抗青枯病花生种质资源的鉴定与筛选

杨光 李航宇 陈龙 石守设 余明慧

摘要：为筛选适宜河南省信阳市种植的抗青枯病花生品种，对27份花生品种青枯病田间病圃进行鉴定，计算其发病率和病情指数，从而进行抗病性鉴定和筛选。结果表明，27个供试品种中，中高抗品种共10个占总数的37%，3个品种类型各筛选出2个抗病品种。6个抗病品种发病规律表明，7天和14天病情指数增长较快，21天后基本无变化。高油型花生‘远杂9102和‘信花425，高油酸型花生‘信花14号和‘驻花11号，普通型花生‘远杂21号和‘豫花149号为适宜信阳种植的抗病品种。

关键词：花生;青枯病;抗性鉴定;抗病品种;筛选

中图分类号：S432.1文献标志码：A论文编号：cjas2020-0181

Identification and Evaluation of Peanut Germplasm Resistance to Bacterial Wilt

YANG Guang，LI Hangyu，CHEN Long，SHI Shoushe，YU Minghui

（Xinyang City Academy of Agricultural Science，Xinyang 464000，Henan，China）

Abstract：To select peanut cultivars which are resistant to bacterial wilt and suitable to grow in Xinyang of Henan Province，27 peanut cultivars were planted with bacterial wilt root soaking in field，and the incidence rate and disease index were calculated. Then we carried out disease resistance identification and screening. The results indicate that there are 10 cultivars with high and medium resistance to bacterial wilt，accounting for 37% of the total，among the 3 cultivar types，2 are resistant to the disease. The occurrence regularity of 6 resistant cultivars shows that the disease index increases rapidly on the 7th and 14th day，and there is no change after 21 days. The high oil type ‘Yuanza 9102and ‘Xinhua 425，high oleic type ‘Xinhua 14and ‘Zhuhua 11，and ordinary type ‘Yuanza 21and ‘Yuhua 149are disease-resistant cultivars suitable for cultivation in Xinyang.

Keywords：Peanut;Bacterial Wilt;Identification;Disease Resistant Variety;Screen

0引言

花生作为重要的油料作物，在国内具有较强比较优势和国际竞争力[1]。河南省是中国花生生产第一大省，2019年种植面积超过130万hm²[2]，信阳作为黄淮海高油花生区，常年种植面积6万hm²以上[3]。在6—8月青枯病发病高峰期，花生茎和叶枯萎，最后植株全株死亡。花生青枯病的病原菌为茄科雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum）[4]，1905 年印度尼西亚首次发现花生青枯病，1930年前后在中国发现花生青枯病，在国内南方地区造成严重危害，造成花生产量和品质降低[5]。青枯病菌群体组成十分复杂，存在着明显的生理分化;不同的地域、不同寄主来源青枯菌的种类也存在差异，增加了该病的防治难度[6]。康彦平[7]在演化型分类框架上对国内花生青枯菌菌株进行了研究，明确了长江流域和南方地区花生青枯菌的遗传多样性和对花生致病性。丁雪玲[8]设计特异性引物W1/W2与细菌通用引物L1/L2建立了花生青枯病菌的巢式PCR检测方法，该技术可以用于潜伏期及发病前期的病害检测。陆济[9]从花生根际土壤中分离到的300多种菌株筛选出拮抗菌株A38，对中抗青枯病品种‘航花3号防效达到52.71%。Yoshida[10]在花生刚发病时，使用300～400倍的0.5% OS-施特灵水剂灌根1～2次或采用链浸种或灌根都具有一定的防治效果。目前防治花生青枯病的化学药剂防效低、成本高，生物药剂防效不太稳定[11];最经济有效防治花生青枯病的方法是选育抗病品种[12]。笔者通过对河南省内科研院所培育的27 份不同类型花生品种进行抗青枯病鉴定及评价，旨在筛选出一批适宜信阳种植的抗青枯病花生品种。

1材料与方法

1.1材料

2018年发病高峰期在信阳肖王乡取发病植株，对病原菌进行分离纯化并保存[13]。供試材料为27份花生品种，对照为高抗品种‘中花6号和高感品种‘中花12号。选取的27份供试品种包括高油品种7个（‘漯花21号、‘漯花19号、‘宛花7号、‘远杂20号、‘远杂9102、‘豫花159和‘信花425）、高油酸品种10个（‘驻花11、‘信花14、‘商花186、‘郑农花25号、‘商花296、‘豫花134号、‘濮花71号、‘豫花154号、‘豫花150号、‘豫花139号）、普通品种10个（‘安花5号、‘信花12号、‘驻花7号、‘豫花142号、‘豫花143号、‘豫花144号、‘豫花149号、‘远杂21号、‘豫花132号、‘豫花176号）。‘信花系列品种由信阳市农科院选育，其他品种由河南省农科院和省辖市农科院选育和提供。

1.2品种抗性评价

2019年6月10日在信阳农科院湖东试验基地对27份供材料和2份对照材料定量点播，每组试验品种随机排列，每个小区2 m²，种植20粒，每粒间隔10 cm，重复3次。在花生6叶期用菌液浸根法[14]通过滴灌设备对27份供试材料和2份对照品种根部滴施浓度为1.0×10⁸cfu/mL菌液各5 mL，并使土壤保持湿润。调查每份材料的发病情况，计算发病率[式（1）]并做抗性评价。

发病率发病株数/调查总株数）×100%（1）

根据花生青枯病抗性评价标准[15]将发病率≤1%定为免疫（I），1%<发病率≤20%定为高度抗病（HR），21%<发病率≤45%定为中度抗病（MR），45%<发病率≤60%定为中度感病（MS），发病率61%以上定为高度感病（HS）。

1.3抗性规律调查

在高油、高油酸和普通型中各选择2个抗病性表现最好的品种，在每小区每隔7天共5次进行病情调查，重复3次，计算病情指数[式（2）]。

分级标准[16]。0级，无发病;1级，接种植株只有少数叶片出现小的褪绿斑;2级，接种植株有1/3的叶片出现褪绿斑，植株轻度凋萎;3级，接种植株有1/3～2/3的叶片出现褪绿斑，植株发病凋萎，茎部出现黑色病斑;4级，接种植株全部叶片均出现褪绿斑，植株凋萎或枯死。

2结果与分析

2.1品种抗病评价

对27个供试品种和2个对照品种进行方差分析（表1）。高感对照'中花12号'发病率91.19%最高，高抗对照‘中花6号发病率7.91%最低，供试菌液致病性较好;27个供试品种高抗品种1个（占鉴定总数的3.72%），中抗品种9个（占鉴定总数的33.33%），中感品种13个（占鉴定总数的48.14%），高感品种4个（占鉴定总数的14.81%）。3个品种类型中，高油型花生高抗（‘远杂9102）和中抗‘信花425）品种各1个（图1），高油酸型花生中抗品种4个（‘商花186、‘郑农花25号、‘信花14号和‘驻花11号），普通型花生中抗品种4个‘豫花149号、‘远杂21号、‘安花5号和‘豫花132号）。高油型花生高感品种3个，普通型花生高感品种1个，高油酸型花生无高感品种;高油型花生高感品种较多，占所有高感品种的75%。

在各型花生中各挑选出抗病性最好的2个品种，高油型抗病品种为‘远杂9102、‘信花425，高油酸型抗病品种为‘信花14号、‘驻花11号，普通型抗病品种为‘远杂21号、‘豫花149号。

2.2抗病品种发病规律

对供试品种的病情指数调查中，6个供试品种和对照品种在7天和14天病情指数增长较快，21天后病指增长较慢;‘远杂910214天后病指没有变化，其他5个供试品种都在28天后病指无变化（表2）。7天时供试品种‘远杂9102、‘远杂21号和‘豫花149号的病指和对照相比差异不显著;35天时‘远杂9102的病指和对照相比差异不显著。

3结论

对27个供试花生品种进行抗青枯病评价，普通型花生品种和高油酸型花生品种总体抗病性较好;高油型花生品种抗病性总体较弱，个别较强。高油型花生‘远杂9102和‘信花425，高油酸型花生‘信花14号和‘驻花11号，普通型花生‘远杂21号和‘豫花149号为相对适宜信阳种植的抗青枯病品种。

4讨论

笔者通过试验筛选出高油、高油酸和普通型抗青枯病品种，但未对这几个品种产量和生理生化指标以及品种抗叶斑病、根腐病等其他病害的抗性做进一步研究。

近30年来，中国在花生青枯病抗性遗传改良及应用方面取得了很大进展，抗源几乎都来源于‘协抗青、‘台山三粒肉等少数几个疏枝亚种种质[17]。但是通过对抗青枯病花生品种的产量、品质及品种的系谱分析比较，发现抗病品种的荚果小，产量普遍低于具有相同生态适应性的非抗病品种的20%左右[18-20];而且品质性状差，尤其是含油量和油酸含量偏低;而这些抗源种质的抗性与高产优质存在负相关[21-22]。河南省农科院利用二倍体野生种Arachis chacoense与栽培种远缘杂交，选育出‘远杂9102和‘远杂93072个高油高抗青枯病品种[23-25]。本研究通过大田抗病性筛选验证了‘远杂9102高抗青枯病。

参考文献

[1]肖峥.中国花生产品国际竞争力研究[D].武汉：华中农业大学，2010：25-27.

[2]臧秀旺，张新友，汤丰收，等.河南省高油酸花生生产存在问题及发展对策[J].河南农业，2020（7）：14-15.

[3]余明慧，张顺，石守设，等.“十三五”信阳花生发展展望[J].河南农业，2016（16）：57-58.

[4] EIKO Yabuuchi，YOSHIMASA Kosako，IKUYA Yano，et al. Transfer of Two Burkholderia and An Alcaligenes Species to Ralstonia Gen. Nov.[J]. Microbiology and immunology，1995，39（11）：897-904.

[5]廖伯壽，李栋，单志慧，等.青枯菌潜伏侵染对花生的影响[J].中国油料作物学报，1997，19（4）：55-58.

[6]高欢乐.论青枯菌病害的研究进展[J].法制与社会，2009（12）：354-354.

[7]康彦平，雷永万，丽云，等.我国长江流域和南方地区花生青枯菌遗传多样性分析[J].植物保护学报，2019，46（2）：291-297.

[8]丁雪玲，游泳，黄建成，等.利用巢式PCR检测花生青枯病菌[J].福建农业学报，2015，30（2）：168-171.

[9]陸济，游春平，董章勇.花生青枯病生防细菌的筛选与鉴定[J].广东农业科学，2019，46（2）：94-98.

[10] YOSHIDA S，HIRADATE S，TSUKAMOTO T，et al. Antimicrobial activity of culture filtrate of Bacillus amyloliquefaciens RC- 2 isolated from mulberry leaves[J]. Biological control，2001，91：181-182.

[11]陆济.花生青枯病生防细菌的筛选与花生品种抗性鉴定[D].广州：仲恺农业工程学院，2017：29-30.

[12]吕建伟，李正强，林茂，等.一种快速、有效鉴定花生青枯病抗性方法的建立[J].种子，2012，12（31）：77-79.

[13]方中达.植病研究方法（第三版）[M].北京：中国农业出版社，1998：28.

[14]李文溶，谈宇俊.花生青枯病菌接种技术的研究[J].中国油料，1984（2）：77-81.

[15]周桂元，梁炫强，李一聪，等.花生青枯病抗性鉴定及抗源分析[J].花生学报，2003，32（3）：25-28.

[16]王玉.烟草青枯病抗性的大田鉴定及苗期鉴定方法研究[D].福州：福建农林大学，2018：56.

[17]姜慧芳，任小平，廖伯寿，等.抗青枯病花生资源的种子大小及主要品质性状的遗传分化[J].中国油料作物学报，2006，28（2）：55-61.

[18]吕建伟，姜慧芳，黄家权，等.青枯菌诱导的花生基因表达谱SSH分析[J].西北植物学报，2011，31（8）：1517-1523.

[19]李硕卿.青枯病菌侵染后花生基因表达谱分析[D].福州：福建农林大学，2012：75.

[20]朱晓峰，赵西拥，姜涛，等.花生抗病基因的研究进展[J].农学学报，2017，7（4）：5-9.

[21]陈本银，姜慧芳，廖伯寿，等.中国花生青枯病抗性遗传改良研究进展[J].中国农学通报，2007，23（8）：369-372.

[22]林壁润，郑奕雄.我国花生青枯病菌的遗传多样性与抗病育种研究进展[J].广东农业科学，2009（12）：20-21.

[23]梁炫强，李一聪，李少雄，等.优质高产兼抗花生新品种粤油202-35选育报告[J].花生科技，2000（1）：1-3.

[24]吴继华，周帅，关红英，等.小花生新品种远杂9102[J].中国种业，2003，21（9）：56-57.

[25]宋江春，李拴柱，王建玉，等.我国花生抗青枯病育种研究进展[J].中国种业，2019（9）：19-21.