2019-2020年重庆淋球菌耐药监测七种药物分析

王希 幸为斌 贺淑丹 李红林

摘要：目的 对2019-2020年我院皮肤科分离的淋球菌进行七种药物的耐药性监测分析。方法 选取2019-2020年于我院皮肤科性病门诊就诊的119例患者为研究对象，从患者泌尿生殖道分泌物中分离收集淋球菌，所有菌株经分离培养、纯化和鉴定后传代于脱脂牛奶中，并置于液氮低温保存备用。使用微量肉汤稀释法测定各菌株对青霉素、四环素、环丙沙星、大观霉素、头孢曲松、阿奇霉素和头孢克肟的最小抑菌浓度（MIC）和敏感性，使用纸片酸度法测定菌株是否产β-内酰胺酶（PPNG）。结果 青霉素、环丙沙星、大观霉素、头孢曲松、阿奇霉素和头孢克肟的耐药率分别为69.75%、100.00%、0.00%、0.00%、15.97%、0.00%，PPNG阳性菌占60.50%，TRNG阳性菌占40.34%。结论 重庆市淋球菌对大观霉素、头孢曲松和头孢克肟耐药性为0%，可推荐为本地区临床治疗的一线药物使用。

关键词：淋球菌;MIC;PPNG;TRNG;耐药性监测

淋球菌是一种严格的人体寄生菌，据世界卫生组织报告显示[1]，是引起全球性性传染疾病第二位的淋病的病原体。随着抗菌药物的广泛应用，淋球菌的耐药目前已经是一个严重的公共卫生问题，影响了全球淋病的管理和控制。淋球菌耐药的持续监测不仅对临床用药有指导性意义，且能掌握目前流行菌株的耐药情况，及时发现多重耐药菌并有效控制其传播。

1.材料与方法

1.1材料

1.1一般资料

选取2019-2020年于我院皮肤科性病门诊就诊的119例患者为研究对象，其中，男性患者113例，女性患者6例，患者平均年龄35.43岁。

1.2研究方法

从患者泌尿生殖道分泌物中分离收集淋球菌119株，所有菌株经分离培养、纯化和鉴定后传代于脱脂牛奶中，并置于液氮罐内保存备用。使用改良后微量肉汤稀释法[2]（相应试剂于珠海金标医学检验公司购买）测定各菌株对青霉素、四环素、环丙沙星、大观霉素、头孢曲松、阿奇霉素和头孢克肟的最小抑菌浓度和敏感性，使用纸片酸度法测定菌株是否产β-内酰胺酶。

1.2.1微量肉汤稀释法

挑取纯培养单个菌落于稀释液瓶中研磨，将菌悬液浓度调至0.5麦氏单位。按照试剂说明书进行相应加样到淋球菌MIC检测板中，盖上盖盖子后，置于二氧化碳培养箱35-37℃孵育20-24h后进行判读。每批次实验均采用淋球菌耐药检测WHO西太区规划标准。

1.3质控菌株

WHO G、WHO K、WHO L、WHO P、WHO V、WHO X株6株标准淋球菌菌株由中国医学科学院皮肤病研究所检测实验室性病参比实验室提供。

2.结果

2.1 PPNG及TRNG结果

2019年69株淋球菌中检出PPNG阳性菌株42株，阳性率为61%，检出TRNG阳性株有23株，阳性率为33%。2020年50株淋球菌中检出PPNG阳性菌株为30株，阳性率为60%，检出TRNG阳性株有25株，阳性率为50%。

2.2 MIC结果分布

7种抗生素对119株淋球菌的MIC分布结果，其中，青霉素和环丙沙星MIC高于1 mg/L时记为耐药耐药率分别为69.75%、100%;四环素MIC浓度高于16 mg/L时记为高度耐药（TRNG）;大观霉素MIC浓度低于32 mg/L时记为药物敏感，介于31-128 mg/L之间时记为中敏，高于128 mg/L时记为耐药，发现中敏菌株一株;头孢曲松MIC浓度小于等于0.125 mg/L时记为药物敏感，介于0.125-0.5 mg/L之间时记为中敏，高于1 mg/L时记为耐藥，发现中敏菌株一株;阿奇霉素MIC浓度介于0.5-1.0 mg/L之间时记为中敏，大于等于1 mg/L时记为耐药，发现中敏菌24株（占20.2%），发现耐药菌19株（占16.0%）;头孢克肟MIC浓度低于0.25 mg/L时记为药物敏感，高于0.25 mg/L时记为耐药，发现中敏菌株3株。

2.3  7种抗生素对119株淋球菌的抗菌活性

7种抗生素对119株淋球菌的抗菌活性结果表明，青霉素、环丙沙星、大观霉素、头孢曲松、阿奇霉素和头孢克肟的耐药率分别为69.75%、100.00%、0.00%、0.00%、15.97%、0.00%，PPNG阳性菌占60.50%，TRNG阳性菌占40.34%。

2.4  多重耐药情况分析

119株淋球菌对环丙沙星、青霉素、四环素三重耐药菌株有26株（26/119），多重耐药率达到21.8%;对环丙沙星、阿奇霉素、四环素三重耐药菌株有5株（5/119），多重耐药率达到4.2%;对环丙沙星、青霉素、四环素、阿奇霉素四重耐药菌株有6株（6/119），多重耐药率达到5.0%。

3讨论

随着新版本的《世界卫生组织基本用药清单》中，将淋球菌被列到需谨慎使用的清单当中，其相关耐药监测将越来越被全国乃至全世界所重视。

地域的差异会引起淋球菌各种药物MIC值的差异显著，如本市检出青霉素的耐药率为69.75%，这与广东省（93%）、浙江（90%）有明显差异; 对于多耐药菌的，这两年尚未发现对青霉素、阿奇霉素、四环素三重耐药的菌株这与2017-2018年江苏省多重耐药中相应三重耐药菌株占8.92%结果有一定差异。

本文对2019-2020年重庆市淋球菌对七种药物的耐药性进行监测分析，结果发现，本市内淋球菌对青霉素、四环素、环丙沙星和阿奇霉素均有较强的耐药性，而对大观霉素、头孢1曲松和头孢克肟的耐药性为0%，因此可推荐为本地区临床治疗的一线药物使用。

参考文献

[1]杨波，胡丽华，赵建妹.德清地区2013-2016年淋球菌耐药监测结果分析[J].中国公共卫生管理，2018，34（4）：497-499.

[2]卢静，周莹，张之，等.2017-2018年江苏省淋球菌药物敏感分析[J].江苏预防医学杂志，2020，31（4）：368-370.