化学发光微粒法检测孕妇抗TP抗体的复检范围探讨*

齐结华，张春利，吴守乐，宦 宇，陈 宇，乐江漫，蔡徐山

上海市嘉定区妇幼保健院检验科，上海 201821

梅毒是由梅毒螺旋体(TP)引起的性传播疾病，传播途径有性接触、输血和垂直传播[1]。全球每年大约有1 000 000例孕妇感染TP[2]，2014-2018年女性梅毒和先天性梅毒的发病率分别上升了172%和185%[3]。由于不能在体外培养TP，梅毒的诊断主要基于血清学试验[4]，血清学试验可分为非特异性类脂抗原试验和特异性密螺旋体抗体试验两大类[5]，临床上通常通过检测抗TP特异性抗体来诊断TP感染，雅培ARCHITECT i2000SR化学发光微粒法(CMIA)检测抗TP抗体，具有灵敏度高、检测周期短、高通量、操作简便等优势，成为实验室常用的筛查方法，但随着其灵敏度的提高，该方法存在一定假阳性[6]。免疫印迹法(WB)的灵敏度、特异度均较高，是目前国际公认的梅毒确证方法[7]，但由于其没有高通量的检测设备，价格昂贵，不适合大批量标本检测。鉴于孕妇人群的特殊性，在进行孕妇TP筛查时，为了保证结果的准确性，有必要建立一个孕妇抗TP抗体S/CO的复检范围。本研究拟以WB为确证试验，对CMIA检测孕妇抗TP抗体进行评价，从而建立CMIA检测孕妇抗TP抗体的复检范围。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2013年8月至2019年9月在上海市嘉定区妇幼保健院经科美Chemclin CLIA系统筛查抗TP抗体S/CO≥1.0的548例孕妇血清标本(标本均进行重名筛选)，分离血清2 mL，-80 ℃保存待检。

1.2仪器与试剂 雅培i2000SR全自动CMIA分析仪及其配套试剂(美国雅培公司产品)。德国欧蒙医学实验诊断股份公司生产的抗TP抗体检测试剂盒。

1.3方法

1.3.1抗TP抗体筛查试验 采用CMIA进行检测，检测结果S/CO≥1.0为抗TP抗体阳性反应，<1.0为阴性反应。

1.3.2抗TP抗体验证试验 采用WB结果进行验证。

1.4统计学处理 采用SPSS19.0软件进行数据处理及统计分析。计数资料以频数表示；采用受试者工作特征(ROC)曲线评估CMIA的检测性能。

2 结 果

2.1CMIA检测抗TP抗体与WB确认结果比较 548例孕妇标本经CMIA检测呈阳性反应490例，阴性反应58例，对S/CO≥1.0的490例孕妇标本进行WB检测，结果为阳性483例，不确定2例，阴性5例，符合率为98.9%(483/488)；对S/CO<1.0的58例孕妇标本进行WB检测，结果为阳性11例，不确定9例，阴性38例，符合率为77.6%(38/49)。见表1。

表1 CMIA检测抗TP抗体与WB确认结果比较(n)

2.2以WB检测结果为标准评估CMIA检测孕妇抗TP抗体的性能

2.2.1以WB检测结果为标准评估CMIA S/CO<1.0的检测性能 去除WB结果为“不确定”的标本，以WB结果为标准绘制ROC曲线。结果显示，CMIA检测孕妇抗TP抗体的曲线下面积为0.984，约登指数最大时(0.921)，CMIA S/CO最佳截断值为0.22，灵敏度为100.0%，特异度为92.1%，见表2、图1。

表2 CMIA(S/CO<1.0)不同截断值的检测性能

图1 CMIA(S/CO<1.0)的ROC曲线分析

2.2.2以WB检测结果为标准评估CMIA S/CO≥1.0的检测性能 去除WB结果为“不确定”的标本，以WB结果为标准绘制ROC曲线。结果显示，CMIA检测孕妇抗TP抗体的曲线下面积为0.986，约登指数最大时(0.979)，CMIA S/CO比值最佳截断值为2.31，灵敏度为97.9%，特异度为100.0%，见表3、图2。

表3 CMIA (S/CO≥1.0)不同截断值的检测性能

图2 CMIA(S/CO≥1.0)的ROC曲线分析

3 讨 论

梅毒的流行在世界范围内对公共卫生产生了严重威胁[8]。妊娠梅毒危害极大，可导致自发性流产、胎儿窘迫、非免疫性水肿、胎儿宫内死亡、死产及新生儿围生期死亡，或导致分娩出有严重后遗症的新生儿，直接危害下一代的健康，给社会造成沉重的负担[9]。大多数孕妇TP感染是潜伏性、无症状的，但超过50%的病例会出现不良妊娠结局[2]，通过对孕妇进行筛查及对梅毒检测结果呈阳性的孕妇进行及时治疗可预防由妊娠梅毒感染引起的围生期不良后果[10]。因此，妊娠梅毒的早诊断、早治疗尤为重要。

CMIA检测抗TP抗体已在国内广泛应用，对于CMIA的复检范围研究结果差异较大，童明宏等[11]研究表明，CMIA检测抗TP抗体的S/CO最佳截断值为4.25；黄文彩等[5]研究建议将CMIA检测抗TP抗体的S/CO灰区设置为1.000～6.815；张薇等[6]研究表明，CMIA检测抗TP抗体的S/CO为1.00～10.99时需要复查；但以上报道均没有针对特定的人群。本研究在原有研究的基础上[12]，扩大标本量，选择应用广泛的CMIA进行孕妇抗TP抗体的筛查。本研究结果显示，CMIA检测孕妇抗TP抗体S/CO≥1.0的标本490例，与WB的符合率为98.9%，ROC曲线分析结果显示，CMIA检测抗TP抗体S/CO最佳截断值为2.31，与曾健等[13]报道的雅培i2000SR检测抗TP抗体的最佳截断值3.02比较接近；CMIA检测孕妇抗TP抗体S/CO<1.0的标本58份，与WB的符合率为77.6%，ROC曲线分析结果显示，CMIA检测抗TP抗体S/CO最佳截断值为0.22。根据本研究结果，建议将CMIA检测孕妇抗TP抗体S/CO的复检范围设置为0.22～2.31，在此范围的孕妇标本均需执行灰区处理程序，应采用WB进行确认，以尽可能减少假阳性或假阴性所造成的后果。

综上所述，虽然CMIA检测孕妇抗TP抗体具有较高的灵敏度和特异度，但由于孕妇是关乎下一代健康的特殊群体，无论是假阳性还是假阴性都会造成严重后果，所以需要检测结果尽可能做到100%准确，故实验室在采用CMIA筛查孕妇抗TP抗体时，需确定进行验证试验的S/CO复检范围。