6种杀菌剂对胶孢炭疽菌和长柄链格孢菌的室内毒力测定

于秀敏，彭 飞，于淑玉，高笑铎，王秀平*

(1 河北科技师范学院 a农学与生物科技学院，b 河北省板栗产业协同创新中心，河北 秦皇岛, 066000；2 河北明德立达农业科技有限公司)

长柄链格孢菌(Alternarialongipes)和胶孢炭疽菌(GlomerellacingulataSpauld.& H.Schrenk)是引起板栗内腐病的主要致病菌[1～3]。苯醚甲环唑、咪鲜胺、唑醚戊唑醇、精甲噁霉灵、嘧霉异菌脲、异菌氟啶胺是目前农业上常用的杀菌剂，具有高效、安全、低毒、较强广谱性的特点，本试验选择上述6种杀菌剂采用菌丝生长速率法对长柄链格孢菌和胶孢炭疽菌进行室内毒力测定。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1供试病原菌 长柄链格孢菌(Alternarialongipes)和胶孢炭疽菌(GlomerellacingulataSpauld.&H.Schrenk)购于北纳创联生物技术有限公司，并将病菌于马铃薯蔗糖琼脂培养基(PDA)上培养，用于菌丝生长速率测定试验。

1.1.2供试药剂 供试6种杀菌剂，药剂名称、生产厂家及试验质量浓度(药剂浓度均为有效成分含量)见表1。

表1 6种杀菌剂生产厂家及试验浓度

1.2 测定方法

采用菌丝生长速率法[4]进行毒力测定。根据预试验结果，将药品配制成试验母液，按照系列稀释的方法，通过浓度初筛试验确定适宜的浓度比范围(表 1)，并以此浓度加入到熔化好的PDA培养基中，充分混匀后将其倒入9 cm直径的一次性培养皿中，制成含系列浓度药剂的 PDA平板(以加入等量无菌水的处理作为对照)。将活化好的供试菌株在无毒PDA培养基上25 ℃培养7 d后，在菌落边缘取直径为1 cm的菌饼，接种于不同处理的含药和空白平板中央，在25 ℃恒温培养箱中光照培养6 d，每个处理5皿，3次重复。采用十字交叉法，测量菌落直径做好记录并计算抑菌率。

菌丝生长抑制率=[(对照菌落直径-菌饼直径)-(处理菌落直径-菌饼直径)]/(对照直径-菌饼直径)×100%

用DPSv 7.05和Excel 2003进行数据统计，计算出有效抑制中浓度EC50值，以此值来表示供试杀菌剂对两种病菌的抑制作用强弱。

2 结果与分析

2.1 6种杀菌剂对长柄链格孢菌菌丝生长速率的影响

6种杀菌剂对长柄链格孢菌分别表现出不同的抑制作用，且抑制效果差异较大。其中25%咪鲜胺和40%异菌·氟啶胺对长柄链格孢菌菌丝生长具有较强的抑制作用，EC50分别为0.963 5 mg·L-1和1.599 0 mg·L-1。且25%咪鲜胺的抑菌效果最佳，是最优的农药制剂选择。其他4种杀菌剂抑菌效果由高到低依次为30%唑醚·戊唑醇、40%嘧霉·异菌脲、10%苯醚甲环唑、32%精甲·恶霉灵(表2)。

表2 6种杀菌剂对长柄链格孢菌菌丝生长的抑制效果

2.2 6种杀菌剂对胶孢炭疽菌菌丝生长速率的影响

6种杀菌剂对胶孢炭疽菌菌丝生长均有不同的抑制作用，6种杀菌剂中25%咪鲜胺和40%异菌·氟啶胺对胶孢炭疽菌的抑制效果明显，EC50分别为0.117 5 mg·L-1和0.511 5 mg·L-1，30%唑醚·戊唑醇悬浮剂的抑制作用也较明显，EC50值为2.328 5 mg·L-1，32%精甲·恶霉灵水分散粒剂抑菌作用最差，它们的EC50值是95.936 8 mg·L-1，表3。

表3 6种杀菌剂对胶孢炭疽菌菌丝生长的抑制效果

3 结论与讨论

本次试验应用 6 种杀菌剂，分别测定了不同浓度的药剂对长柄链格孢菌和胶孢炭疽菌菌丝的抑制作用。从结果可以看出：6种杀菌剂中25%咪鲜胺和40%异菌·氟啶胺对两种病菌的抑制效果最好，30%唑醚·戊唑醇和10%苯醚甲环唑效果较好，而32%精甲·恶霉灵和40%嘧霉·异菌脲对两种病菌效果较差。

据报道，板栗内腐病病菌从6月中旬栗花授粉期开始侵入板栗花柱和栗苞，8月中旬以后侵入的病菌数量逐渐增多，但在近成熟期病菌才侵入种仁[5]。因此，可在板栗授粉前(5月底～6月上旬)和授粉之后(6月下旬～7月上旬)，利用以上效果较好的4种杀菌剂进行喷雾处理，并注意轮换交替使用，可做到有效的抑制引起板栗内腐病的长柄链格孢菌和胶孢炭疽菌的生长，起到预防板栗内腐病的发生及延缓病原菌抗药性的产生。在6种药剂中，咪鲜胺通常作为果品保鲜剂，在板栗储存于运输过程中，还可将咪鲜胺用于板栗保鲜剂，用于板栗储存期间内腐病的防治。依据本次试验结果，下一步可开展田间药效试验，为板栗生产筛选有效药剂，预防板栗内腐病的发生。