滇黄精中多糖的分离与抗氧化活性研究

王 婧，陶爱恩，杨 燕，杨建波，晏仁义, 4，段宝忠

滇黄精中多糖的分离与抗氧化活性研究

王 婧1，陶爱恩1*，杨 燕2，杨建波3，晏仁义1, 4，段宝忠1*

1. 大理大学药学院，云南 大理 671000 2. 云南省科学技术院，云南 昆明 650051 3. 中国食品药品检定研究院，北京 100050 4. 天津益倍生物科技集团有限公司，天津 300132

分离纯化滇黄精中的均一多糖，并阐释其理化性质和抗氧化活性。方法 通过水提醇沉、分级醇沉得滇黄精总多糖（PKS）的50%和70%醇沉部位，再经DEAE-琼脂糖凝胶FF离子交换柱和Sephadex G-100柱色谱法分离纯化得到均一多糖，并利用柱前衍生化HPLC、高效凝胶渗透色谱法和红外光谱法分别对其单糖组成、相对分子质量和结构进行研究；同时采用总还原力实验、1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）和羟基自由基（·OH）清除法对其抗氧化活性进行评价。从50%和70%醇沉部位分离纯化得到3个均一多糖（PKS-1、PKS-2和PKS-3），其单糖组成均含有-甘露糖、-半乳糖醛酸、-葡萄糖醛酸、-半乳糖、-阿拉伯糖和-岩藻糖，其中PKS-1及PKS-3还分别含有-核糖和-鼠李糖；相对分子质量分别为85 017.83、266 084.76和474 799.22；PKS、PKS-1和PKS-2的总还原能力、·OH及DPPH自由基的清除能力为PKS＞PKS-2＞PKS-1。从滇黄精50%和70%醇沉部位分离到3个均一多糖，均为含有β构型的吡喃环酸性多糖，其单糖组成相似，PKS、PKS-1和PKS-2均有一定的抗氧化活性，为滇黄精抗氧化活性成分的研究及抗衰老药物和功能性食品的开发利用奠定了科学基础。

滇黄精；-甘露糖；-半乳糖醛酸；-葡萄糖醛酸；-半乳糖；-阿拉伯糖；-岩藻糖；理化性质；抗氧化

滇黄精Coll. et Hemsl.为药食同源大宗药材，是中国药典收载的黄精基原植物之一[1]，习称大黄精，历代养生学家以及道家视之为补养强壮食品，具有极高的药用和食用价值[2]。已有研究表明滇黄精主要含有多糖、皂苷、黄酮类等化学成分，其中以多糖所占比例最高[3-5]，是其主要活性成分之一[3,6]。现代研究表明，多种植物多糖均可通过抗脂质过氧化和清除自由基，调节端粒酶活性和机体的糖、脂质代谢，以及神经-内分泌功能等多种途径来发挥抗衰老作用[7]。由于衰老是机体各器官、组织功能随年龄增长而发生退行性变化的过程[8]，过量的自由基如1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、超氧阴离子及羟基自由基（·OH）是引起机体衰老的主要因素[9-10]。目前，从天然产物中寻找高效、低毒的清除体内自由基的抗氧化剂已成为现代医药、保健行业研究的热点[11-12]。鉴于植物多糖是一类高效、低毒的天然抗氧化剂[13-14]，且滇黄精资源丰富，在营养保健、养生、老年疾病预防等领域广泛应用，虽然有关黄精多糖抗氧化研究的报道较多[15-17]，但这些研究对象为黄精总多糖，且所研究植物为多花黄精Hua.或黄精Red.。目前有关滇黄精中多糖分离纯化的研究，仅见吴群绒等[18]、Li等[19]分离得到2个均一多糖，滇黄精中其他均一多糖的分离纯化及抗氧化活性的相关研究尚未见报道，极大制约了相关药物产品和功能性食品的开发。因此，本研究通过水提醇沉、分级醇沉、DEAE-琼脂糖凝胶FF（DEAE-Sepharose Fast Flow）离子交换柱和Sephadex G-100柱色谱法制备、纯化滇黄精总多糖50%和70%醇沉部位，并利用柱前衍生化HPLC、高效凝胶渗透色谱法和红外光谱法分别对其单糖组成、相对分子质量和结构进行研究；同时采用总还原力实验、DPPH和·OH清除法对其抗氧化活性进行评价，以期为滇黄精抗衰老药物和功能性食品的开发利用提供科学参考。

1 仪器、试剂及材料

1.1 仪器

Agilent 1260高效液相色谱仪（G1322A在线脱气机、G1311B四元梯度泵、G7129A进样器、G1316A柱温箱、G4260B型蒸发光散射检测器和ChemStation色谱工作站）；Nexus 傅里叶变换红外光谱仪（Thermo Necolet）；UV-5500型紫外可见分光光度计（上海元析仪器有限公司）；HW-3红外烘干箱（天津市光学仪器厂）；FW-4A型粉末压片机（天津市拓普仪器有限公司）；AL204型电子天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）；Sigma 3-15台式高速离心机（德国Sigma公司）；FD-1C-80型冷冻干燥机（北京博医康实验仪器有限公司）。

1.2 试药

对照品右旋糖酐系列D0（批号140637- 201203）、D1（批号140638-201203）、D2（批号140639201203）、D3（批号140640-201203）、D4（批号140641201203）、D5（批号140642-201203）、D6（批号140643201203）、D7（批号140644201203）、D8（批号140645201203）、D2000（批号140646-201203），相对分子质量（w）分别为180、2500、4600、7100、10 000、21 400、41 100、84 400、133 800、2 000 000，购于中国食品药品检定研究院；-葡萄糖（171106）、-甘露糖（170921）、-盐酸氨基葡萄糖（171210）、-半乳糖（批号171206）、-鼠李糖（171024）、-岩藻糖（批号170813）、-葡萄糖醛酸（170730）、-木糖（170912）、-半乳糖醛酸（170903）、-核糖（171103）、-阿拉伯糖（171219），以上单糖质量分数≥98%，均购于上海融禾医药科技有限公司；牛血清白蛋白（质量分数≥96%，批号9048-46-8，麦克林）；DPPH（东京化成工业株式会社）；3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮（PMP，阿拉丁有限公司）；维生素C（VC）和三氟乙酸（TFA）购于国药集团化学试剂有限公司）；其他试剂均为分析纯。

1.3 材料

玻璃色谱柱（50 cm×2 cm），上海夏美生化科技发展有限公司；干型透析袋MD34-3.5（截留相对分子质量3500），北京瑞达恒辉科技发展有限公司；滇黄精购于云南省大理市，经大理大学药学院段宝忠教授鉴定为百合科植物滇黄精Coll. et Hemsl.的干燥茎，凭证标本（YNDL2017110201）存放于大理大学中药标本馆。

2 方法

2.1 滇黄精均一多糖的分离与纯化

称取干燥滇黄精粉末适量置于圆底烧瓶中，按料液比1∶4加入石油醚-丙酮（体积比1∶1）加热回流脱脂2次，每次2 h，挥干溶剂后，加入80%乙醇（料液比1∶4），加热回流1 h，趁热抽滤，除去小分子单糖，残渣用80%热乙醇洗涤3次，60 ℃烘干。称取滇黄精粉末（0.65 kg），以水为提取溶剂（料液比1∶10）在沸水浴中煎煮40 min，重复提取3次后，滤过，合并滤液，60 ℃减压浓缩至小体积后，缓慢加入95%乙醇，使得醇沉后终浓度为90%，离心，得到沉淀物A；上清液浓缩，醇沉，使醇沉后终浓度为95%，得沉淀物B；合并沉淀物A、B，得滇黄精总多糖（PKS）。将PKS分别采用70%、50%乙醇醇沉，得醇沉物C（19.17 g）和D（22.62 g）；C和D复溶，加入等体积的Sevag试剂（正丁醇-氯仿，1∶5）脱蛋白，重复多次。然后用透析袋除小分子，依次过DEAE-琼脂糖凝胶FF柱和Sephadex G-100柱，用蒸馏水，0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mol/L的NaCl溶液进行梯度洗脱，利用苯酚-硫酸法监测洗脱效果，高效凝胶色谱（HPGPC-ELSD）检测纯度，收集洗脱液，透析除盐，冷冻干燥，从C部位得到多糖PKS-1（3.36 g），D部位得到PKS-2（2.64 g）、PKS-3（0.17 g）。

2.2 纯度检测

采用HPGPC-ELSD分析。色谱条件：色谱柱Shodex OHpak SB-804 HQ，流动相为纯净水，体积流量0.6 mL/min，柱温30.0 ℃，进样量10 μL；气压0.3 MPa，雾化温度45 ℃，蒸发温度110 ℃。

2.3 Mw测定

取已知w的右旋糖酐系列对照品D0、D1、D2、D3、D4、D5、D6、D7、D8，D2000适量，精密称定，加流动相溶液溶解至约1 mg/mL，混匀，滤过，作为窄标校正溶液，按“2.2”项下色谱条件测定，以保留时间为横坐标，lgw值为纵坐标绘制标准曲线。

2.4 理化性质研究

滇黄精多糖的溶解性、斐林试剂反应、Molish反应、沉淀反应、双缩脲反应、茚三酮反应等常规理化性质参照文献进行[20]。

2.5 杂质检查

分别取滇黄精多糖配制质量浓度为0.1 mg/mL的水溶液，进行紫外光谱（UV）扫描分析，波长扫描范围为190～700 nm。

2.6 红外光谱（IR）结构表征

取PKS-1～3各1 mg至玛瑙研钵中，加入溴化钾粉末200 mg作为分散剂，研磨均匀，取适量细粉平铺于模具中，以20 MPa压力压制1 min，取出，对光检视，以样片均匀、半透光为佳，作为供试品。将制备好的供试品置于红外光谱仪中扫描；光谱扫描范围4000～400 cm−1，扫描32次，分辨率为4 cm−1，扫描时扣除H2O和CO2的背景。

2.7 黄精多糖的单糖组成及物质的量分析

2.7.1 HPLC色谱条件 Agilent Zorbax-SB C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈（A）-0.025 mol/L磷酸盐缓冲溶液（B）；梯度洗脱：0～10 min，15%～17% A；10～18.5 min，17%～22.5% A；18.5～20 min，22.5%～23.5% A；20～32 min，23.5%～30% A；体积流量0.8 mL/min；柱温35 ℃；检测波长250 nm；进样量20 μL。

2.7.2 对照品溶液的制备 精密称取各单糖对照品适量，用蒸馏水配制成各单糖质量浓度为0.5 mg/mL的混合对照品溶液。

2.7.3 样品酸水解溶液的制备 精密称取PKS-1～3各5 mg，置5 mL安瓿瓶中，精密加入2 mL 4 mol/L 三氟乙酸（TFA）溶液，封口后置110 ℃条件下水解7 h，取出，放冷，水浴蒸干，残渣加入甲醇1 mL，烘干，重复多次，至TFA除尽；加适量热水使沉淀溶解，转移到1 mL量瓶中，放冷，定容，摇匀，得样品的酸水解溶液。

2.7.4 衍生化供试品溶液制备 分别精密吸取上述对照品和样品酸水解溶液400 μL，置于5 mL的安瓿瓶中，各精密加入200 μL 0.6 mol/LNaOH和0.5 mol/LPMP溶液，置70 ℃条件下反应60 min。取出，放冷，精密加入200 μL 0.6 mol/L HCl溶液，混匀。加入等体积的三氯甲烷，混匀，离心10 min（4000 r/min），去掉三氯甲烷层，重复多次至三氯甲烷层无色，即得对照品和样品的衍生化供试品。

2.7.5 单糖组成的物质的量分析 取混合对照品储备液，分别配制成质量浓度为0.01、0.025、0.05、0.1、0.2、0.5 mg/mL的系列溶液，按“2.7.3”项下方法进行衍生化处理，分别进样20μL测定。以对照品浓度为横坐标（），峰面积为纵坐标（），绘制标准曲线，并计算各对照品的组成比例。11种单糖的回归方程及线性范围分别为-核糖：＝6 498.2－9.762 8，0.196 0～9.800 0 μg，＝0.999 7；-甘露糖：＝2 690.1＋77.15，0.224 0～11.200 0 μg，＝0.999 8；-鼠李糖：＝5 912.3＋27.8，0.228 0～11.400 0 μg，＝0.999 7；-半乳糖醛酸：＝367.57＋61.36，0.196 0～9.800 0 μg，＝0.999 5；-盐酸氨基葡萄糖：＝1 937.3＋14.204，0.240 4～12.020 0 μg，＝0.999 7；-葡萄糖醛酸：＝883.43＋34.9，0.196 0～9.800 0 μg，＝0.999 5；-半乳糖：＝1 495.3＋142.72，0.196 0～9.800 0 μg，＝0.999 5；-葡萄糖：＝4817＋161.23，0.200 8～10.040 0 μg，＝0.999 6；-木糖：＝1 992.2＋199.3，0.222 0～11.100 0 μg，＝0.999 5；-阿拉伯糖：＝6 077.4＋150.68，0.206 0～10.300 0 μg，＝0.999 8；-岩藻糖：＝1 061.8＋274.92，0.248 0～12.400 0 μg，＝0.999 5。

2.8 抗氧化活性评价

2.8.1 总还原力的测定 配制不同质量浓度（0.2、1、2、3、4 mg/mL）PKS、PKS-1和PKS-2溶液，取上述溶液2.0 mL，分别加0.2 mmol/L磷酸盐缓冲液（pH 6.6）和1%铁氰化钾溶液2.0 mL，振荡混匀，50 ℃水浴20 min，冷却后加入10%三氯乙酸溶液2.0 mL，混匀，离心10 min（3000 r/min），取上清液2 mL，加入2.0 mL蒸馏水和0.5 mL 0.1%三氯化铁溶液，混匀，静置15 min，在波长700 nm测吸光度（）值，以蒸馏水作空白组，VC为阳性对照，比较不同样品的总还原能力[21-22]。

总还原力＝1－2

1为反应后样品值，2为样品本底值

2.8.2 DPPH自由基清除能力的测定 配制不同质量浓度（0.2、1、2、3、4、8 mg/mL）PKS、PKS-1和PKS-2溶液，取上述溶液2.0 mL，加0.1 mmol/LDPPH无水乙醇溶液2.0 mL，混匀，静置30 min，在517 nm测定值，以蒸馏水作空白组，VC作阳性对照组，按公式计算DPPH自由基的清除率[21-22]。

清除率＝1－(给药－空白)/对照组

2.8.3 羟基自由基清除能力的测定 配制不同质量浓度（0.2、1、2、3、4、8 mg/mL）PKS、PKS-1和PKS-2供试品溶液，精密吸取上述溶液2.0 mL，依次加入2 mL 5 mmol/LFeSO4、5 mmol/L水杨酸和5 mmol/LH2O2溶液，摇匀，37 ℃静置30 min，在510 nm处测定值，以蒸馏水作空白组，VC作阳性对照组，按“2.8.2”项公式计算羟基自由基的清除率[21-22]。

3 结果与分析

3.1 样品分离及纯度分析

分别对滇黄精多糖70%醇沉物（部位C）和50%醇沉物（部位D），采用DEAE-琼脂糖凝胶FF和Sephadex G-100色谱分离纯化，用蒸馏水和不同浓度NaCl溶液依次洗脱，采用苯酚-硫酸法检测多糖洗脱效果，绘制洗脱曲线并收集同一洗脱液浓度下组分。70%醇沉物（部位C）的HPGPC-ELSD色谱图及洗脱曲线见图1-a、b，由图1-a可见，部位C为2个均一多糖组成；当NaCl浓度分别为0.1、0.3 mol/L时，洗脱曲线有2个峰，洗脱峰的峰形对称，分别收集2个不同浓度洗脱液下的样品（S1、S2），采用HPGPC-ELSD检测S1和S2，其色谱图见图1-e、g，可见二者峰形对称，其中S1的保留时间为13.1 min，S2的保留时间为10.1 min，表明为2个均一多糖，分别命名为PKS-1、PKS-3。50%醇沉物（部位D）的HPGPC-ELSD色谱图及洗脱曲线见图1-c、d，由图可见，当NaCl浓度分别为0.1、0.2 mol/L时，洗脱曲线有2个峰，分别收集2个不同浓度洗脱液下的样品（S3、S4），采用HPGPC-ELSD检测S3和S4，其色谱图见图1-f、g，可见二者峰形对称，表明为均一多糖，其中S3、S4的保留时间分别为11.3、10.1 min。比较发现S4与S2的保留时间一致，提示可能为同一个化合物，分别取S4及S2样品1 mg混合，经HPGPC-ELSD检测得1个对称峰，表明二者为同一化合物，命名为PKS-3；S3命名为PKS-2。因此，从C部分和D部位共分离得到3个均一多糖。

a、c-部位C和D的HPGPC-ELSD色谱图 b、d-部位C和D的洗脱曲线 e～g-PKS-1、PKS-2、PKS-3的HPGPC-ELSD色谱图 S1-PKS-1 S2、S4-PKS-3 S3-PKS-2

a, c-HPGPC-ELSD chromatograms of C and D b, d-elution curves of C and D e—g-HPGPC-ELSD chromatograms of PKS-1, PKS-2, and PKS-3 S1-PKS-1 S2 and S4-PKS-3 S3-PKS-2

图1 滇黄精多糖的HPGPC-ELSD色谱图

Fig. 1 HPGPC-ELSD chromatograms and gradient elution of polysaccharide of

3.2 Mw的测定

以已测定w的葡聚糖对照品保留时间为横坐标（），lgw为纵坐标（），得葡聚糖对照品回归方程为＝－0.254 9＋8.217 6，2＝0.994 9。计算3个均一多糖的w。PKS-1、PKS-2、PKS-3的w分别为85 017.83、266 084.76、474 799.22。

3.3 理化性质

PKS-1、PKS-2、PKS-3均为白色絮状物，溶于水，难溶于乙醇、氯仿、石油醚等溶剂。3个均一多糖的Molish反应均为阳性，表明为糖类物质；斐林试剂反应为阴性，表明不含游离还原性单糖；沉淀反应、双缩脲反应、茚三酮反应均为阴性，表明不含蛋白质。

3.4 杂质检查

紫外光谱扫描显示PKS在272 nm有吸收峰，表明含有蛋白质或核酸等杂质，PKS-1、PKS-2、PKS-3仅在200 nm处有末端吸收，为多糖的特征吸收；在272 nm附近无吸收峰，表明蛋白质、核酸等杂质已脱除干净。

3.5 IR光谱分析

3个均一多糖红外光谱见图2，可见三者均具有明显的多糖特征峰；在3400 cm−1附近均具强而宽的O-H伸缩振动吸收峰；PKS-1～3中羧基的C＝O伸缩振动吸收峰分别位于1729、1730、1739 cm−1处，表明均含有糖醛酸结构[23]；3个多糖分别在951、953、953 cm−1处有吸收，提示由吡喃糖环醚键（-C-O-C-）的非对称伸缩振动引起；此外，吸收峰874、890、890 cm−1表明3个多糖均具有β糖苷键（C1-H的弯曲振动）。因此，通过红外光谱可知，PKS-1～3为酸性多糖，具有β吡喃糖苷键构型。

图2 滇黄精多糖的IR光谱

3.6 单糖组成及物质的量比分析

单糖混合对照品溶液与PKS-1～3水解产物的PMP衍生色谱图见图3。经与对照品保留时间比较，可见PKS-1单糖组成主要为-甘露糖、-核糖、-半乳糖醛酸、-盐酸氨基葡萄糖、-葡萄糖醛酸、-半乳糖、-葡萄糖、-木糖、-阿拉伯糖、-岩藻糖，其物质的量比为111.3∶32.2∶55.5∶35.7∶67.4∶15.0∶3.4∶0.1∶70.7∶173.7；PKS-2单糖组成为-甘露糖、-半乳糖醛酸、-盐酸氨基葡萄糖、-葡萄糖醛酸、-半乳糖、-葡萄糖、-木糖、-阿拉伯糖、-岩藻糖，物质的量比为118.7∶29.9∶13.7∶41.6∶7.3∶2.3∶8.9∶43.2∶75.5；PKS-3单糖组成为-甘露糖、-鼠李糖、-半乳糖醛酸、-盐酸氨基葡萄糖、-葡萄糖醛酸、-半乳糖、-葡萄糖、-木糖、-阿拉伯糖、-岩藻糖，其物质的量比为82.4∶1.0∶21.8∶8.4∶25.0∶3.7∶1.0∶4.4∶28.9∶23.9。

a-对照品 b-PKS-1 c-PKS-2 d-PKS-3 1-PMP 2-D-甘露糖 3-D-核糖 4-L-鼠李糖 5-D-半乳糖醛酸 6-D-盐酸氨基葡萄糖 7-D-葡萄糖醛酸 8-D-半乳糖 9-D-葡萄糖 10-D-木糖 11-D-阿拉伯糖 12-L-岩藻糖

3.7 抗氧化活性评价

由于PKS-3得率较低，未能收集到足够样品用于抗氧化能力测试。PKS、PKS-1和PKS-2的总还原能力、·OH及DPPH自由基的清除能力如图4所示。由图中可见，PKS、PKS-1和PKS-2均具有一定的还原能力，在0.2～8.0 mg/mL，3个多糖对DPPH自由基和·OH自由基清除的能力，随着质量浓度的增加，清除率也随之增加，呈明显量效关系；在清除DPPH自由基能力方面，当质量浓度小于1 mg/mL时，PKS和PKS-1、PKS-2的自由基清除能力差别不显著；当质量浓度大于1 mg/mL时，PKS对DPPH自由基的清除能力明显优于PKS-1、PKS-2，并且差别逐渐增大；此外，在质量浓度在0.2～8.0 mg/mL时，3个多糖的总还原能力、·OH及DPPH自由基的清除能力，抗氧化能力均为PKS＞PKS-2＞PKS-1。

a-总还原力 b-DPPH自由基清除能力 c-·OH自由基清除能力

4 讨论

本研究采用分级沉淀法结合柱色谱分离方法，从PKS的50%、70%醇沉部位分离得到3个均一多糖（PKS-1～3），研究表明3个均一多糖的相对分子质量分别为85 017.83、266 084.76和474 799.22。UV光谱结果表明，3个均一多糖中的蛋白质、核酸等杂质已被有效去除；IR光谱表明，PKS-1～3为酸性多糖，具有β吡喃糖苷键构型。PMP-HPLC衍生化结果表明，3个均一多糖的单糖组成均含有-甘露糖、-半乳糖醛酸、-葡萄糖醛酸、-半乳糖、-阿拉伯糖和-岩藻糖，其中PKS-1及PKS-3还分别含有-核糖和-鼠李糖，且单糖组成物质的量比有一定差异。总还原力、DPPH和羟自由基清除力研究显示，滇黄精PKS和均一多糖PKS-1、PKS-2均具有一定的抗氧化活性，3个多糖的总还原能力、·OH自由基及DPPH自由基的清除能力均为PKS＞PKS-2＞PKS-1。其中总多糖PKS的抗氧化活性较均一多糖强，这一结论与有关学者对仙人掌多糖的相关研究结果一致[24]。其原因可能是PKS1和PKS2为从90%的醇沉物中分离得到，而总多糖PKS还包括了95%的醇沉物，总多糖的抗氧化活性可能为多种成分协同作用的结果，这一推测亦被其它学者证实[25]。本研究为滇黄精抗氧化活性成分的研究及抗衰老药物和功能性食品的开发利用奠定了科学基础。

利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突

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Separation, physicochemical properties and anti-oxidant activities of three polysaccharides from

WANG Jing1, TAO Ai-en1, YANG Yan2, YANG Jian-bo3, YAN Ren-yi1, 4, DUAN Bao-zhong1

1. College of Pharmaceutical Science, Dali University, Dali 671000, China 2. Yunnan Provincial Academy of Science and Technology, Kunming 650051, China 3. National Institutes for Food and Drug Control, Beijing 100050, China 4. Tianjin Ubasio Biotechnology Group Co., Ltd., Tianjin 300132, China

To investigate the physicochemical properties and antioxidant activities of homogeneous polysaccharides isolated from.The polysaccharides (PKS) were extracted with hot water, followed by precipitating with 50% and 70% alcohol precipitation site. Three homogeneous polysaccharides were purified by DEAE-Sepharose fast flow ion column and Sephadex G-100 gel column chromatography from PKS. The monosaccharide composition and molecular ratio, molecular weight and structural analysis of homogeneous polysaccharides were detected by pre-column derivatization HPLC, HPGPC-ELSD chromatograms and infrared spectroscopic, respectively. The antioxidant activities of polysaccharides were evaluated by the reducing power, DPPH free radical and hydroxyl rdical scavenging ability.Three homogeneous polysaccharides (PKS-1, PKS-2, PKS-3) were obtained from 50% and 70% alcohol precipitation site. Their monosaccharide composition was mainly-mannose,-GalA,-GlcA,-galactose,-arabinose and-fucose, and with a small amount of-ribose,-rhamnose in PKS-1 and PKS-3, respectively. The molecular weight of PKS-1, PKS-2, PKS-3 was 85 017.83, 266 084.76, and 474 799.22, respectively. The order of antioxidant activities was as follows: PKS＞PKS-2＞PKS-1.Three polysaccharides were obtained from PKS with pyranoid rings, β type of anomeric carbon configuration and similar monosaccharide composition. Antioxidant activity test showed that PKS, PKS-1 and PKS-2 exhibited some antioxidant activity in a dose-dependent manner. This research may provide the theoretical basis for scientists researching antioxidant components, searching for anti-aging drugs and developing functional food from.

Coll. et Hemsl.;-mannose;-GalA;-GlcA;-galactose;-arabinose;-fucose; physicochemical characteristic; antioxidation

R286.2

A

0253 - 2670(2021)16 - 4789 - 08

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.16.004

2021-03-06

国家自然科学基金资助项目（31460086）；云南省重大科技专项（202002AA100007）；大理大学创新团队项目（ZKLX2019318）；云南省院士专家工作站；云南省青年拔尖人才支持计划（段宝忠）

王 婧，硕士研究生，研究方向为中药资源与鉴定。E-mail: jwang@yntcm.ac.cn

陶爱恩，研究方向为中药资源。Tel: (0872)2257401 E-mail: 2515073996@qq.com

段宝忠，博士，教授，研究方向为中药资源与鉴定。Tel: (0872)2257401 E-mail: bzduan@126.com

[责任编辑 时圣明]