冷冻切片与“冷对”石蜡切片技术常见问题与对策

吴杉杉，徐伟铭

术中快速病理诊断技术可在短时间内确定病变性质，为确定手术范围及治疗方案提供有力的科学依据，因此越来越受到临床的重视和依赖。本科室在实际工作中发现冷冻切片和相对应的“冷对”石蜡切片(不包括冷剩切片)在显微镜下有一定比例的差异，本实验收集1 948例标本为分析对象，探讨冷冻切片与“冷对”石蜡切片的影响因素及对策，现介绍如下。

1 材料与方法

1.1 材料收集2019年1～5月浙江省台州医院病理科1 948例行术中快速病理诊断病例的原始冷冻切片和“冷对”石蜡切片，男性734例，女性1 214例，年龄20～83岁。

1.2 方法调阅2019年1～5月病理标本的申请单，调出相应的原始冷冻切片和“冷对”石蜡切片，镜下观察，将两者的诊断结果进行比较，计算冷冻切片诊断与“冷对”石蜡切片诊断的符合率，分析两者不符合的主要因素。

1.3 评判标准参考冷冻切片与常规石蜡切片诊断符合率的评定标准[1]：(1)符合：包括两者的诊断结果完全相同及病变组织的良恶性符合，但分类、分型有差异；(2)不符合：包括冷冻病理诊断结果未给出明确诊断，仅向手术医师提供病变肉眼与镜下所见或倾向性的意见及冷冻病理诊断结果出现良恶性诊断错误。

2 结果

1 948例行术中快速病理诊断标本组织来源分布广泛(表1)，送检组织以乳腺组织最多，其次为肺、甲状腺、卵巢+附件。冷冻切片诊断与“冷对”石蜡切片诊断符合者占98.82%(表2)，不符合者占1.18%。不符合者主要为乳腺、肺、甲状腺以及腋窝淋巴结组织。

表1 术中冷冻切片组织来源分布

表2 冷冻切片与“冷对”石蜡切片诊断对照

3 讨论

术中冷冻制片技术是术中快速病理诊断技术的主要工作之一，有助于明确病变性质、观察恶性肿瘤的浸润情况以及决定患者的治疗方案[1]。术中冷冻切片与石蜡切片的诊断对照已有明确的评判标准，术中冷冻切片延迟诊断和误诊的主要原因已被多次报道且已摸索出一些有效的规避方法[1-7]。但关于冷冻切片与“冷对”石蜡切片的符合率情况鲜有报道。

作者通过回顾分析得到本组冷冻切片与“冷对”石蜡切片诊断符合率为98.82%，不符合率为1.18%。对不符合病例进行分析，总结主要的原因：(1)冷冻切片自身局限，1例甲状腺疾病由于该原因漏诊甲状腺微小乳头状癌，冷冻切片细胞核不易出现异型重叠、核沟、毛玻璃样改变等诊断特点，且人为假象多，故甲状腺微小乳头状癌行术中快速病理诊断存在一定挑战[5]。(2)冷冻切片制片原因，本组1例甲状腺和2例淋巴结组织因修片过度或不足而误诊或漏诊，如甲状腺微小乳头状癌是指肿瘤直径≤1.0 cm的甲状腺乳头状癌，一旦粗修过度就易漏诊。(3)冷冻切片诊断水平欠缺，3例乳腺疾病为早期癌，均因诊断医师经验不足而过低诊断为良性病变。(4)“冷对”石蜡切片制片原因，4例乳腺、9例肺部疾病和3例甲状腺均因常规制片不良导致不符。组织病变较小，病变组织因行冷冻切片而暴露，后续石蜡修片过度或者修片不全，导致切片中病变消失，尤其是甲状腺微小乳头状癌等，也会改变病变性质，如肺部、乳腺微浸润性癌变成原位癌等等。同时无法为后续原位杂交、免疫组化、分子检测、药物分析等检测提供有效切片，将影响确定肿瘤分类分型或制定治疗方案。

为解决以上问题，作者提出如下建议：(1)冷冻切片机、冷冻染色机性能需稳定，试剂需专人配制，减少客观因素，提高冷冻切片的稳定性。(2)提高冷冻切片质量[2]和诊断水平，切片技术员需定期考核，病理医师要充分了解患者病史与症状，且最好由两位病理医师共同阅片，避免误诊和漏诊。(3)改善“冷对”石蜡切片流程。“冷对”标本取材时，包埋盒标记“冷对”字样方便后续操作时重点关注，在包埋时使用不锈钢包埋底模，尽量使组织切片包埋平整，然后切片时切忌过多粗修。Vilcea等[6]和钱立宇等[7]已通过实验证实，连续切片技术可应用于冷冻切片和“冷对”石蜡切片，连续切片技术可更有效地发现肿瘤细胞浸润情况和淋巴结中存在的“微转移”，提高诊断准确性。

综上所述，在术中冷冻切片工作中，我们要从技术和诊断两方面的更多细节入手，提高冷冻切片与“冷对”石蜡切片的诊断符合率，有利于患者疾病的诊断和后续的治疗，避免患者承受不必要的痛苦，减少医患纠纷。