葛根药材和药渣硒含量对比检测分析

＊徐春柳 林军

（浙江尖峰药业有限公司 浙江 321000）

愈风宁心滴丸为我公司产品，具有解痉止痛，增强脑及冠脉血流量的作用。用于高血压头晕，头痛，颈项疼痛，冠心病心绞痛，神经性头痛等症。愈风宁心滴丸是由单味中药葛根提取制备而成，所用葛根为野葛。在生产实践中我们发现，葛根素含量高的野葛产地不少在富硒带，同时葛根是豆科植物，而豆科植物富集硒的能力在植物中排在第二位，因此推测野葛中有较高含量的硒。硒是人体健康和动物体内必需的14种微量元素之一，被称为生命的保护剂，体内缺硒会引起多种疾病如肝坏死、心肌变性、胰脏萎缩纤维化、肌肉营养不良、克山病、大骨节、白内障等疾病。硒有保护心肌健康的作用，可防止心脑血管冠心病、动脉硬化等疾病，可以抗氧化、防衰老，增强人体免疫力等作用。明确其硒含量，对葛根及其药渣的富硒食品开发有重要意义，为此我们取了生产用的野葛及经提取后的药渣各三批，用电感耦合等离子体发射光谱法（ICP-OES法）进行了硒含量检测分析。

1.试剂及仪器

超纯水（自制），硝酸（色谱级，永华化学科技有限公司），双氧水（分析级，无锡市展望化工试剂有限公司），硒单元素标准溶液（中国计量科学研究院），ICPOES（Inductively Coupled Plasma Optical Emission Spectrometer，电感耦合等离子体发射光谱仪）（型号5100，安捷伦科技有限公司），微波消解仪（MDS-15，上海新仪微波化学科技有限公司），加热板（ECH-Ⅱ，上海新仪微波化学科技有限公司），电子天平（BSA224S，赛多利斯公司），葛根药材（安康康元医药科技有限公司）及对应药渣各三批，药渣三批编号为1#、2#、3#，药材三批编号为4#、5#、6#。

2.实验过程

(1)溶液配制

①供试品溶液、回收率溶液、阴性对照溶液：

将样品磨碎，取14个聚四氟乙烯消解罐，分别编号1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，往1至13号罐内依次加入1# 2.0113g、2.0277g，2# 2.0206g、2.0170g，3# 2.0202g、2.0078g，4# 2.0519g、2.0012g、2.0456g，5# 1.9877g、2.0336g，6# 1.9966g、2.0096g，9号罐加入硒单元素标准溶液0.250ml，14号罐不加样品，往14个消解罐内加入20ml硝酸，混匀，加热至120℃，往消解罐内加入2ml H2O2，加热30min后升温至150℃，往所有消解罐内加入1ml H2O2，加热至罐内液体剩余5ml左右，冷却。加入5ml硝酸、1ml H2O2，搅匀，盖上内盖，旋紧外套，置微波消解仪中消解（消解程序见表1）。消解完全后，冷却。

表1 微波消解程序

②0.5%硝酸溶液：精密量取7ml硝酸，加超纯水1400ml,混匀。

③用0.5%硝酸溶液分别将2.1.1中消解液洗入50ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，取上清液。9号罐作为回收率溶液，14号罐作为阴性对照溶液，其余罐所得溶液作为供试品溶液。

④线性溶液：分别精密量取硒单元素标准溶液（100μg/ml）0.00ml，0.40ml，0.80ml，1.20ml，1.60ml，2.00ml置100ml量瓶中，用0.5%硝酸溶液稀释至刻度，摇匀。

(2)仪器工作参数

读取时间（s）：5雾化气流量（L/min）：0.7。

RF功率（kW）：1.2等离子体气流量（L/min）：12。

稳定时间（s）：15辅助气流量（L/min）：1。

观察方式：轴向氧气百分比：0。

重复次数：3泵速（rpm）：12样品抽吸时间（s）：15。

(3)分析条件

检测波长：通过预实验确定203.985nm。

(4)测定

蠕动泵进样，分别测定线性溶液、阴性对照溶液、供试品溶液、回收率溶液的硒的强度，按照《中国药典》2015版四部通则0411标准曲线法测量与计算。

(5)计算公式

(6)结果

表2 系统适用性结果

表3 线性结果

图1 线性结果

表4 回收率结果

表5 样品检测结果

结论：电感耦合等离子体发射光谱法（ICP-OES法）可以用于葛根药材和药渣中硒含量的测定。试验证实了葛根及其药渣中富硒，可作富硒食品或食品添加剂。

3.讨论

（1）硒的含量与野葛的产地、生长年限有关，我们生产所用的野葛中硒的含量在多少范围内，还需不断的数据积累。从检测分析结果看，野葛及提取后的药渣属于富硒植物，葛根中的硒为有机硒，优于无机硒。从开发硒食品（葛根是药食同源产品）或食品添加剂来说，有一定的价值。

（2）野葛经乙醇-水提取后，从结果看，硒含量减少不多，推测野葛中的有机硒在乙醇-水溶液中溶解度小。开发葛根硒食品，从经济效益角度看，使用葛根渣效果更好，野葛药渣开发出来的膳食补充剂能做到价廉物美。

（3）我国大部分地区是贫硒，20世纪90年代初进行的总膳食结构调查结果显示，中国居民日常饮食中硒摄入量平均值为43.3μg/天，低于中国营养学会推荐的硒适宜摄入量下限50μg/天。如以每天每人需另外补有机硒10μg计，以葛根或渣制成的富硒食品或食品添加剂，按这次检测结果计算，需每天服用15-50g左右，人体可以接受。

（4）硒检测方法有原子分光光谱法，色谱法，紫外可见吸收光谱法，荧光光度法等，为了准确、快速检测出硒的含量，我们直接使用了最先进的ICP-OES法，从结果看，灵敏度、线性关系良好。鉴于企业中常有的分析仪器为HPLC、GC、UV，从中选用一种建立常规检测葛根中硒含量方法也很有意义。

（5）土壤中硒含量与葛根中葛根素含量的高低是否存正比关系还需大量的检测分析。

（6）葛根中的硒为有机硒，推测与葛根多糖结合在一起的比较多，而葛根多糖本身具有多种生物活性，主要有抗氧化，调节免疫，降血糖降血脂，解酒、保肝和抑菌、抗肿瘤作用等。富硒葛根多糖的生物活性又是很值得研究的课题。由于目前葛根多糖只是一类成分，不是单一的化合物，如何分离纯化得到单一的化合物，进行分析、对比研究也是不小的课题。