柞蚕微孢子虫胚种传染率的分析

徐欣　朱绪伟　刘中文　周其明　张耀亭　张永君

柞蚕微粒子病是柞蚕生产上的重要病害，由柞蚕种生产中的唯一检疫对象柞蚕微孢子虫诱发，并能够经卵垂直传播影响种茧生产，威胁种质资源的保育及生产的安全。寄生柞蚕的微孢子虫到目前为止共发现 5 种，包括柞蚕微粒子虫（Nosema pernyi Wen et Ding）、修氏内网虫（Endoreticlatus schubergi）、 链孢变形孢虫（Vairimorpha chainsporum Wen et Ding）、訥卡变形孢虫（Vairimorpha necatrix）和柞蚕微孢子虫新种（Nosema sp.），其中，柞蚕微孢子虫是优势种。柞蚕微孢子虫的传播方式有水平传播与垂直传播，其中，垂直传播即胚种传染，是主要传染途径，也是造成检测及防治难度较大的原因。因此，本试验初步研究柞蚕微孢子虫的垂直传播过程，调查河南省主要柞蚕品种的胚种传染率，为探究柞蚕微孢子虫侵染相关的机制奠定基础，也为寻找控制水平传播和阻断垂直传播的综合治理方法提供帮助。

一、材料与方法

（一）供试柞蚕品种

试验中选取河南省柞蚕育种研究室镜检后携带微孢子虫的母蛾，母蛾已经完成交配，在产卵袋中单独产卵、保存，供试的母蛾品种为豫大1号、镇玉、181、182、101及三三共6个品种，带毒母蛾均随机挑选。

（二）试验方法

母蛾产卵后，在气温25 ℃、湿度80%条件下进行催青处理，2%的甲醛溶液进行卵面消毒，待出蚁前1天将单个蚕卵放置到直径5 cm、高度4 cm的圆柱形塑料带盖小盒（自行设计，食品级塑料，塑料盒四周和盖上有数个透气小圆孔）中，每个柞蚕品种随机选取10头母蛾，每头母蛾随机选取50粒蚕卵，进行单蚕饲养。

在饲养过程中，从孵化出蚁到3龄48 h，每隔1～2 d更换小盒内的柞树叶并除沙，保证小盒内的饲养环境，记录每头柞蚕的生长状况及得病、死亡情况。并于3龄48 h将所有柞蚕幼虫进行镜检，调查微孢子虫的携带情况并记录。

（三）数据处理

试验数据采用SAS 9.0数据分析软件对试验结果中的胚种传染率进行统计学分析。

二、结果与分析

（一）豫大1号品种带毒母蛾胚种传染率调查

表1中展示了柞蚕品种豫大1号品种10头带毒母蛾随机选取50个卵进行单蚕饲养的简单生长状况，幼虫从收蚁到2龄眠的过程中大多能够适应较密闭的盒内饲养环境。由于柞蚕的放养天性，龄数越大越需要更多的生长与活动空间，而室内饲养条件不能够满足其需要，到3龄起蚕后长势逐渐减弱，运动性和进食量大大降低，死亡数量增加过快。为不使细菌病等其他病害影响实验结果，故选择在3龄48 h将所有幼虫进行腹部血液镜检，将镜检带毒头数与当前活头数之比值作为1头带毒母蛾的胚种传染率，结果如图1所示。经过统计，胚种传染率试验中随机调查了柞蚕品种豫大1号10头带毒母蛾的胚种传染率，最低为11.76%，最高为85.71%;胚种传染率低于30%的为2头，30%～70%的为6头，高于70%的为2头。柞蚕微孢子虫的胚种传染率较高，同时个体差异较大，带毒率高的胚种传染率也高，孢子的数量是决定胚种传染率的重要因素。

各品种中调查的10个带毒母蛾差异情况基本相似，因此没有一一列出各品种的调查数据。

（二）6个柞蚕品种的胚种传染率对比

本试验共调查了豫大1号、镇玉、181、182、101及三三共6个河南省柞蚕繁育主要品种，表2至表6展示了除豫大1号品种外剩余5个品种的单蚕饲养的生长状况，整体的生长情况和豫大1号品种相似。从图2各品种的平均胚种传染率统计结果中可以看出，几个品种的传染率均在50%～75%。虽然由于个体差异大导致数据平均偏差较大，但从平均值上看，仍然能说明豫大1号品种的柞蚕微孢子虫胚种传染率较低，其抗微粒子病能力较强;其次是镇玉品种，其他几个品种的抗性较弱，传染率在70%以上。

三、讨论

试验过程中发现柞蚕微孢子虫的胚种传染率个体差异较大，与母蛾带毒情况有关呈正相关，结合孢子的侵染机制，说明孢子数量是决定胚种传染率的重要因素，为今后探究柞蚕微孢子虫胚种传播具体方式提供帮助。试验调查的6个柞蚕品种中发现豫大1号品种的抗微粒子病能力较其他5个供试品种强，在今后柞蚕生产与推广上，尤其在微粒子病高发地区，应结合柞蚕生产基地的具体条件与当年天气状况，建议优先推广豫大1号品种。

资助项目：河南省重点研发与推广专项（科技攻关）项目（编号 192102110149）。