VEGF和MMP-10在上皮性卵巢癌发生、发展中的作用及预后分析

董雪茹 王鹏远

上皮性卵巢癌是1种常见的妇科恶性肿瘤，由于许多确诊时处于晚期，5年生存率不足40%。导致肿瘤发生、发展的1个关键因素是肿瘤新生血管。目前所知的，作用最强的促血管生长因子，就是血管内皮生长因子。血管内皮生长因子(VEGF)会增加癌细胞的浸润能力，以及肿瘤血管的通透性，促进内皮细胞增殖，诱导新生血管形成，使肿瘤发展、转移。肿瘤新生血管对于卵巢肿瘤的生长、浸润、转移都有重要的作用[1-3]。基质金属蛋白酶10(MMP-10)可以激活大多数基质金属蛋白酶9(MMP-9)前体，一种间质溶解素类，激活其他基质金属蛋白酶[4-6]。为探究VEGF和MMP-10在上皮性卵巢癌发生、发展中的作用及预后关系，特选取我院80例上皮性卵巢癌患者进行研究，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取我院80例上皮性卵巢癌患者。从2017年12月到2018年12月。患者年龄25～70岁，平均年龄(50.2±3.7)岁。其中有Ⅰ期12例，Ⅱ期19例，Ⅲ期39例，Ⅳ期10例。低分化癌66例，高、中分化癌14例。黏液性癌33例，浆液性癌47例。同时选取30例交界瘤患者。40例良性瘤组织患者。

1.2 方法

选取标本，使用10%甲醛固定，用石蜡包埋，切片，进行免疫组化染色，主要是VEGF和MMP-10。免疫组化染色，已知的基质金属蛋白酶10(MMP-10)阳性结肠肿瘤，为阳性对照。已知的血管内皮生长因子(VEGF)阳性乳腺肿瘤，作为阳性对照。阴性对照 PBS液，代替一抗。通过半定量方法，分析血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶10(MMP-10)表达。观察MMP-10表达：肿瘤细胞间质、胞浆中，有棕黄色颗粒出现代表阳性。观察VEGF表达：肿瘤细胞胞膜、胞浆，出现棕黄色颗粒代表阳性。使用低倍镜，根据阳性细胞数比值，分为阴性(-)、低度表达(+)、中度表达(++)、高度表达(+++)。阳性表达细胞数超过50%，为高度表达(+++)。阳性表达细胞数为25%～50%，为中度表达(++)。阳性表达细胞数低于25%，为低度表达(+)。无阳性表达细胞，为阴性(-)。

1.3 观察指标

观察不同恶性程度，上皮性卵巢癌免疫组化染色结果，上皮性卵巢肿瘤免疫组化染色的情况，以及上皮性卵巢肿瘤中VEGF和MMP-10表达的相关性。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 不同恶性程度上皮性卵巢肿瘤免疫组化染色结果

如下表1所示，上皮性卵巢肿瘤不同的恶性程度，包括良性瘤、交界瘤、癌，免疫组化染色的结果显示，80例上皮性卵巢癌患者，40例良性瘤组织患者，30例交界瘤患者，VEGF和MMP-10表达存在明显的差异性，根据Kruskal-Wallis H检验，MMP-10：H为60.387，P=0.001，VEGF：0：H为57.914，P=0.001。

表1 不同恶性程度上皮性卵巢肿瘤免疫组化染色结果/例

2.2 上皮性卵巢癌免疫组化染色结果

如下表2所示，80例上皮性卵巢癌，组织学类型黏液性癌33例，浆液性癌47例，免疫组化染色实验结果显示，在黏液性癌、浆液性癌之间，VEGF和MMP-10表达无明显差异，没有统计学意义(P>0.05)，其中VEGF：Z=0.526，P=0.223，MMP-10：Z=0.413，P=0.527。

表2 上皮性卵巢癌免疫组化染色结果/例

47例有腹腔积液，33例无腹腔积液，免疫组化染色结果显示，在有无腹腔积液中，VEGF和MMP-10表达有明显的差异性，有统计学意义(P<0.05)，其中VEGF：Z=-4.297，P=0.001，MMP-10：Z=-2.658，P=0.001。

临床分期：Ⅰ期12例，Ⅱ期19例，Ⅲ期39例，Ⅳ期10例，免疫组化染色结果，在Ⅰ期、Ⅱ期间，Ⅲ期、Ⅳ期间，VEGF和MMP-10表达没有明显差异，无统计学意义(P>0.05)。如果Ⅰ期、Ⅱ期为早期，Ⅲ期、Ⅳ为晚期，VEGF和MMP-10表达有明显的差异性，有统计学意义(P<0.05)，其中VEGF：Z=-5.623，P=0.001，MMP-10：Z=-4.714，P=0.001。

低分化癌66例，高、中分化癌14例，免疫组化染色结果显示，在高、中分化癌，以及低分化癌之间，VEGF和MMP-10表达有明显的差异性，有统计学意义(P<0.05)，其中VEGF：Z=-5.129，P=0.001，MMP-10：Z=-4.325，P=0.001。

预后≥5年有20例，预后<5年的有60例，免疫组化染色结果显示，在预后≥5年，以及<5年之间，VEGF表达有明显的差异性，有统计学意义(P<0.05)，VEGF：Z=-2.856，P=0.001。同时，MMP-10表达没有明显的差异性(P>0.05)，无统计学意义，MMP-10：Z=-0.588，P=0.397。

2.3 上皮性卵巢肿瘤中VEGF和MMP-10表达的相关性

如表3所示，相关系数0.825，P=0.001，在上皮性卵巢肿瘤中，VEGF和MMP-10表达与其呈正相关的关系。

表3 上皮性卵巢肿瘤中VEGF和MMP-10表达的相关性/例

3 讨论

卵巢恶性肿瘤病死率较高，肿瘤侵袭、转移是1个多基因、多阶段、多步骤的过程，与血管生成、移动、降解、黏附等有关。肿瘤细胞对细胞外基质移动、黏附、降解，导致浸润，促进转移。基质金属蛋白酶10(MMP-10)在浸润、转移中发挥着重要的作用。其中血管内皮生长因子(VEGF)发挥着重要的作用[7-9]。肿瘤发生转移的前提，是肿瘤的浸润、侵袭。由于新生血管的形成，使局部肿瘤细胞能够物质代谢，发生转移。与肿瘤组织自身血管生成，以及转移部位密切相关，肿瘤在转移组织中是否可以生存。基质金属蛋白酶10会对其他的基质金属蛋白酶进行激活，被激活的基质金属蛋白酶，与血管内皮生长因子相互诱导，从而促进转移。通过免疫组织化学染色方法，对卵巢肿瘤表达中的MMP-10、VEGF进行检测，从而分析其与预后、病理等关系，有利于为寻求治疗卵巢恶性肿瘤的方法提供参考。在上皮性卵巢癌中，VEGF和MMP-10都呈现高表达的情况，反映了MMP-10、VEGF的表达情况，与上皮性卵巢癌的良性、恶性有密切的关系。VEGF可以对血管内皮增生形成强烈刺激，从而诱导血管生成[10-11]。MMP-10可以对基质中的纤黏蛋白、弹性蛋白、层黏蛋白、糖蛋白蛋白核心等，进行降解，激活其他许多的基质金属蛋白酶。恶性肿瘤组织经常出现坏死，导致组织缺血缺氧，造成VEGF高表达。基质金属蛋白酶是一类蛋白水解酶，依赖Zn2+，降解细胞外基底膜基质。卵巢恶性肿瘤组织，往往伴有浸润、转移，必然出现细胞外基质降解。其中降解中发挥重要作用的就是MMP-10，因此上皮性卵巢癌中，MMP-10呈现高表达，尤其是在浸润、转移中[12-14]。

本次研究显示，在有无腹水中，VEGF和MMP-10表达有明显的差异性，有统计学意义(P<0.05)。如果Ⅰ期、Ⅱ期为早期，Ⅲ期、Ⅳ为晚期，VEGF和MMP-10表达有明显的差异性，有统计学意义(P<0.05)。在高、中分化癌，以及低分化癌之间，VEGF和MMP-10表达有明显的差异性，有统计学意义(P<0.05)。提示VEGF、MMP-10表达与上皮性卵巢癌的有无腹水、病理分级、临床分期，存在明显的差异性。肿瘤只有1 mm3到2 mm3，新的血管还没有生长以前，并且不会转移。肿瘤营养和转移的途径是血管。新血管生成后，转移的风险就会明显增加，肿瘤不断增长。VEGF与上皮性卵巢癌的病理分级、临床分期有关。低分化肿瘤，恶性程度高，肿瘤转移容易发生。有腹水的上皮性卵巢癌患者中，VEGF呈现高表达，尤其是腹水量超过500 ml。VEGF能够使血管的通透性增强，是增加血管通透能力的重要因子。纤维蛋白原、血浆蛋白、液体从血管中外渗，与VEGF有关。VEGF也能够促进肿瘤细胞进入腹腔。产生腹水，对腹膜血管造成进一步刺激，从VEGF中创造条件，腹腔种植肿瘤细胞，腹腔表面的肿瘤细胞，使血管通透性进一步增强，VEGF和MMP-10呈现正相关的关系[15]。MMP-10表达与有无腹水、病理分级、临床分期有关。在病理类型中，黏液性癌、浆液性癌之间，VEGF和MMP-10表达无明显差异，没有统计学意义(P>0.05)。VEGF和MMP-10表达不能帮助判断上皮性卵巢癌的病理类型。与病理类型无关。黏液癌、浆液癌就可以发生浸润、转移，在较早期。本次研究显示，在预后≥5年，以及<5年之间，VEGF表达有明显的差异性，有统计学意义(P<0.05)，MMP-10表达没有明显的差异性(P>0.05)，反映了VEGF表达与上皮性卵巢癌的预后有密切的关系，可以为预后评估提供参考。VEGF在肿瘤的发生、发展中，发挥着重要的作用，是重要的血管生成因子之一，VEGF表达可以作为判定疾病进展的一个标志。在目前研究中，以VEGF为靶点的抗肿瘤血管生成治疗，是关注的热点。

综上所述，VEGF和MMP-10表达与上皮性卵巢癌病理分级、临床分期、有无腹水密切相关，在上皮性卵巢癌的发生、发展中发挥着重要的作用，VEGF表达与上皮性卵巢癌的预后相关，可以作为判断预后的1个指标。