肺结核病人行痰结核杆菌检查的意义及必要性分析

许悦

【摘要】目的：肺结核病人行痰结核杆菌检查的意义及必要性分析。方法：研究自医院抽取的16869例入院疑似患者，时间段为2020年1月至2021年1月期间，所有患者接受涂片培养（金标准）后，其中12660例接受痰抗酸染色冷染法检查，其中4209例结核DNA检查;分析痰抗酸染色冷染法、结核DNA检查的结果。结果：以涂片诊断结果为金标准下，对12660例患者行痰抗酸染色冷染法诊断，阳性患者为321例，其中217例与病理诊断结果相同，符合率90.07%，其敏感度為14.72%，特异度为99.07%，阳性率为67.60%，阴性率为89.91%。以结核DNA检查结果为金标准下，对4209例患者行痰抗酸染色冷染法诊断，阳性患者为331例，其中267例与病理诊断结果相同，符合率99.41%，其敏感度为91.44%，特异度为98.37%，阳性率为80.66%，阴性率为99.36%。两种检查方式的特异度差异小，差异无统计学意义（P>0.05），结合DNA检查方法的符合率、敏感度、阳性率、阴性率均高于抗酸染色冷染，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：结核DNA检查检出率较高、能够对结核病的判断、药物疗效、控制感染有着实用价值。

【关键词】肺结核;痰结核杆菌检;意义;必要性

现阶段结核病已成为严重威胁人类健康的传染病。肺结核痰液中结核分枝杆菌是临床诊断肺结核或鉴别肺结核等其他疾病的关键条件。检测的结核分枝杆菌方法以痰结核DNA、涂片检测为主。涂片方法调整很简单，准确率也较高，但较低的阳性率培养时耗时较多，难以满足临床需要。痰结核DNA、痰抗酸染色冷染法的技术已被广泛应用于结核病的诊断，但在实验应用中还存在部分问题，如敏感性和特异性可能因为检测中的污染问题受影响等，这些问题可能导致痰结核DNA、痰抗酸染色冷染法产物出现相互污染，出现假阳性效果。因此本次研究选取我院疑似肺结核患者运用涂片、痰抗酸染色冷染法、痰结核DNA检查，观察检查的精确度。

1 资料与方法

1.1 一般资料

研究自医院抽取16869例入院疑似患者作为研究对象，时间段为2020年1月至2021年1月期间，所有患者接受涂片培养（金标准）后，其中12660例接受痰抗酸染色冷染法检查，其中4209例结核DNA检查;分析痰抗酸染色冷染法、结核DNA检查的结果。痰抗酸染色冷染法，男6672例，女5988例，年龄20岁～75岁，平均年龄（47.5±4.17）岁。结核DNA检查，男2193例，女2016例，年龄20岁～78岁，平均年龄（48.1±4.25）岁。两组资料差异（P>0.05）。

1.2 方法

所有患者在清晨从肺深部咳出痰留于一次性塑料瓶或夹层烧杯内。

1.2.1 12660例患者使用手工冷染法 选择脓性痰液、干酪样痰液，增等体2%NaH液化，放入涡旋器中震荡，离心10min，速度3000r/min，再使用新拨片取浓缩痰液30μl涂椭圆形大约2.5cm×1.5cm，共涂3片，干燥后使用火固定。不加热静置10 min，水洗。加脱色液，脱色到涂片无红色为止，水洗，在使用复染液，复染0.5min～1min，水洗，等干燥后再实施镜检。使用试剂为珠海贝索生物有限公司的抗酸染色液（冷染法）作为染液，进行测定。

1.2.2 结核DNA检查4209例 提取试剂为圣湘生物科技股份有限公司的结核DNA提取试剂;扩增试剂为圣湘生物科技股份有限公司的结核DNA扩增试剂;扩增仪为上海宏石医疗科技有限公司的SLAN-96P全自动医用PCR分析系统。使用痰标本进行液化30 min再检验。

1.3 效果判定

分析痰抗酸染色冷染法、结核DNA检查的结果。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0统计学软件进行数据分析。计数资料采用（%）表示，进行x²检验，计量资料采用（x±s）表示，进行t检验，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 抗酸染色冷染法准确率分析

以涂片诊断结果为金标准下，对12660例患者行痰抗酸染色冷染法诊断，阳性患者为321例，其中217例与病理诊断结果相同，符合率90.07%，其敏感度为14.72%，特异度为99.07%，阳性率为67.60%，阴性率为89.91%，见表1。

2.2 结核DNA检查分析

以结核DNA检查结果为金标准下，对4209例患者行痰抗酸染色冷染法诊断，阳性患者为331例，其中267例与病理诊断结果相同，符合率99.41%，其敏感度为91.44%，特异度为98.37%，阳性率为80.66%，阴性率为99.36%，见表2。

2.3 两种检查方法准确率比较

两种检查方式的特异度差异小，差异无统计学意义（P>0.05），结合DNA检查方法的符合率、敏感度、阳性率、阴性率均高于抗酸染色冷染，差异具有统计学意义（P<0.05），见表3。

3 讨论

2020年结核病全球报告指出：结核病（TB）是一种传染性疾病，是导致健康状况不佳的主要原因，是全球十大死因之一，也是单一感染原的主要死因（居HIV/AIDS之上）。结核病是由结核分枝杆菌引起的，当结核病患者将细菌排入空气时，结核杆菌就会传播，当对特意效应T淋巴细胞被机体感染结核杆菌后其活化分泌释放γ-NF。对于肺结核的症状主要为结核痰杆菌诊断依据，临床使用X射线诊断为辅助检测条件，诊断准确率较低，特异性不佳，对于肺结核患者而言，症状不典型，易诊断为同病异症、同症异病等。菌阴肺结核患者的细菌学诊断依据的敏感度较低，因此诊断效果不理想。现阶段结核患者的主要症状表现为：低热、咳嗽、盗汗、咯血等，普遍只有轻微表现，有症状患者主诉表达中，大部分均与结合患者有密切接触史，并且缺少症状证实。结核病诊断主要方式仍然是X线，需要与除肺炎、肺癌等疾病外，其他疾病一起阅片，包括放射科医师和高级临床工作人员。X线以片絮状、结节状阴影为主，空洞、干酪性病变少，病变位置小，通常在1个～2个肺野中。还能够使用如血沉、PCR、PPD等实验进行综合分析判断，进行全面分析以支持诊断。如果在诊断确定之前X线发生变化，并将错误诊率降至最低，则也可使用10天左右的抗生素，以检查症状是否有所改善。或者使用纤维支气管镜检查、吸出物涂片、病理活检、培养检查、细胞检查或者bactec培养和分子技术，可大幅度减少痰涂阴性患者医疗延迟。痰涂片是指将液体污染到玻璃片上进行检查。检验科医生难以使用酸性脱色剂实施脱色。提取痰标本进行涂片、染色并检查在显微镜下检测。如果痰中有细菌就易辨认，甚至可粗略地判断是哪种细菌。因此，痰涂片是一种简单且经济有效方法，可快速获得初步结果。

痰涂片阴性患者能够检测。冷染法：简化工艺，降低液体消耗，改善染色用量能够保护环境。在冷染法第一次染色时需要加3%碳酸复红溶液，但又因为温度低，菌体可能着色较浅而无法染色，再实施染色时，增加染色时间能够增加着色率，但是着色可能不牢固，若是对阳性涂片不作出保护，在常温下保存后，可能造成褪色。因此其检出效果比结核DNA低。原因可能是结核分歧杆菌细胞壁含有大量脂质，脂质被肽聚糖包围。脂质主要由磷、脂肪酸和蜡组成。因此利用手工冷染法分枝杆菌菌体染色效果不佳，通过加热和延长染色时间才能够使其着色。但分枝杆菌的分枝菌酸在结合染料后，使用酸性脱色剂脱色困难。

在结核患者中可检测到痰结核DNA，又因为现阶段不可能快速诊断痰结核DNA，因此可通过荧光定量检测结核患者实时检测患者痰结核DNA。通过对4209例患者实施痰结核DNA检测结果显示，痰结核DNA指标是一个有效性指标。患者的痰结核DNA检测为阳性说明，在结核病实施痰结核DNA能够增加准确率及诊断率，此外使用痰液标本取材污染机会减少并能够做到标准化定量，有着冷染法无法比拟的优越性。在处理前不再需要相同样本，标准化测量方法简单，以后还可使用结核杆菌DNA和ADA生物特征进行相关研究。对肺结核病人进行痰液检查，可诊断出抗酸杆菌，均能够确诊为传染性肺结核疾病。如果患者表现症状为肺结核疾病的典型症状，但痰结检查为无抗酸杆菌显示，就可确定为疑似结核病患者。我国肺结核病人治疗重点是对肺结核病人早期发现和治疗，肺结核病人对肺结核疾病治疗至关重要。痰结核DNA检测方法具有精度高、成本低、检测时间短等优点。

本次研究结果显示：以涂片诊断结果为金标准下，对12660例患者行痰抗酸染色冷染法诊断，阳性患者为321例，其中217例与病理诊断结果相同，符合率90.07%，其敏感度为14.72%，特异度为99.07%，阳性率为67.60%，阴性率為89.91%。以结核DNA检查结果为金标准下，对4209例患者行痰抗酸染色冷染法诊断，阳性患者为331例，其中267例与病理诊断结果相同，符合率99.41%，其敏感度为91.44%，特异度为98.37%，阳性率为80.66%，阴性率为99.36%。两种检查方式的特异度差异小，差异无统计学意义（P>0.05），结合DNA检查方法的符合率、敏感度、阳性率、阴性率均高于抗酸染色冷染。此结果表明，痰结核DNA方法对肺结核可疑患者阳性检出率较高，有较高的敏感度，所以在临床诊断中，可对疑似肺结核患者实施痰培养检测。

综上所述，结核DNA检查检出率较高、能够对结核病的判断、药物疗效、控制感染有着实用价值。