浅谈猪场检测实验室的风险管理

文│高云飞 钟万金 周先建 周勇岐［兆丰华生物科技（南京）有限公司］

2006年6月，国务院国有资产监督管理委员会发布了《中央企业全面风险管理指引》的通知，风险管理被正式引入企业的日常管理中。

2018年8月，我国暴发非洲猪瘟疫情，根据2020年8月农业农村部办公厅《非洲猪瘟常态化防控技术指南（试行版）》的要求，猪场纷纷组建各自的实验室，开展非洲猪瘟病原检测（qPCR）和抗体检测项目。随着猪场检测室陆续投入使用，实验室风险管理的重要性逐渐显露，尤其是实验室的生物安全管理，生物安全管理是风险管理的重要环节，随着新版《中华人民共和国生物安全法》的颁布和实施，对实验室的生物安全管理要求更加严格。

风险管理的基本流程是：收集风险源初始信息，进行风险评估；制定风险管理策略；提出和实施风险管理解决方案；风险管理的监督与改进。

风险源自危害，由危害发生的可能性及可能产生的影响两部分组成。笔者通过对实验室资源、实验检测过程以及对实验室的管理工作进行分析，提出了进行实验室风险管理的具体办法。保证实验室检测工作正常运行，风险管理是动态的过程，风险随着社会进步、技术进步、人类发展的进程呈现不断变化。风险管理贯穿于实验室工作的全过程，随着检测方法的更新、检测技术的不断进步，相关法规的变化，以及关于检测技术的持续改进，风险管理体系应定期维护、不断更新。

一、风险的识别及评估

1.法律法规风险。根据法律法规变化的内容及时调整检测方案及内容，确认检测方法，避免因检测方法等调整而产生不适用的结果。

2.资源风险。资源是实验室运行过程中必须具备的基本条件，以下从人员、实验室环境、内部设计、环境、仪器设备、检测试剂盒等几方面分析了风险的来源。

（1）人员风险。由专职人员负责生物安全、消毒等日常工作，若落实不到位、结果不确实，则不能保证检测环境正常。实验室应具有相应的专职检测技术人员，检测过程防止交叉污染，否则可导致结果异常。检测人员应具有兽医、生物或者相关专业的学习背景。

专业知识不对口可能会导致无法正确理解专业知识，不能正确处理遇到的各种情况。要定期开展检测工作培训和生物安全培训，若长期不接受新知识和技能培训会导致知识不全面，工作出现异常情况不能及时处理。人员应具备良好的职业操守、责任意识和生物安全防范意识，能够严格遵守实验室各项规章制度。工作人员一旦疏忽大意会直接影响监测结果，可能导致实验室污染，检测结果不可信。外来人员严禁随意进出，如进入实验室须有负责人陪同并进行必要的消毒处理，防止外源性污染。

（2）实验室设计风险。实验室设计应符合相关的国家标准，具体内容为：净高不低于2.6米，实验室应有专用的通风系统，若通风异常，易导致灰尘聚集。门口处设换衣装置，防止实验室交叉污染；实验室地面应采用无缝的防滑、耐腐蚀材料铺设，防止地面不易清理，卫生不易清洁；踢脚板与墙面齐平，并与地面为一整体，易于清洁消毒，方便清洁卫生；墙面、顶棚的材料应光滑防水，易于清洗消毒、耐消毒剂的侵蚀、耐擦洗、不起尘、不开裂，方便卫生的清洁；设置防蚊虫纱窗，防止外界的感染。

（3）设施与环境风险。实验台应牢固，适合工作需要且便于操作和清洁；台面应防水、耐腐蚀，保证实验正常开展。实验室应安装空调设备，能够控制温湿度，避免实验室温度异常，超出实验条件，导致检测结果异常。实验室内应保证适当亮度的工作照明，避免反光和强光，能够正确观察相关结果。

（4）仪器设备风险。根据实验室检测的具体内容，配置不同的检测设备。

病原学检测：微量移液器（不同规格）、冰箱、离心机（适合2毫升离心管，转速12000转）、微型离心机（用于PCR管离心）、水浴锅、组织匀浆机、荧光PCR仪、生物安全柜、核酸提取仪（选配）、高压灭菌器、旋涡振荡器等。使用前应核查所使用的仪器设备是否校准，pcr（聚合酶链式反应）仪定期使用内参品进行性能测试，生物安全柜，高压灭菌器，离心机能否达到说明书的要求，设备定期进行核查，灭菌设备定期使用生物指示剂进行消毒效果确认，仪器使用后及时填写使用记录，定期维护。

血清学检测：单道微量移液器（不同规格）、多道微量移液器、冰箱、温箱、离心机（可使用2毫升离心管，转速3000转）、酶标仪、洗板机（备选）、高压灭菌器、微量振荡器等。酶标仪的工作状态，厂家提供的阴性、阳性样品是否成立。

（5）检测试剂盒使用中的风险。检测试剂盒来源于正规生产厂家，灵敏度是否符合要求，质控品应符合要求，检测试剂盒能否达到使用要求，最低检出限是否符合检测要求。

3.检测过程风险。指实验操作过程中，由于操作不符合操作规程或者操作规程执行不到位，可能导致产生的各种危害。

（1）样品处理。样品处理未按规定，导致样品污染；或者检测无结果；是否在指定场所；是否能防止交叉污染。

（2）核酸提取。手动提取时防止交叉污染；确定是否在指定场所；自动提取仪工作状况可能导致交叉污染。

（3）PCR扩增。要防止交叉污染，要严防扩增产物泄露；加样过程严禁外溢，如有发生及时清理；指定工作场所，防止跨区域操作。

（4）ELSIA抗体检测。严格执行生产厂家提供的检测方法，样品稀释时使用样品稀释液，不得使用其他液体，加样后按规定时间孵育，不得擅自改变时间，洗版时每版洗涤5次，不得增加或随意减少，加中止液后，及时读数。完成检测后认真清理，所用之物应及时进行无害化处理。

（5）原始记录填写。及时填写记录，按规定更改，完成的记录及时归档。

（6）报告。根据原始记录及时完成报告，建立报告编号，发放时填写报告发放记录。

4.管理风险。指实验室在正常的运行中，由于管理原因导致的风险，主要表现在卫生管理、生物安全管理、人员进出管理以及法律法规的变化引起的风险因子。

（1）卫生管理风险。日常卫生清洁要按照实验室制定的相关程序严格进行，注意清理用具要专门使用，不可用一件清理工具清理所有房间，以防交叉污染。

（2）生物安全管理风险。严格按照生物安全的要求在指定场所和符合要求的设备内进行，明确人流方向、物流方向，人、物切勿随意流动。

实验室全面消毒管理与日常消毒管理结合，一旦检出阳性阳样品，应及时报告负责人，对样品进行专人、专门设施进行管理，完成实验后严格消毒。若检测样品中无阳性样品，可按常规清理方式进行，检验后的样品及时处理。实验室的废弃物处理前应密闭，阳性产物、内参品、扩增产物不得随意开盖、直接丢弃，扩增产物的处理应按废弃物处理的有关规定严格执行。

5.自检风险。定期对进行上述资源进行检查，并对检测过程进行监督，避免因管理原因而导致的实验室无法开展正常工作。

二、风险控制

1.技术性方法。包括排除、替换、降低、隔离、程序控制、保护、纪律申戒等7种控制方法。对上述风险源，通过强化制度建设，建立标准操作规程，完善仪器设备管理，加强实验室生物安全管理操作，制定应急预案等措施，编制相关编制记录并及时填写，加强对实验室的监督检查。

2.建立管理制度包含的内容。包括人员管理制度，实验室安全防火管理制度，实验室工作人员安全管理制度，检验用仪器设备管理制度、维修保养制度，文件管理制度，检验测试结果复核管理制度，PCR实验室日常管理规范、PCR实验室生物安全管理规定，清场管理制度等。

3.标准操作规程包含的内容。各实验室应建立符合各自要求的标准操作规程，笔者在实验室走访过程中，发现许多实验室都根据厂家提供的操作说明进行操作，每个实验室，各不相同。应该有针对性的编制对操作说明调整，以符合实际要求。示例如下：PCR实验室标准操作规程，全自动核酸提取纯化仪的标准操作规程（备选），移液器使用标准操作规程，采样及储存的标准操作规程。

根据标准操作规程编写记录，及时填写记录，方便溯源管理，及时发现问题。

三、总结与展望

麻雀虽小，五脏俱全。实验室无论大小，都需要配备必需的资源，这是实验室正常运行的根本保障。在此基础上，进行检测过程，过程中对标准操作规程的执行是实验室运行的必要保障，实验室同时还要进行生物安全，实验室安全的管理，再通过定期进行自检不断总结之前的工作，提出下步工作的整改办法，以实现质量管理工作中的持续改进和提高，为保障正常猪场的生产提供有效的技术保障。