雌激素受体、孕激素受体在子宫内膜癌中的表达及与临床特征和预后的关系

侯俊芳，唐静，张海霞

开封市人民医院妇产科，河南 开封 475000

子宫内膜癌（endometrial carcinoma，EC）是女性中常见的生殖系统恶性肿瘤之一，最常见的病理类型为内膜样腺癌，约70%以上病例发生于绝经后的老年女性，常见临床表现为绝经后阴道出血，然而近年来EC发病呈年轻化及上升趋势。手术是目前治疗EC的主要方式之一，早期发现并及时治疗可以使患者获得较好的预后。EC分为激素依赖性和非激素依赖性，其发病与原癌基因及抑癌基因的异常表达、凋亡蛋白被抑制等有关，其中雌激素受体（estrogen receptor，ER）、孕激素受体（progesterone receptor，PR）的表达在EC的发生发展、预后评价中起到较重要的作用。本研究通过回顾性分析，探讨EC组织中ER、PR的表达与临床特征及预后的关系，旨在为临床EC的早期诊断和治疗提供参考依据，提高患者的生存时间并改善患者的预后，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2015年6月至2019年6月开封市人民医院收治的EC患者的病历资料。纳入标准：①符合《子宫内膜癌诊断与治疗指南（第四版）》诊断标准；②年龄40～70岁；③行子宫全切术；④初次接受手术；⑤术前未行放化疗、生物免疫治疗等抗癌治疗；⑥临床及随访资料完整。排除标准：①有其他恶性肿瘤；②有严重的心、脑、肝、肾或其他疾病；③随访失访。根据纳入、排除标准，共纳入100例EC患者，选取100例EC患者的手术后石蜡包埋EC组织标本。另取同期100例因子宫肌瘤、子宫内膜息肉、子宫肥大症、子宫腺肌病行子宫全切术患者的子宫内膜组织标本作为对照。

1.2 研究方法

1.2.1 免疫组化法检测ER及PR 术后切除的病理标本经石蜡包埋处理，连续切片，厚度约4 μm，在室温下放置1 h，然后在二甲苯中浸泡10 min，接着在95%乙醇中浸泡2次，每次5 min，再在80%乙醇中浸泡3 min，以完成切片脱蜡及水化；利用高压进行2 min抗原热修复，pH值为6.0；每张切片上分别加入3%过氧化氢50 μl，室温下孵育10 min，用磷酸盐缓冲液（phosphate buffered solution，PBS）冲洗3次，每次3 min，之后将PBS清除干净；每张切片上分别加入一抗50 μl，在4℃的环境下过夜；用PBS冲洗3次，每次3 min，后在每张切片上加入MaxVisionTM2/HRP试剂，室温下孵育30 min；用PBS冲洗3次，每次3 min，后在每张切片上加入100 μl配置后的二氨基联苯胺（diaminobenzidine，DAB）显色液滴，3～5 min后在显微镜下观察；用自来水冲洗终止显色；用苏木精、PBS分别复染、冲洗、返蓝；采用梯度酒精脱水干燥，最后固封、镜检。全部操作完成后对染色图像进行采集，在染色相对满意的切片中选取10个高倍镜视野清晰区域进行结果判定，均以PBS代替一抗作为空白对照。结果判定：细胞核呈棕黄色而细胞质不着色为阳性细胞。每个区域计数100个肿瘤细胞中的阳性细胞数，其中阳性细胞＜10%为阴性，反之为阳性。

1.2.2 临床特征收集及随访 收集入组患者病历资料，逐一核实原始记录，经由专人统计整理：患者年龄、绝经情况、EC家族史、病理组织学分类、生物学特征分型、肌肉浸润程度、国际妇产科联盟（International Federation of Gynecology and Obstetrics，FIGO）分期、组织学分级、淋巴结转移信息。入组患者实施为期1年的随访（截至2020年6月31日），每2个月门诊复查1次，行MRI检查并按规定填写随访记录登记表，随访期间死亡患者5例。

1.3 统计学方法

所有数据均录入Excel表格，采用SPSS 17.0统计学软件进行处理，计数资料以例数及率（%）表示，组间比较采用

χ

检验；相关性分析采用Spearman相关性分析；采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线，检验结果采用对数秩；以

P

＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 ER、PR 表达情况的比较

EC组织中ER、PR及双阳性表达率均明显低于子宫内膜组织，差异均有统计学意义（

P

＜0.01）。（表1）

表1 EC和子宫内膜组织中ER、PR表达情况的比较[n（%）]

2.2 不同临床特征EC患者的EC组织中ER、PR表达情况的比较

不同年龄、是否绝经、是否有EC家族史、病理组织学分类、生物学特征分型EC患者的EC组织中ER、PR及双阳性表达情况比较，差异均无统计学意义（

P

＞0.05）；不同肌肉浸润程度、FIGO分期、组织学分级及是否有淋巴结转移EC患者的EC组织中ER、PR及双阳性表达情况比较，差异均有统计学意义（

P

＜0.05）。（表2）

表2 不同临床特征EC患者的EC组织中ER、PR表达情况的比较（n=100）

2.3 ER、PR 表达与临床特征的相关性分析

ER、PR及双阳性表达均与EC患者肌肉浸润程度、FIGO分期、组织学分级、淋巴结转移呈负相关（

P

＜0.05）。（表3）

表3 ER、PR表达与EC患者临床特征的相关性分析

2.4 ER、PR表达与预后的关系

100例EC患者随访1年期间死亡7例（7.00%）。ER阳性表达45例，死亡2例（4.44%），ER阴性表达55例，死亡5例（9.09%），ER阳性表达与阴性表达患者的生存情况比较，差异无统计学意义（

χ

=0.797，

P

=0.372）（图1）。PR阳性表达47例，死亡2例（4.26%），PR阴性表达53例，死亡5例（9.43%），PR阳性表达与阴性表达患者的生存情况比较，差异无统计学意义（

χ

=0.968，

P

=0.325）（图2）。ER、PR双阳性表达42例，死亡2例（4.76%），双阴性表达51例，死亡5例（9.80%），ER、PR双阳性表达与双阴性表达患者的生存情况比较，差异无统计学意义（

χ

=0.786，

P

=0.375）（图3）。

图1 ER阳性表达（n=45）与阴性表达（n=55）EC患者的生存曲线

图2 PR阳性表达（n=47）与阴性表达（n=53）EC患者的生存曲线

图3 ER、PR双阳性表达（n=42）与双阴性表达（n=51）EC患者的生存曲线

3 讨论

EC是危害女性健康的三大常见恶性肿瘤之一，主要发生于子宫内膜腺体，以腺癌最常见。EC好发于绝经后老年女性当中，恶性程度较高，由于早期症状不足以引起重视，超2/3的患者就诊时已到了晚期，预后较差。然而目前国内外对EC的发病机制尚未完全清楚。有研究发现其发生发展与原癌基因的异常激活、抑癌基因的异常失活、ER及PR等标志蛋白的过度表达等有一定的关系，还有研究表明EC中的ER、PR等免疫组化因子与不同的病理特征存在一定的关联。因此将有助于判断EC严重程度、治疗方案制订的分子标志物寻找出来，并探索其中的关系有很重要的临床意义。

本研究发现EC组织中ER、PR及双阳性表达率均明显低于子宫内膜组织，这一结果与代艳芬等、Yu等研究有一定相似性，说明ER、PR的阳性表达越低，子宫内膜组织越易癌变，分析原因可能是当细胞发生癌变时，受体的产生受到损伤，当肿瘤细胞恶性达到一定程度时，就会彻底丧失ER、PR，使ER、PR的阳性表达大大减少。本研究中，ER、PR及双阳性表达与EC患者肌肉浸润程度、FIGO分期、组织学分级、淋巴结转移均呈负相关，而与年龄、绝经情况、EC家族史、病理组织学分类和生物学特征分型无关，这一结果与王晨和孔为民、娄雪玲等研究有一定相似性，这说明ER、PR及双阳性表达越低，肿瘤恶性程度风险越高。这对EC的治疗也有一定的提示意义，ER、PR及双阳性表达低，肿瘤恶性程度高，术后需进一步行放化疗；ER、PR及双阳性表达高，肿瘤恶性程度低，可考虑术后辅助内分泌治疗即可。本研究还发现了EC患者预后和ER、PR及双阳性表达均无明显关系，这一研究与周慧玲等、Athanassiadou等研究存在一定差异，后两者的研究表明ER、PR阳性表达越高，EC患者的预后越好。分析原因可能是本研究纳入例数较少或是随访时间较短，也可能是研究中EC患者的病情较单一，不具备完全充分性，同时本研究仅使用免疫组化法对患者进行筛查，也存在部分检查结果假阳性的情况。

综上所述，EC组织中ER、PR的表达与肌肉浸润程度、FIGO分期、组织学分级、淋巴结转移存在一定关系，这提示ER、PR等分子的检测对制订合理的EC治疗方案、判断疾病严重程度有一定的临床意义。ER、PR的表达也可能与预后存在一定的关系，还需更多的临床研究和数据加以探索证实。