马拉色菌感染对寻常型银屑病患者血清SP、Th1/Th2有关因子的影响及与病情关联性

曾令斌 陆捷洁 吴伟伟 韩秋月 王爱民

[摘要]目的：探討马拉色菌感染对寻常型银屑病（Psoriasis vulgaris，PV）患者血清P物质（Substance P，SP）、Th1/Th2有关因子的影响及与病情关联性。方法：选取2017年4月-2019年10月笔者科室就诊的62例马拉色菌感染PV患者为感染组，同期62例未感染马拉色菌PV患者为未感染组。对比两组患者一般资料、血清SP、Th1/Th2有关因子[白细胞介素-10（Interleukin-10，IL-10）、白细胞介素-4（Interleukin-4，IL-4）、白细胞介素-2（Interleukin-2，IL-2）、干扰素-γ（Interferon-γ，INF-γ）、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）]水平，Spearman相关系数分析马拉色菌感染与患者血清SP、Th1/Th2有关因子表达的关联性，并比较不同马拉色菌密度感染患者病情程度，分析马拉色菌密度与病情程度的相关性。结果：感染组血清SP、Th2有关因子水平高于未感染组，血清Th1有关因子水平低于未感染组（P<0.05）;感染组病情程度为重度患者马拉色菌密度显著高于中度、轻度患者（P<0.05）;血清SP、Th2有关因子水平与马拉色菌感染呈正相关，血清Th1因子水平与马拉色菌感染呈负相关，马拉色菌密度与感染组患者病情程度呈正相关（P<0.05）。结论：马拉色菌感染PV患者存在血清SP、Th1/Th2有关因子异常波动情况，其机制可能是马拉色菌感染后引起的免疫异常，进一步增加马拉色菌增殖活性，加重病情，临床可根据上述因子表达情况制定治疗方案。

[关键词]马拉色菌;寻常型银屑病;P物质;Th1;Th2;白细胞介素-4;干扰素-γ

[中图分类号]R758.63    [文献标志码]A    [文章编号]1008-6455（2021）07-0058-04

Effect of Malassezia Infection on Serum SP， Th1/Th2 Related Factors in Patients with Psoriasis Vulgaris and Its Correlation with the Disease

ZENG Ling-bin， LU Jie-jie， WU Wei-wei， HAN Qiu-yue， WANG Ai-min

[Department of Dermatology Ward 1， Hainan Provincial Dermatology Hospital （Hainan Provincial Center for Dermatology and Venereal Disease Control）， Haikou 570000， Hainan，China]

Abstract： Objective  To investigate the effect of Malassezia infection on substance P （SP） and Th1/Th2 related factors in patients with psoriasis vulgaris （PV） and their relationship with disease. Methods  From April 2017 to October 2019， 62 patients with PV infected with Malassezia in our hospital were selected as the infection group， and 62 patients without PV infected with Malassezia were selected as the uninfected group in the same period.Compare the general information of two groups， serum SP， Th1/Th2 related factors [Interleukin-10 （IL-10）， Interleukin-4 （IL-4）， Interleukin-2 （IL-2）， Interferon-γ （INF-γ）， Tumor necrosis factor-α （TNF-α）] levels of the two groups.Spearman correlation coefficient analysis of the correlation between Malassezia infection and the expression of SP， Th1/Th2 related factors in patients' serum，the disease severity of patients with different Malassezia density infections was compared， and the correlation between the density of Malassezia bacteria and the disease severity was analyzed. Results  The levels of serum SP and Th2 related factors in the infected group were higher than those in the uninfected group， and the levels of serum Th1 related factors were lower in the uninfected group （P<0.05）.The severity of the infection group was that the density of malassezia in severe patients was significantly higher than that of moderate and mild patients （P<0.05）.The levels of serum SP and Th2 related factors were positively correlated with Malassezia infection， the serum Th1 factor levels were negatively correlated with Malassezia infection， and the density of Malassezia bacteria was positively correlated with the disease severity of patients in the infection group （P<0.05）. Conclusion  The abnormal fluctuations of serum SP and Th1/Th2 related factors in patients with PV infected by Malassezia may be caused by the immune abnormality after Malassezia infection，it may further increase the proliferation activity of Malassezia and aggravate the disease，clinical treatment can be formulated according to the expression of the above factors.

Key words： malassezia; psoriasis vulgaris; substance P; Th1; Th2; Interleukin-4; Interferon-γ

目前，寻常型银屑病（Psoriasis vulgaris，PV）发病机制尚未明确，有研究认为，可能与多种炎性因子大量聚集在组织皮损处诱发局部炎症、免疫损害有关[1-2]。此外，还有研究显示，真菌可作为超抗原或交叉抗原介导PV发生、发展过程，常见真菌为马拉色菌[3]。马拉色菌是寄生在正常人体皮肤的一种嗜脂性酵母菌，若宿主皮肤微环境异常改变或防御功能减弱，马拉色菌可大量繁殖并诱发多种皮肤疾病，其致病机制源自菌体分解细胞脂质引起细胞形态学改变、凋亡，且可通过影响机体Th细胞亚群分化诱发免疫损害，加重皮肤疾病[4-5]。本研究通过探究马拉色菌感染对PV患者血清P物质（Substance P，SP）、Th1/Th2有关因子的影响及与病情关联性，旨在为临床病情评估、完善治疗方案提供参考。现报道如下。

1  资料和方法

1.1 一般资料：选取2017年4月-2019年10月笔者医院就诊的62例马拉色菌感染PV患者为感染组，同期62例未感染马拉色菌PV患者为未感染组。纳入标准：①符合PV诊断标准[6];②经真菌镜检明确是否存在马拉色菌感染，感染组马拉色菌密度“+”及以上;③患者知情研究并签署同意书。排除标准：①近2个月内接受相关治疗者;②伴严重营养不良者;③伴恶性肿瘤或其他系统性疾病者;④伴其他皮肤疾病者。本研究经笔者医院医学伦理委员会审批通过。

1.2 方法：两组均检测血清SP、Th1/Th2有关因子水平。

1.2.1 血清SP检测：以真空非抗凝管采集空腹肘静脉血2ml，离心15min（半径8cm，转速3 000r/min），取血清，置液氮保存，待测。武汉默沙克生物科技有限公司化学发光免疫分析法试剂盒测SP水平。

1.2.2 同法检测血清SP、Th1/Th2有关因子[白细胞介素-10（Interleukin-10，IL-10）、白细胞介素-4（Interleukin-4，IL-4）、白细胞介素-2（Interleukin-2，IL-2）、干扰素-γ（Interferon-γ，INF-γ）、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）]水平。操作步骤同血清SP检测，均由资深专科医师参考试剂盒说明书规范完成。

1.3 观察指标：①对比两组一般资料，采取自制一般资料调查问卷，包括年龄、性别、体质量、病程、合并症、疾病分期、病情程度、银屑病皮损面积和严重程度指数（PASI）。PASI评分：重度PASI评分>12分;中度PASI评分6～11分;轻度PASI评分<6分;②对比两组血清SP、Th1/Th2有关因子（IL-10、IL-4、IL-2、INF-γ、TNF-α）水平;③分析马拉色菌感染与患者血清SP、Th1/Th2有关因子表达关系;④对比不同病情程度患者马拉色菌密度。马拉色菌密度检测：用1cm宽透明胶带在皮损处取材，以相同力度将胶带紧贴皮肤5s，此后将胶带均匀贴附于滴有真菌荧光染色液的载玻片上，荧光显微镜（日本奥林巴斯BX51TF）观察马拉色菌，计数，于孢子密集区读取5个高倍镜视野菌量，取均数，≤5个记“-”;6～15个记“+”;16～30个记“++”;>30个记“+++”;⑤分析马拉色菌密度与患者病情程度相关性。

1.4 统计学分析：采用SPSS 22.0统计分析软件，计数资料以率表示，两组间比较采用χ2检验;相关性以Spearman分析，符合正态分布的计量资料以（x?±s）表示，两组间比较采用t检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2  结果

2.1 两组一般资料：两组年龄、体质量、病程、性别、合并症及疾病分期相比，差异无统计学意义（P>0.05）;感染组病情程度、PASI评分高于未感染组（P<0.05）

2.2 两组血清SP、Th1/Th2有关因子水平：感染组血清SP、Th2有关因子水平高于未感染组，血清Th1有关因子水平低于未感染组（P<0.05）。

2.3 马拉色菌感染与患者血清SP、Th1/Th2有关因子表达关系：Spearman相关性分析，血清SP、Th2有关因子水平与马拉色菌感染呈正相关，血清Th1因子水平与马拉色菌感染呈负相关（P<0.05）。

2.4 不同病情程度患者马拉色菌密度：感染组重度患者马拉色菌密度显著高于中度、轻度患者（P<0.05）

2.5 马拉色菌密度与患者病情程度相关性：经Spearman相关性分析显示，马拉色菌密度与感染组患者病情程度呈正相关（r=0.578，P<0.001）。

3  讨论

PV是临床常见易复发性皮肤疾病，几乎不可治愈，发病机制尚未明确，可能与感染、免疫等多种因素有关[7-8]。近年研究显示，T细胞介导自身免疫异常与PV发病、发展关系密切[9]。

3.1 马拉色菌感染与机体免疫关系：微生物感染是机体免疫异常的重要诱因，正常寄生真菌诱导PV逐渐引起临床重视[10]。研究发现，急性发作期PV患者普遍存在马拉色菌特异性抗体阳性情况[11]。本研究结果显示，马拉色菌感染患者病情程度、PASI评分高于未感染患者（P<0.05）。基于上述研究推测，马拉色菌感染可能通过介导免疫损害加重PV患者易感性。马拉色菌入侵机体初期可通过刺激非特异性免疫细胞生成细胞因子激活Th细胞增殖、分化，造成Th1/Th2平衡紊乱，继而影响机体免疫功能[12-13]。本研究发现，PV患者普遍存在血清Th1、Th2有关因子异常表达情况，且感染组波动更显著（P<0.05）。Th1主要介导细胞免疫，所生成细胞因子包括TNF-α、INF-γ、IL-2等。INF-γ是體内具有双向调节功能的重要免疫调节因子，可抵御真菌、细菌及病毒感染，抑制肿瘤细胞生成[14];IL-2为趋化因子家族成员，由活化T细胞生成，能刺激活化免疫细胞，增强机体抗微生物感染能力[15]。Th2所分泌IL-10、IL-4细胞因子，负责介导机体体液免疫过程，能下调抗原递呈细胞、Th1细胞活性[16]。IL-10是同型二聚体细胞因子之一，功能主要体现在抑制Th1细胞活性、抗炎等方面，同时能阻断IFN-γ、TNF-α分泌过程;IL-4在适应性及体液免疫中扮演关键角色。正常情况，Th1/Th2处于动态平衡，一旦平衡打破，则表现机体免疫紊乱。所构建豚鼠马拉色菌感染模型中IL-10、IL-4表达显著降低，TNF-α、INF-γ、IL-2表达显著升高，说明马拉色菌定植感染可导致机体产生系统性免疫反应[17]。本研究结果显示，感染组血清Th2有关因子水平高于未感染组，血清Th1有关因子水平低于未感染组，且表达水平与马拉色菌感染关系密切（P<0.05）。分析大面积或严重马拉色菌感染可降低皮肤屏障功能及防御能力，不仅表现于局部皮肤，且能通过介导角质层损害、脂质分解作用下诱导Th1/Th2漂移。

3.2 马拉色菌感染与血清SP关系：SP是一种神经肽，能通过刺激角质生成、促进细胞增殖等过程，调节机体免疫反应、诱发皮肤瘙痒，PV患者临床体征、症状均与炎症因子大量聚集有关，本研究已证实，且部分患者自觉不同程度瘙痒。国外有研究显示，PV患者外周血及皮损组织中SP含量显著升高[18]。本研究显示，感染组血清SP高于未感染组（P<0.05），说明马拉色菌感染可进一步诱导SP表达。分析机制可能是马拉色菌感染侵害下含SP神经被破坏，外周血释放增加，引起Koebner现象;机体防御性反应儿茶酚胺代谢紊乱，促使SP生成增加。本研究结果还显示，马拉色菌感染与患者血清SP表达呈正相关（P<0.05），说明马拉色菌感染能进一步介导SP表达，与上述机制分析一致。

3.3 马拉色菌感染与PV病情程度关系：本研究结果还显示，随马拉色菌密度升高，PV患者病情呈加重趋势（P<0.05）。吴红梅等[19]研究指出，中重度女性患者面部马拉色菌密度多于轻度患者，但躯干上部、男性躯干及面部马拉色菌密度与病情程度无关。有研究显示，重度PV患者头颈部皮损区马拉色菌密度是健康者、中轻度患者的2～5倍[20]。本研究进一步分析，马拉色菌密度与感染组患者病情程度呈正相关（P<0.05）。与个别报道不一致，分析PV病情程度不仅取决于皮表马拉色菌密度、皮损性质，还受入侵体内马拉色菌量及各种细胞因子表达影响，需后期扩大样本容量，多因素分析马拉色菌密度与PV病情程度的关系。

综上可知，马拉色菌感染PV患者存在血清SP、Th1/Th2有关因子异常波动情况，其机制可能是马拉色菌感染后引起免疫异常，进一步增加马拉色菌增殖活性，加重了病情，临床可根据上述因子表达情况制定治疗方案。

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[收稿日期]2020-04-26

本文引用格式：曾令斌，陆捷洁，吴伟伟，等.马拉色菌感染对寻常型银屑病患者血清SP、Th1/Th2有关因子的影响及与病情关联性[J].中国美容医学，2021，30（7）：58-61.