Ki-67、肿瘤坏死因子-α及糖类抗原125在非霍奇金淋巴瘤患者中的表达及临床意义

史瑞，温静，吴雯，雷小茹，宋艳萍

西安市中心医院血液内科，西安市血液病研究所，西安 710004

非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lymphoma，NHL）是原发于淋巴结与结外淋巴组织的恶性肿瘤，具有高度异质性[1]。早期对NHL做出正确诊断并进行积极治疗是提高患者预后的关键。以往研究显示，多种肿瘤标志物联合检测可提高对肿瘤患者的临床诊断价值，而肿瘤标志物水平的改变情况也可为预后评估提供参考[2]。肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、糖类抗原 125（carbohydrate antigen 125，CA125）是临床中广泛应用的血清肿瘤标志物，研究显示，TNF-α水平随NHL患者病情变化而发生动态改变，TNF-α高表达与NHL患者预后不良有关[3]。CA125是诊断卵巢上皮癌的常用标志物，以往有研究显示，NHL患者中CA125水平升高，尤其是伴有腹部浸润者，其CA125水平升高更明显[4]。细胞增殖是肿瘤发生、发展的基础，Ki-67属于细胞核抗原，仅在增殖细胞核中表达，是反映细胞增殖活性的有效指标[5]。基于此，本研究探讨Ki-67、TNF-α及CA125在NHL患者中的表达情况，分析三者联合检测在NHL诊断及治疗中的临床意义，以期为NHL的临床诊疗提供参考依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2016年5月至2021年5月西安市中心医院收治的NHL患者的病历资料。纳入标准：①经病理检查确诊为NHL；②临床资料完整；③入院后均接受手术、放化疗等相关治疗。排除标准：①合并其他恶性肿瘤；②入院前接受过放化疗等相关治疗；③合并心、肝、肾等器官严重疾病。依据纳入和排除标准，本研究共纳入85例NHL患者，作为NHL组。其中，男47例，女38例；年龄30～72岁，平均（46.58±5.95）岁；Ann Arbor分期[6]：Ⅰ～Ⅱ期56例，Ⅲ～Ⅳ期29例；NHL国际预后指数（international prognostic index，IPI）[6]：低危（IPI评分为 0～1分）52例，中高危（IPI评分为2～3分）33例。NHL组患者在入院后完善各种检查，给予环磷酰胺+多柔比星+长春新碱+泼尼松（CHOP）方案进行治疗，化疗2个周期后依据《血液病诊断及疗效标准》[7]将患者分为缓解组（完全缓解+部分缓解，n=49）和未缓解组（疾病稳定+疾病进展，n=36）。另选取西安市中心医院收治的淋巴结反应性增生患者37例，作为对照组。其中，男20例，女17例；年龄30～73岁，平均（46.74±5.87）岁。两组患者的性别、年龄比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经医院伦理委员会审批通过，所有患者均知情同意并签署知情同意书。

1.2 Ki-67、TNF-α及CA125检测方法

NHL组患者在确诊后空腹状态下抽取静脉血5 ml，对照组患者在检查当日空腹状态下抽取静脉血5 ml，均于离心后获取上清液用于TNF-α和CA125检测，并获取两组患者的病理组织标本用于Ki-67检测。采用酶联免疫吸附试验检测TNF-α水平，采用免疫化学发光法检测CA125水平。采用免疫组化染色法检测Ki-67水平，Ki-67定位于细胞核内，出现黄色或棕黄色颗粒为阳性，以标记指数（labeling index，LI）表示Ki-67水平：取组织芯片中200个肿瘤细胞，计算阳性细胞所占百分比。

1.3 观察指标

比较NHL组和对照组患者的Ki-67、TNF-α及CA125表达情况；比较不同临床特征NHL患者的Ki-67、TNF-α及CA125表达情况；比较缓解组和未缓解组患者的Ki-67、TNF-α及CA125表达情况；分析Ki-67、TNF-α、CA125单独及联合检测对NHL的诊断价值。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0软件对数据进行统计分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验；计数资料以例数和率（%）表示，组间比较采用χ2检验；采用Kappa一致性检验分析Ki-67、TNF-α、CA125单独及联合检测对NHL的诊断价值；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 NHL组和对照组患者Ki-67、TNF-α及CA125表达情况的比较

NHL组患者的Ki-67、TNF-α及CA125水平均明显高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.01）。（表 1）

表1 NHL组和对照组患者Ki-67、TNF-α及CA125表达情况的比较（x± s）

2.2 不同临床特征NHL患者Ki-67、TNF-α及CA125表达情况的比较

Ⅲ～Ⅳ期NHL患者的Ki-67、TNF-α及CA125水平均明显高于Ⅰ～Ⅱ期患者，差异均有统计学意义（t=12.907、10.065、17.179，P＜0.01）；中高危 NHL患者的Ki-67、TNF-α及CA125水平均明显高于低危患者，差异均有统计学意义（t=6.955、6.136、15.453，P＜0.01）。（表2）

表2 不同临床特征NHL患者的Ki-67、TNF-α及CA125表达情况

2.3 缓解组和未缓解组患者Ki-67、TNF-α及CA125表达情况的比较

治疗前，缓解组和未缓解组患者的Ki-67、TNF-α及CA125水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，缓解组患者的Ki-67、TNF-α及CA125水平均低于本组治疗前及未缓解组，差异均有统计学意义（P＜0.05）；治疗前后未缓解组患者的Ki-67、TNF-α及CA125水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。（表3）

表3 治疗前后缓解组和未缓解组患者Ki-67、TNF-α及CA125表达情况的比较（±s）

表3 治疗前后缓解组和未缓解组患者Ki-67、TNF-α及CA125表达情况的比较（±s）

注：a与本组治疗前比较，P＜0.05；b与未缓解组治疗后比较，P＜0.05

组别缓解组（n=49）未缓解组（n=36）时间治疗前治疗后治疗前治疗后Ki-67（%）31.29±7.11 18.62±5.46a b 30.61±7.55 29.86±7.84 TNF-α（pg/ml）38.16±10.55 21.64±10.13a b 39.52±10.34 36.71±10.16 CA125（U/ml）44.51±10.65 14.21±5.84a b 45.57±10.17 42.16±10.74

2.4 Ki-67、TNF-α、CA125单独及联合检测对NHL的诊断价值

Ki-67单独检测诊断NHL的灵敏度、特异度、准确度分别为 78.82%（67/85）、70.27%（26/37）、76.23%（93/122），TNF-α单独检测诊断NHL的灵敏度、特异度、准确度分别为81.18%（69/85）、81.08%（30/37）、81.15%（99/122），CA125单独检测诊断NHL的灵敏度、特异度、准确度分别为72.94%（62/85）、64.86%（24/37）、70.49%（86/122），三者联合检测诊断NHL的灵敏度、特异度、准确度分别为98.82%（84/85）、89.19%（33/37）、95.90%（117/122），其中三者联合检测的灵敏度、特异度、准确度均高于各指标单独检测（表 4）。Ki-67、TNF-α、CA125单独及联合检测诊断NHL与病理结果的Kappa值分别为0.531、0.604、0.481、0.788，其中三者联合检测与病理结果的一致性最好。

表4 Ki-67、TNF-α、CA125单独及联合检测诊断NHL的结果与病理结果的对照

3 讨论

临床中NHL的治疗以多学科联合的综合治疗为主，因此，早期准确地诊断NHL对患者治疗方式的选择及预后均具有重要意义。

Ki-67水平在细胞周期中的M期达到高峰，M期后Ki-67被迅速降解或丢失抗原决定簇，Ki-67单克隆抗体可标记G1后期、S期、G2期及M期细胞抗原，是评估肿瘤增殖性的常用指标，其阳性表达提示细胞正处于增殖旺盛状态[8]。研究显示，恶性程度高、预后不良、发生转移的恶性肿瘤患者中Ki-67均为高表达[9]。本研究结果显示，NHL组患者的Ki-67水平明显高于对照组，Ⅲ～Ⅳ期、中高危NHL患者的Ki-67水平分别明显高于Ⅰ～Ⅱ期、低危患者，说明Ki-67可客观反映NHL细胞的增殖情况，对NHL侵袭性的评估具有一定的参考价值，其表达升高意味着肿瘤细胞增殖旺盛，从而导致NHL的侵袭性增加。有研究指出，Ki-67是评估NHL患者预后的独立预测指标[10]。本研究中，治疗后未缓解组患者的Ki-67水平高于缓解组患者，提示Ki-67升高可能预示患者预后不良。

TNF-α是单核-巨噬细胞被激活后分泌的一种细胞因子。研究证实，TNF-α对肿瘤的作用具有双向性，可杀伤肿瘤细胞，也可促进肿瘤细胞增殖、浸润[11-12]。有研究显示，NHL患者血液中的TNF-α水平随着病情进展而发生改变，TNF-α水平高的患者预后不良的概率较高[13]。本研究结果显示，NHL组患者的TNF-α水平明显高于对照组，Ⅲ～Ⅳ期、中高危NHL患者的TNF-α水平分别明显高于Ⅰ～Ⅱ期、低危患者，说明TNF-α水平升高可能与NHL患者的临床分期、侵袭性有关。本研究中，治疗后未缓解组患者的TNF-α水平高于缓解组患者，说明TNF-α可有效反映患者的治疗效果，在临床中可作为监测治疗效果的辅助指标。

CA125在临床中多用于卵巢癌、宫颈癌等恶性肿瘤的诊断，在肿瘤治疗效果及预后评估中均具有一定的应用价值。有研究显示，NHL患者的CA125水平明显升高，治疗后完全缓解时CA125水平降低，复发患者中CA125水平又呈上升趋势，因此认为CA125与NHL的发生、发展有关[14]。也有研究发现，NHL患者中CA125水平升高与疾病进展有关，存在巨大包块、肿瘤负荷大、有胸腔积液的患者CA125水平升高更明显[15]。本研究结果与上述结果一致，NHL患者中CA125水平升高，且与患者的临床分期、侵袭性有关，同时其水平升高预示患者预后不良。目前有关Ki-67、TNF-α、CA125联合检测对NHL诊断价值的研究较少，本研究发现，Ki-67、TNF-α、CA125联合检测诊断NHL的灵敏度、特异度及准确度均高于各指标单独检测，且与病理结果的一致性较好，说明联合检测对NHL的诊断价值更高，可为临床诊断提供更全面的参考信息。

综上所述，Ki-67、TNF-α及CA125水平与NHL患者的临床分期、肿瘤侵袭性及预后密切相关，三者联合检测对NHL的早期诊断及临床治疗具有重要的指导意义。