液患者352例。其中临床确诊结核性积液的患者277例,排除结核性肾盂积液、关节结核性积液、结核性皮肤脓肿、结核性脊柱炎、结核性淋巴管炎及未做积液生化和图文报告的患者,共纳入221例为观察组。按淋巴细胞比例分为观察组1(淋巴细胞比例≤60%),观察组2(60%<淋巴细胞比例≤80%),观察组3(淋巴细胞比例>80%),另取图文报告诊断为慢性非特异性炎症患者75例为对照组。
1.2 方法 (1)涂片制作及图文报告分析:取8~10 mL积液于专用带盖的EDTA-K2干粉抗凝管,颠倒混匀,保证样本无凝块。经1,500 r/min离心10 min后,吸尽上清液,留下残渣10~20μL,混匀后推制1~3张涂片。自然晾干,瑞特-吉姆萨染液染色,置于油镜下在涂片体尾交界处“弓”字形分类100个有核细胞,在显微摄像系统摄图并作彩色图文报告分析,得出淋巴细胞百分比。(2)积液生化项目的检测: ADA、LDH、总蛋白的测定使用BACKMAN-COULTER 5831全自动生化仪,LDH、总蛋白采用BACKMAN配套试剂盒,ADA采用北京利德曼公司试剂盒。每个患者抽取积液5 mL,离心后取上清液按试剂说明书进行相关项目检测。各项指标严格按照本实验室标准化程序检测,且每日室内质控均在控。
1.4 统计学方法 采用SPSS 25.0统计软件。计量资料以(±s)表示,采用单因素ANOVA分析,P<0.05为差异有统计学意义。
2.1 结核性积液患者在不同淋巴细胞分组中的人数分布 见图1。
图1 结核性积液患者在不同淋巴细胞分组中的人数分布
2.2 各组积液中ADA、LDH、总蛋白检测结果比较 结核性积液中ADA、LDH、总蛋白在各观察组与对照组间差异有统计学意义(P<0.001),而各观察组间比较差异无无统计学意义。(P>0.05)。见表1。
表1 各组积液中ADA、LDH、总蛋白检测结果比较
肺外结核2017年我国最新标准定义为发生在肺组织、气管、支气管和胸膜以外器官的结核[1]。近10年,肺外结核比例从29.8%增加至31.4%,在肺外结核患者中,胸膜结核增幅更大[2]。ALBERTO等[3]研究显示,当胸腔积液ADA水平≥40 U/L,且胸腔积液中淋巴细胞比例≥50%时,对结核性胸膜炎诊断的敏感度为89%、特异度为92.7%。作者前期研究也表明,常规胸腹水细胞图文报告中淋巴细胞比例>80%的临床诊断阳性率符合率为78.8%[4]。这些研究均揭示了结核性积液的细胞特性,给该疾病的诊断提供新的研究思路。
结核性浆膜炎的发病机制是结核菌感染引起机体迟发性超敏反应,在此基础上,结核菌的结核蛋白进入浆膜腔引起浆膜炎症反应,导致淋巴细胞分化增殖,浆膜 CD4+T细胞选择性增多,继而引起 ADA升高[5]。且该酶的活性与淋巴细胞的激活、分化与增殖有明显的相关性[6]。YUAN等研究表明参与核酸代谢的ADA酶活性随侵犯组织核酸代谢增高而增高[7]。LDH是一种含锌的糖酵解酶,存在于机体所有组织细胞的胞质内,因此当机体组织受损时,积液中LDH 活性增加[8],是临床观察肝脏功能或心肌损伤等人体炎症反应的参考指标。肺炎、肺结核、结核性浆膜炎会造成组织坏死,血清及周围组织中的LDH进入浆膜腔导致积液中LDH升高。LDH数值越高,表示炎症越严重。本资料结果表明,结核性浆膜炎时,LDH在积液中含量比慢性非特异性炎症患者升高,组织的受损程度高于慢性非特异性炎症,但是升高的程度和淋巴细胞的比例无相关性,间皮细胞和巨噬细胞比例和LDH酶活性无相关性。
浆膜腔积液中的漏出液是血浆渗透压降低或血管内压力增高等因素形成的非炎症性积液,常见疾病为充血性心力衰竭、肝硬化和肾病综合征等。渗出液是毛细血管壁的通透性改变等因素所致,常见疾病为恶性肿瘤、结核性疾病、细菌感染等[9]。临床上一般以总蛋白含量30 g/L作为渗出液和漏出液的界定值,当胸腔积液中的总蛋白含量>30 g/L时,称为渗出液。胡庆刚等研究表明总蛋白以40.7 g/L为截断值,诊断结核性胸腹水的灵敏度为89.0%,特异度为81.8%[10]。本资料结果表明,结核性浆膜炎蛋白浓度高于慢性非特异性炎症患者,考虑可能是由于肺结核为炎症反应,局部炎症反应相对较重,导致浆膜腔积液中蛋白渗出增多所致,但总蛋白的升高和淋巴细胞的百分比无相关,从而说明局部炎症的严重程度跟淋巴细胞比例并无相关性。
综上所述,结核性浆膜炎的患者积液中ADA、LDH、总蛋白的含量明显升高,但其升高程度与淋巴细胞所占百分比的高低无相关性。如淋巴细胞百分比明显升高同时伴ADA或LDH或总蛋白升高,则结核性浆膜炎诊断的阳性率会明显提高。