慢性鼻窦炎伴鼻息肉术后复发的影响因素及外周血嗜酸性粒细胞联合CD4+/ CD8+的诊断价值研究

王 玲 陆英英

江苏省无锡市人民医院耳鼻咽喉科，江苏无锡 214000

慢性鼻窦炎伴鼻息肉为耳鼻喉科多发性疾病，具有发病机制复杂、易于复发等特点[1]。临床治疗以经鼻内镜手术联合持续性药物为主，但仍存在较高的术后复发率[2]。慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者鼻黏膜和鼻息肉中嗜酸性粒细胞（eosinophil，EOS）浸润程度升高，高达40%的慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者的EOS 含量升高[3-4]。免疫应答缺陷是慢性鼻窦炎伴鼻息肉发病的高危因素，T 细胞在本病的发生中发挥重要调节作用[5]。刘骥等[6]证实鼻窦炎患者机体免疫失衡，CD4+/CD8+升高的患者术后疗效优于该指标降低的患者。EOS、CD4+/CD8+与慢性鼻窦炎伴鼻息肉的发生发展有关，但关于二者在慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者鼻内镜手术术后复发中作用的研究鲜见，本研究主要探讨本病术后复发的影响因素及外周血EOS 联合CD4+/CD8+检测诊断慢性鼻窦炎伴鼻息肉手术预后复发的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018 年1 月至2020 年3 月江苏省无锡市人民医院收治的142 例慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者作为研究对象，其中男114 例，女28 例；年龄11～78 岁，平均（50.36±8.96）岁。本研究获得江苏省无锡市人民医院伦理委员会批准。

纳入标准：①符合慢性鼻窦炎伴鼻息肉临床诊断标准[7]；②经CT 确诊；③接受鼻内镜手术治疗；④手术由同一组外科医师执行；⑤患者签署该项研究的知情同意书。

排除标准：①息肉位于后鼻孔；②霉菌性鼻窦炎；③鼻窦炎伴囊肿；④严重心、肾等脏器功能障碍或衰竭；⑤合并恶性肿瘤、鼻咽部肿瘤；⑥临床资料有缺失。

1.2 研究方法

1.2.1 手术治疗 患者均行全身麻醉，羟甲唑啉棉片收敛鼻腔黏膜。采用鼻窦内窥镜及手术动力系统进行手术，清除鼻腔和鼻窦不可逆病变，保留可逆性病变，避免损伤正常黏膜。术后，冲洗鼻腔，高膨胀海绵填塞止血，及时复查。

1.2.2 临床资料收集 主要包括性别、年龄、吸烟史（吸烟定义为平均每月吸烟＞5 支）、饮酒史（饮酒定义为平均每年饮酒次数＞3 次）、临床分型[8]、Lund-Kennedy 评分[9]、血小板计数、白细胞计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、中性粒细胞与淋巴细胞比值（neutrophil to lymphocyte ratio，NLR）。

1.2.3 外周血EOS 检测 患者入院后，于次日清晨采集患者空腹静脉血约4 ml，置于EDTA 抗凝采血管中备用。取2 ml 血液样本，采用日本Sysmex 公司Sysmex XE-2100 型全自动血液细胞分析仪检测外周血EOS 百分比。

1.2.4 CD4+/CD8+检测 取2 ml 血液样本，加入等体积磷酸盐缓冲液稀释，加入北京索莱宝公司的淋巴细胞分离液（批号：20190314），500 r/min，离心半径为10 cm，离心15 min，弃上清，保留沉淀，磷酸盐缓冲液洗涤沉淀2 次。取100 μl 悬液，加入20 μl 美国BD 公司的FITC-CD4、PE-Cy5-CD8 抗体（批号：20181216、20190123），避光孵育1 h，500 r/min，离心半径为10 cm，离心15 min，去上清，磷酸盐缓冲液重悬沉淀，使用Attune NxT 型流式细胞仪（美国Thermo 公司产品）进行检测，获得CD4+、CD8+T 细胞百分含量及CD4+/CD8+。

1.2.5 复发诊断及分组 术后1 年内，若患者再次出现鼻塞不通气，流黄脓鼻涕，或清水样鼻涕，头痛，嗅觉减退等症状，局部检查显示鼻道中有息肉，鼻腔中有大量的脓性鼻涕可诊断为慢性鼻窦炎伴鼻息肉复发[7]。根据慢性鼻窦炎伴鼻息肉复发情况，将患者分为复发组（84 例）和未复发组（58 例）。

1.3 统计学方法

采用SPSS 22.0 对所得数据进行统计学分析，计量资料采用均数±标准差（）表示，组间比较采用t检验，计数资料采用百分率表示，组间比较采用χ2检验。采用logistic 回归分析影响因素，受试者操作特征（receiver operator characteristic，ROC）曲线及曲线下面积（area under the curve，AUC）分析诊断价值，AUC 比较采用秩和检验。以P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组临床资料比较

复发组Lund-Kennedy 评分、中性粒细胞计数、NLR、外周血EOS 百分比高于未复发组，CD4+/CD8+低于未复发组，差异有统计学意义（P ＜0.05）。见表1。

表1 两组临床资料比较

2.2 慢性鼻窦炎伴鼻息肉术后复发的影响因素分析

以术后复发情况为因变量（未复发=0，复发=1），将单因素分析中差异有统计学意义的因素作为自变量（均为连续变量）纳入多因素分析，结果显示高NLR、高外周血EOS 百分比是慢性鼻窦炎伴鼻息肉术后复发的独立危险因素（OR ＞1，P ＜0.05），高CD4+/CD8+是术后复发的保护因素（OR ＜1，P ＜0.05）。见表2。

表2 慢性鼻窦炎伴鼻息肉术后复发的影响因素分析

2.3 外周血EOS 百分比联合CD4+/CD8+对慢性鼻窦炎伴鼻息肉术后复发的诊断价值

外周血EOS 百分比、CD4+/CD8+及二者联合对慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者术后复发均有诊断价值（AUC ＞0.5，P ＜0.05），二者联合诊断的AUC 大于单独诊断（Z=3.704、4.141，P ＜0.05）。见表3、图1。

图1 外周血嗜酸性粒细胞联合CD4+/CD8+诊断慢性鼻窦炎伴鼻息肉术后复发的受试者工作特征曲线

表3 外周血EOS 百分比联合CD4+/CD8+对慢性鼻窦炎伴鼻息肉术后复发的诊断价值

3 讨论

慢性鼻窦炎伴鼻息肉是一种慢性上呼吸道炎症性疾病，与慢性鼻窦炎不伴鼻息肉比较，其具有明显的免疫学和组织病理学特征[10]。尽管采取药物联合根治性鼻内镜手术治疗后，许多患者病情得到有效控制，但术后仍有较高的复发率[11-13]。

慢性鼻窦炎伴鼻息肉属于2 型炎症反应相关疾病，在2 型炎症反应中，EOS 从骨髓和血液中转移到炎症部位，组织EOS 增多，浸润程度增加，EOS 的过度积累和激活导致组织损伤[14-15]。CD4+T 细胞主要通过刺激B 细胞产生抗体，参与体液免疫应答。CD8+T 细胞能够抑制T 细胞增殖和B 细胞抗体的产生，参与细胞免疫应答。CD4+/CD8+同时引入两个指标，能敏感地反映机体免疫水平变化[16]。Ickrath 等[17]研究发现，鼻息肉中CD8+T 细胞含量升高。本研究结果显示，复发组外周血EOS 百分比高于未复发组，CD4+/CD8+低于复发组，提示外周血EOS 百分比、CD4+/CD8+可能是慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者术后复发的影响因素。对可能影响慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者鼻内镜手术术后复发的因素进行多因素分析，结果显示高NLR、高外周血EOS百分比是术后复发的独立危险因素，高CD4+/CD8+是术后复发的保护因素。NLR 在炎症性疾病的诊断和预后判断中具有较高的价值，当机体出现局部或全身性慢性炎症反应时外周血NLR 随之升高，免疫与炎症反应间的平衡发生移动[18-19]。本研究提示，复发组外周血中性粒细胞计数升高、淋巴细胞计数无显著变化，NLR升高，与谢书华等[20]研究结果一致。中性粒细胞能够产生活性氧，在受损组织中累积，破坏上皮屏障，使之受到各类病原体的入侵，造成反复性感染[21]。金黄色葡萄球菌等病原体刺激鼻黏膜，产生包括EOS 在内的活性物质，诱发慢性鼻窦炎伴鼻息肉[22-23]。CD4+/CD8+代表淋巴细胞亚群之间的功能平衡状态，该指标降低提示机体免疫水平降低，机体易受到外界病原微生物干扰，不利于患者术后恢复[24-25]。本研究提示，外周血EOS 百分比联合CD4+/CD8+诊断术后复发的AUC 大于二者单独诊断，提示检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者外周血EOS 百分比、CD4+/CD8 有利于患者术后复发的评估。

综上所述，外周血EOS 百分比、CD4+/CD8+是诊断慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者术后复发的敏感指标，对鼻内镜手术术后慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者行外周血EOS 百分比、CD4+/CD8+检查，有利于尽早采取对应措施进行干预和治疗。