血清sCD14、sCD163水平与冠状动脉粥样硬化病变程度及稳定性的相关性

寇朴怀，苗建玲

长安医院心血管内科，陕西 西安 710016

冠状动脉粥样硬化(coronary atherosclerosis，CAS)是指冠状动脉血管发生动脉粥样硬化病变而引起血管腔狭窄或阻塞的一种慢性炎症病理变化，造成心肌缺血、缺氧或坏死[1]。近年来随着社会生活水平的改善，其发病率和死亡率逐年提高，给患者造成极大风险。可溶性CD14 (soluble CD14，sCD14)是一种由365 个氨基酸残基组成的糖蛋白，可由单核细胞、巨噬细胞等直接释放入血，参与识别多种产物，激活炎症瀑布反应[2]。可溶性CD163 (soluble CD163，sCD163)分子被称为血红蛋白清道夫受体，可以特异性识别血红蛋白，参与调控炎症反应，增加粒细胞、巨噬细胞集落刺激因子分泌，调节抗炎因子和促炎因子的表达[3]。但两者与CAS的相关研究均较少描述，因此本研究通过检测血清sCD14、sCD163 在CAS 中的表达情况，探讨两者与CAS病变程度及稳定性的关系，以期为CAS的诊治提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 前瞻性选取2019 年1 月至2020年10 月经长安医院心血管内科确诊收治的216 例CAS患者作为观察组。纳入标准：①所有患者均经冠状动脉造影证实，存在至少一支冠状动脉狭窄≥50%；②经详细询问病史、体格检查、相关化验检查、心电图检查；③患者配合度高，临床资料完整，患者及家属知情同意。排除标准：①严重肝、肾疾病；②急、慢性感染性疾病；③恶性肿瘤；④心肌病、心肌瓣膜病；⑤长期服用降脂药。同期选取在我院体检的健康人群240例作为对照组。本研究通过本院伦理委员会批准，符合《世界医学协会赫尔辛基宣言》。

1.2 主要试剂与仪器 美国宝特酶标仪(ELx800)购于上海奥陆生物科技有限公司；谱标立式超低温冰箱(SPCC)购于东莞市谱标实验器材科技有限公司；德国Hettich 离心机(ROTOFIX32A)购于德祥科技有限公司；明美体视显微镜(MZ61)购于广北京金达阳光科技有限公司；MicroDigital 化学发光分析仪(Diamond)购于北京勤业永为科技有限公司；恒温培养箱(CD-11275-ML)购于武汉纯度生物科技有限公司；Human sCD14酶联免疫吸附试验法(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA) Kit 试剂盒(EYK-DBHZ-13141)购于厦门研科生物技术有限公司；Human sCD163 ELISA Kit 购于上海恒斐生物科技有限公司；Human 白细胞介素-6 (interleukin-6，IL-6) ELISA Kit购于杭州联科生物技术股份有限公司。

1.3 观察指标与检测方法 所有受试者均在空腹状态下，肘静脉抽血行常规检查时，使用含促凝剂的红头管留取静脉血约4 mL，在室温状态下静置，自凝30 min后，使用离心机3 000 r/min离心10 min，使用移液管取出上清液，转移到EP管中，记录编号和日期，在-80℃冰箱中保存。标本一次检测完毕，直到检测前未经反复冻融。从-80℃冰箱中取出血清标本，利用ELISA检测sCD14、sCD163、IL-6表达水平，严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.4 研究方法 根据冠状动脉病变程度将观察组患者分为不稳定型心绞痛(unstable angina pectoris，UAP)组104 例，稳定型心绞痛(stable angina pectoris，SAP)组69 例，急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)组43 例，观察各组Gensini 积分[4]。根据狭窄程度最严重处积分及病变部分系数计算Gensini 积分。狭窄直径≤25%、25%＜L 狭窄直径≤50%、50%＜狭窄直径≤75%、75%＜狭窄直径≤90%、90%＜狭窄直径≤99%、完全闭塞分别记为1、2、4、8、16、32分；病变部位的系数分别为左主干5，左前降支和回旋支近段2.5，左前降支中段1.5，左前降支、回旋支远段、后降支、钝缘支、第一对角支1，第二对角支和后侧支0.5，右冠病变均为1。狭窄程度最严重处积分与病变部分系数乘积即为Gensini积分。

1.5 统计学方法 应用SPSS23.0 统计学软件对数据进行分析，计量资料以均数±标准差()表示，两两比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，有差异时以SNK-q；检验进行两两比较；计数资料比较采用检验；采用Pearson 相关法分析CAS 患者血清sCD14、sCD163 与IL-6 表达水平的相关性；绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic，ROC)分析血清sCD14、sCD163 表达对CAS 的诊断价值。均以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组受检者的一般资料比较 两组受检者的年龄、体质量指数比较差异均无统计学意义(P＞0.05)；观察组患者的总胆固醇水平及男性、吸烟、高血压、糖尿病比例明显高于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 两组受检者的一般资料比较[，例(%)]

表1 两组受检者的一般资料比较[，例(%)]

2.2 两组受检者的血清sCD14、sCD163、IL-6表达水平比较 观察组患者血清sCD14、sCD163、IL-6表达水平明显高于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表2。

表2 两组受检者的血清sCD14、sCD163、IL-6表达水平比较()

表2 两组受检者的血清sCD14、sCD163、IL-6表达水平比较()

2.3 UAP组、SAP组、AMI组患者的血清sCD14、sCD163、IL-6表达水平及Gensini积分比较 UAP 组、AMI 组患者血清sCD14、sCD163、IL-6 表达水平及Gensini 积分明显高于SAP 组，而AMI 组又明显高于UAP组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表3。

表3 三组患者的血清sCD14、sCD163、IL-6表达水平及Gensini积分比较()

表3 三组患者的血清sCD14、sCD163、IL-6表达水平及Gensini积分比较()

注：与SAP组比较，aP＜0.05；与UAP组比较，bP＜0.05。

2.4 CAS 患者血清sCD14、sCD163 与IL-6 表达水平的相关性 经Pearson 相关法分析结果显示，CAS患者血清sCD14与sCD163表达水平呈正相关(r=0.716，P＜0.05)；血清sCD14与IL-6表达水平呈正相关(r=0.833，P＜0.05)；血清sCD163 与IL-6 表达水平呈正相关(r=0.606，P＜0.05)，见图1～3。

图1 sCD14与sCD163的相关性

图2 sCD14与IL-6的相关性

图3 sCD163与IL-6的相关性

2.5 sCD14、sCD163 诊断CAS 的ROC 曲线 以血清sCD14、sCD163水平为检测变量绘制ROC曲线，sCD14诊断CAS的ROC曲线下面积为0.904 (95%CI：0.877～0.931)，截断值为3.60 μg/mL，灵敏度为75.0%，特异性为90.4%；sCD163诊断CAS的ROC曲线下面积为0.821(95%CI：0.784～0.859)，截断值为0.76 μg/mL，灵敏度为71.8%，特异性为74.2%，见图4。

图4 sCD14、sCD163诊断CAS的ROC曲线

3 讨论

CAS是冠心病的主要生理病理基础，实际上是一个长期形成并进展的慢性炎症反应，炎症贯穿于整个CAS血栓形成的发生发展过程中，进而影响整个冠状动脉系统。慢性炎症的快速变化可出现斑块破裂、血管内皮损伤、血栓形成，导致稳定型心绞痛向不稳定型心绞痛甚至急性心肌梗死转化，提示全身和局部炎症在动脉粥样硬化形成和进展中起着重要作用[5]。在针对CAS的研究中，许多有关心血管疾病的炎性递质相继被报道，如刘冉等[6]认为针对炎性因子C 反应蛋白、白介素17、分泌型磷脂酶A2等特异性疗法可使动脉粥样硬化患者受益。经过研究发现，IL-6是潜在的促炎细胞，由活化的血管内皮细胞、巨噬细胞产生，同样能上调粘附分子的表达，降低斑块的稳定性，与动脉粥样硬化具有明确联系，有望被认为是评价斑块稳定性及预测斑块破裂较理想的生化标志物[7]。

sCD14是一种特异性的单核细胞和巨噬细胞表面标志物，属于细胞表面糖蛋白家族。有学者认为，急性冠脉综合征、稳定型心绞痛患者血清中sCD14表达水平显著高于对照组，sCD14 作为炎症分子对冠状动脉斑块性质具有一定的评估价值[8]。余波等[9]发现sCD14、IL-6表达相比于非冠心病组，急性心肌梗死患者血清中明显升高，说明急性心肌梗死患者有较强的炎性激活。sCD14活化可释放白细胞介素、生长因子、一氧化氮等粘附分子的表达，参与炎症反应导致组织器官损伤，其浓度异常对血液系统疾病具有良好的诊断和预后价值；sCD163是作用在M2型巨噬细胞表面特异性表达且仅表达在活化单核细胞和巨噬细胞系统的细胞膜上、具有可溶性的清道夫受体，巨噬细胞参与人体固有免疫系统的重要组成，能够吞噬病原微生物，介导炎性反应，这使得sCD163 刺激细胞生长，促进多种炎性因子的释放[10]。SANDAHL 等[11]认为，sCD163 作为巨噬细胞活化标志物和纤维化成分的组合可预测肝硬化患者的门脉高压。SATO 等[12]发现冠状动脉斑块内出血上调巨噬细胞上sCD163 表达，并与易损斑块发展有关。XIE等[13]认为，sCD163在血红蛋白的代谢中起重要作用，脑出血患者根据平均sCD163 水平分为高水平和低水平组，与高水平组相比，低水平组的血肿吸收率明显降低，推测sCD163影响脑出血后血肿吸收。

为使研究内容更加全面，首先对两组受检者的一般资料进行对比，经研究结果表明，CAS 的发生与年龄、体质量指数无关，而与性别、吸烟、高血压、糖尿病相关。本研究中观察组患者血清sCD14、sCD163、IL-6 表达均高于对照组，猜测在CAS 过程中，机体为适应缺血缺氧环境发生炎症应激反应，激发巨噬细胞分泌，从而导致sCD14、sCD163、IL-6表达量上升。而SAP组、AMI组患者血清sCD14、sCD163、IL-6表达水平及Gensini 积分均高于UAP 组，AMI 组患者高于SAP组，因此研究认为sCD14、sCD163、IL-6表达或与CAS 稳定性及病变程度相关。Pearson 法分析结果显示，CAS 患者血清sCD14 与sCD163 表达水平呈正相关，血清sCD14 与IL-6 表达水平呈正相关，血清sCD163 与IL-6 表达水平呈正相关，猜测sCD14、sCD163由巨噬细胞活化，参与CAS炎性反应，并导致IL-6炎性因子激活并大量释放。此外，ROC曲线显示，sCD14诊断CAS的截断值为3.60 μg/mL，sCD163截断值为0.76 μg/mL，提示在sCD14表达高于3.60 μg/mL或sCD163表达高于0.76 μg/mL时，CAS发生风险较高。

综上所述，CAS 患者血清sCD14、sCD163 表达水平均上升，推测sCD14、sCD163均参与CAS发生，并与CAS稳定性及病变程度有关，且两者相关性也较为密切，但两者在巨噬细胞如何表达，是否存在共同介导物质尚不清楚，需待进一步研究。由于本研究观察样本数过小，相关结果或存在局限性，未来仍待深入研究。