电针对小鼠脑创伤介导急性肺损伤的机制研究*

陈冬冬 杨新霞 楼颖颖

宁波市医疗中心李惠利医院 浙江 宁波 315000

脑创伤介导急性肺损伤（TBI-ALI）是脑创伤常见的并发症，其致病率往往高达25%。本实验拟通过观察脑创伤后肺组织中谷氨酸及相关炎症因子的表达，探究电针对减轻小鼠TBI-ALI发生的具体机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物与分组：清洁级C57BL/6（体质量21～22g，年龄8周）30只小鼠购买于上海实验动物中心。术前12小时禁食，自由饮水。随机分为对照组、造模组、电针组3组。

1.2 仪器与试剂：精密颅脑损伤撞击器（深圳瑞沃德，68093型号）；脑立体定位仪（深圳瑞沃德，68025型号）；紫外分光光度计(南京科捷，752/752N型号)；谷氨酸检测试剂盒（南京建成，A074-1-1）；炎症因子TNF-α、IL-1β试剂盒（美国Ebioscience）。

1.3 模型制备：待小鼠麻醉，将小鼠仰卧位固定于脑立体定位仪，选择小鼠前囟和人字缝之间左侧颅骨的位置，剪开皮肤1cm暴露颅骨，随即打开骨膜，对小鼠头部进行左侧颅骨钻孔。选定打击参数为：深度2mm，时间100ms，速度3.5m/s。打击后，将骨瓣还纳于骨窗中，用胶水封闭窗口，最后缝合头皮。

1.4 干预方法：对照组：小鼠仅打开颅骨，不进行钻孔。造模组：本实验采用控制性皮层冲击法制备脑创伤模型。电针组：电针组小鼠先行TBI造模，造模后0.5小时进行电针“百会”“大椎”穴，选用华佗牌电针仪进行电刺激，疏密波，频率2/15Hz，强度1mA，持续30min，以小鼠肢体轻微抖动为度。“百会”穴位于顶骨正中，“大椎”在第7颈椎与第1胸椎间，背部正中。

1.5 谷氨酸浓度测定：TBI术后24小时处死小鼠。取小鼠左肺组织进行匀浆，4℃，12000rpm，10min进行离心。取上清液按照谷氨酸检测试剂盒添加相应试剂，混匀，37℃水浴40min。取出后采用紫外分光光度计，340nm，1cm光径，检测各样本吸光度值。根据吸光度计算出谷氨酸浓度。

1.6 炎症因子测定：取上述肺组织匀浆后上清液，采用ELIAS法进行炎症因子TNF-α、IL-1β检测。

1.7 统计学方法：采用SPSS 13.0软件分析，数据以±s表示，组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用Turkey检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组间谷氨酸浓度比较：见表1。

表1 3组间谷氨酸浓度比较（±s）

表1 3组间谷氨酸浓度比较（±s）

注：与对照组比较，*P＜0.05；与造模组比较，#P＜0.05。

谷氨酸浓度（ng/ml）32.45±7.54 79.88±6.55*46.34±9.34*#组别对照组造模组电针组例数10 10 10

2.2 3组间炎症因子浓度比较：见表2。

表2 3组间炎症因子TNF-α、IL-1β比较（±s）

注：与对照组比较，*P＜0.05；与造模组比较，#P＜0.05。

组别对照组造模组电针组IL-1β（pg/ml）22.83±3.29 69.72±5.23*44.72±3.75*#例数10 10 10 TNF-α（pg/ml）18.34±4.33 55.22±3.78*37.65±4.25*#

3 讨论

TBI介导ALI发生的机制多种多样。研究发现，血浆中谷氨酸浓度与TBI-ALI的发生率密切相关，其可通过促进炎症因子的表达而增加肺损伤的发生率。因此，有效降低血浆中谷氨酸浓度可有效减轻ALI的致病率。中医学认为TBI为脑部受损，瘀血内停，气机受阻，阻滞经络[1]，而针刺“百会”及“大椎”穴可疏通经络，健脑补髓，从而达到脑保护的作用。本研究发现小鼠造模后肺组织中谷氨酸及炎症因子TNF-α、IL-1β浓度较对照组明显增加，而给予电针处理后，三者浓度均较TBI组下降，但仍高于对照组。可见电针具有减轻TBI-ALI的效果，且其机制可能为通过降低谷氨酸浓度，从而降低炎症因子的产生而发挥作用。