李春梅
钦州市第二人民医院 广西 钦州 535000
乙肝病毒是引起乙型肝炎的病原体,可造成肝实质炎症性损伤,并进展为肝硬化、肝功能衰竭、肝细胞性肝癌等恶性肝脏疾病,对健康造成影响[1]。血清学指标是乙肝病毒检验常见方式,诊断价值较高,具有操作简单、诊断快速的优点,但无法反映乙肝病毒在体内复制情况[2]。乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)可对血清中HBV-DNA复制情况进行分析,从而区别不同时期的感染及诊断乙肝突变株。本文现针对院内427例患者进行研究,内容如下。
自本院收治的乙肝病毒患者中抽取214例作为疾病组,另从院内体检中心进行健康体检的健康人员中抽取213例作为健康组,所有患者均于2021年8月-2021年10月期间在本院就诊。疾病组纳入患者男女比114:100,16岁~90岁,均值(53.26±6.43)岁;健康组纳入患者男女比110:103,17岁~90岁,均值(53.54±6.36)岁。组间无差异,P>0.05。
两组患者均进行HBV-DNA及血清学指标检验,详细步骤如下:
HBV-DNA检验:于患者晨起空腹状态下抽取静脉血3~5ml,3000r/min离心五分钟后分离出血清,如果没有及时检测可将血清放置于-20℃环境内保存,保存期6个月,检测时取出200uL血清与450uLDNA提取液混合,用振荡器剧烈震荡混匀15S,瞬时离心数秒。100℃恒温处理10分钟。离心速度为12000r/min,离心时间为5min,取出上清备用。分别取2uL处理后的样品及标准品,加入PCR反应管中进行离心处理,离心速度为8000r/min,离心数秒后取出将其放入仪器样品槽,相关反应参数设置为93℃预变性2min,1个循环;93℃45秒→55℃ 60秒 10个循环,93℃30秒→55℃ 45秒 30个循环循环完成后如果在FAM检测通道扩增曲线无对数增长期或CT值等于30,在VIC检测通道扩增曲线有对数增长期,则判样品的HBV-DNA浓度小于检测灵敏度。如果在FAM检测通道扩增曲线有对数增长期且CT值小于30,则按以下方法判断:若样品的C<100,则该样品的HBV-DNA浓度<100IU/mL:若样品的100≦C≦5.00E+008,则该样品的HBV-DNA浓度=C IU/mL:若样品的C>5.00E+008,则该样品的HBV-DNA浓度>5×108IU/mL。如果需要精确定量结果,可将样品用阴性质控品稀释到线性范围后再检测。则该样品的HBV-DNA浓度=(C×稀释倍数)IU/mL。
血清学指标检验:于患者晨起空腹状态下抽取静脉血3~5ml,3000r/min离心五分钟后分离出血清,如果没有及时检查将血清放置于-20℃环境内保存,保存期为6个月,检测时采用乙型肝炎血清标志物ELISA定性试剂盒进行检测,按照试剂盒说明书进行操作,诊断标准如下:①HBsAg阳性:≧0.2ng/ml,阴性:<0.2ng/ml;②抗-HBs浓度阳性:≧10mIU/ml,阴性:<10mIU/ml;③E抗原阳性:≧0.5PEIU/ml,阴性:<0.5PEIU/ml;④核心抗体阳性:≧0.45IU/ml,阴性:<0.45IU/ml;⑤e抗体阳性:≧0.2PEIU/ml,阴性:<0.2PEIU/ml。
比较组间HBV-DNA及血清学指标检验结果。
疾病组相较于健康组HBV-DNA、HBsAg、抗-BHs浓度、e抗原、核心抗体、抗-HBe水平较高,P<0.05,见表1。
表1 组间HBV-DNA及血清学指标检验结果比较
乙肝病毒可通过血液、母婴、密切接触等途径进行传播,感染后可对患者肝脏造成损伤,从而诱发乙型肝炎,对患者机体健康造成影响,因此临床需及时采取有效检验方式进行疾病诊断,便于临床治疗[3]。
血清标志物检验是临床常见的乙肝病毒检验方式,可准确分辨出是否携带乙肝病毒,在临床筛查中具有重要意义,但无法反映乙肝病毒在体内的复制情况。HBV-DNA是乙肝病毒感染最直接、特异性强及灵敏性高的指标,可直接、准确地反映乙肝病毒复制情况[4]。本文经过研究发现,疾病组相较于健康组HBV-DNA及血清标志物水平较高,P<0.05。表明通过HBV-DNA与血清标志物检验可进行乙肝病毒患者鉴别。当机体内感染乙肝病毒后,可对免疫功能造成影响,出现免疫功能低下的情况下,乙肝病毒可在体内不断复制,同时血液中HBeAg水平升高,出现免疫功能较高的情况时,乙肝病毒停止复制,血液中HBeAg水平降低,但e抗体升高,因此联合应用HBV-DNA与血清标志物检验,可使疾病诊断准确率提高。
综上所述,在乙肝病毒检验中,可采用HBV-DNA联合血清标志物的方式进行检验,获得较为准确的检验结果,及时进行疾病诊断及治疗。