赖腾强谢娜吴伯文张平李晔金凌云
(1.福建农业职业技术学院,福建 福州 350007;2.福建仙芝楼生物科技有限公司,福建 福州 350002)
灵芝是我国传统的名贵中药,富含三萜类、多糖类、核苷类等多种药理活性物质,具有防癌、抗癌和保肝的作用。灵芝的传统栽培方法为阔叶椴木栽培,对保护森林资源极为不利,我国实施“天然林保护工程”后,灵芝栽培方法转为采用代料栽培。研究表明,硬质阔叶树木屑代料栽培灵芝较为理想[1,2],而枇杷树是常绿阔叶乔木,适合代料栽培灵芝。笔者于2012年以来开展枇杷枝屑代料栽培灵芝研究[3,4],研究表明,枇杷枝屑可作为灵芝的栽培原料。用枇杷枝屑代替原木栽培灵芝,不仅变废为宝,具有提高枇杷产业整体经济效益的作用,还具有保护森林资源的重大意义。本研究通过添加不同比例枇杷枝屑代料栽培灵芝,对灵芝的栽培特性、品质等进行比较分析,以期为枇杷枝屑代料栽培灵芝提供理论依据。
供试菌株为笔者试验筛选出的适于枇杷枝屑代料栽培的“圆芝8号”[3]。
栽培袋培养基设6组配方,见表1,枇杷枝屑培养基为试验组(用SY表示),杂木屑培养基为对照组(用CK表示)。栽培袋培养基均添加辅料:麸皮10%,红糖、过磷酸钙各0.5%,石灰1%,料水比为1∶1.5,pH值自然。枇杷树品种为“解放钟”,选用修枝废弃的新鲜枇杷枝,用粉碎机粉碎备用。
表1 供试培养基配方
采用机械拌料、装袋,用17cm×33cm×0.005cm聚丙烯袋装料,料高约14cm,干料重约385g。采用高压灭菌,压力达到0.11MPa时保持2h,自然冷却。待料温降至25℃以下,在接种箱接种,用气雾消毒粉消毒30min,之后按无菌操作规范接种,每种培养基接种60袋。接种完毕后统一移入培养室走菌,温度、湿度分别保持在20~25℃、60%~70%,避光培养。
按赖腾强等的方法进行走菌与出芝管理,当菌丝长满料袋后统一移入栽培室出芝,栽培室保持适宜的温度、湿度、光照和通风量,以利于原基的形成与分化、子实体生长。出芝期只给水,不使用任何添加剂,不使用农药,病虫害完全采取综合防治,以环境的预处理和卫生维护为主[5]。当灵芝菌盖边缘的白边变为褐色时即可采收,采收后及时烘干(温度不超过60℃)至恒重。
走菌与出芝期间,观察各培养基灵芝的栽培特性,记录菌丝生长、生长周期、商品性状等情况。采收2潮灵芝,统计产量,计算生物学效率。以第1潮灵芝子实体进行商品性状、品质的比较分析,多糖、三萜含量分析按照中国药典[6]的标准进行,重金属、农残含量分析按照STP(I)-QY-006的标准进行。
从表2可知,各培养基的灵芝菌丝均生长正常,菌丝洁白、浓密。在生长速度方面,枇杷枝屑较杂木屑的快,且随着枇杷枝屑量的增加,菌丝生长速度随之加快,盖面时间快0.5~1.5d,满袋时间快1.5~8.5d;枇杷枝屑较杂木屑的长速快0.15~1.22mm·d-1。在生长周期方面,枇杷枝屑较杂木屑的短,但随着枇杷枝屑量的增加,生长周期随之延长;枇杷枝屑较杂木屑的原基发生时间短0~2d,原基分化时间短1~3d,孢子弹射时间短2~7d,第1潮采收时间短2~8d。
表2 各配方灵芝菌丝生长与生长周期情况
从表3可知,各培养基的灵芝子实体形态均生长正常,均能正常产生和释放孢子,多为近圆形,色泽均匀一致。在商品性状方面,枇杷枝屑较杂木屑的商品性状好,菌柄较杂木屑的长0.88~1.73cm、菌盖较杂木屑的小0.16~0.80cm、菌盖较杂木屑的厚0.03~0.26cm。在生物学效率方面,枇杷枝屑较杂木屑的产量高,但随着枇杷枝屑量的增加,产量、生物学效率随之降低;枇杷枝屑较杂木屑的产量高3.94~7.31g,生物学效率高1.02%~1.89%。
表3 各配方灵芝商品性状与生物学效率情况
从表4可知,在灵芝多糖方面,随着枇杷枝屑量的增加,多糖含量随之增多,当枇杷枝屑添加量为85%时多糖含量最高为8.89mg·g-1;当枇杷枝屑添加量为45%、55%时,多糖含量低于杂木屑的,当枇杷枝屑添加量65%、75%、85%时,多糖含量高于杂木屑的。在灵芝三萜方面,随着枇杷枝屑量的增加,三萜含量随之增多,当枇杷枝屑添加量75%时,三萜含量最高为8.91mg·g-1;当枇杷枝屑添加量85%时,三萜含量有所下降;当枇杷枝屑添加量为45%时,三萜含量较杂木屑低;当枇杷枝屑添加量55%、65%、75%、85%时,三萜含量比杂木屑高。
表4 各配方灵芝品质情况
随机抽取枇杷枝屑代料栽培的灵芝进行重金属指标、农残含量检测,结果表明,重金属、农残含量均符合检测标准,均符合NY/T 749-2018 《绿色食品 食用菌》中规定的食用菌重金属、农残含量要求,由此说明,试验灵芝材料均是安全、无毒的,符合试验材料要求[7]。
研究表明,利用枇杷枝屑代料栽培灵芝,菌丝生长正常,子实体形态正常,能正常产生和释放孢子,与杂木屑代料栽培的基本一致,这与张平等研究结果相一致[3];随着枇杷枝屑量的增加,菌丝生长速度加快,多糖和三萜含量也有所增加,但生长周期有所延长,产量和生物学效率有所降低;菌丝生长速度快0.15~1.22mm·d-1,产量高3.94~7.31g,生物学效率高1.02%~1.89%,多糖含量有的高0.19~2.40mg·g-1,三萜含量有的高0.14~1.60mg·g-1。
灵芝的主要活性成分是多糖和三萜类化合物,《中华人民共和国药典》(2010年版)主要是以灵芝子实体多糖和三萜含量高低评价灵芝品质[8],综合比较各培养基灵芝菌丝生长状况、子实体产量、生物学效率以及品质等指标[9],评价结果,枇杷枝屑代料栽培灵芝枇杷枝屑用量应控制在65%~75%为宜。枇杷枝屑用量为65%~75%时,灵芝菌丝生长速度快,产量、生物学效率高,多糖、三萜含量高。因此,枇杷枝屑代料可以栽培出品质更好的灵芝,能有效地提高灵芝的药用价值,这与张平等研究结果相一致[10]。
研究表明,枇杷枝屑代料栽培的灵芝重金属、农残含量均符合检测标准,均符合NY/T 749-2018《绿色食品 食用菌》中规定的食用菌重金属指标、农残含量要求,由此说明,枇杷枝屑代料栽培出的灵芝是安全、无毒的,枇杷枝屑作为灵芝的栽培原料是安全的。因此,枇杷枝屑是代料栽培灵芝的一种很好的原料,枇杷枝屑代料栽培灵芝不但生物学效率高而且品质好,保护了森林资源,具有推广价值[10]。