优化五味常青颗粒中青蒿的提取工艺研究

周 衡，宋 祺，申金燕，张艳丽，张 宁，张 旭

（郑州百瑞动物药业有限公司，河南 郑州451163）

五味常青颗粒具有抗球虫作用，兽药标准中的提取方法为水煎煮[1]。项目组分别对不同产地的青蒿按兽药标准中五味常青颗粒提取工艺制备的10批样品进行检测知，鉴别（1）均不合格，供试品与对照药材在薄层色谱图上的斑点对应不一致。经分析知，在鉴别（1）中，青蒿对照药材溶液是经乙醚过夜浸制而成[1-2]，而供试品溶液是水提后浸膏制成颗粒，再经乙醚提取制备所得，即供试品中青蒿药材与对照药材的提取方法有区别。为探其原因，我们对青蒿提取工艺进行优化，比较不同提取方法及不同产地的青蒿药材所制备的颗粒的质量，以生产出符合质量标准的成品颗粒。

1 材料与试剂

青蒿对照药材（中国药品生物制品检定所 批号：121016-201005）；青蒿（安徽亳州、湖南常德、四川酉阳、广西柳州、贵州遵义、广东清远、四川成都等地）；三氯甲烷、乙醚、硫酸、乙醇、甲醇等均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 不同产地青蒿制得的样品质量研究

2.1.1 不同产地青蒿水提制得的样品质量研究

参照《兽药国家标准汇编——兽药地方标准上升国家标准（第二册）》五味常青颗粒提取工艺，对不同产地青蒿制得样品进行质量研究。

青蒿100g、柴胡90g、苦参185g、常山250g、白茅根90g，加10倍量水，煎煮1.5h，过滤，药渣加8倍量水，煎煮1.5h，过滤，合并2次水煎液，浓缩至相对密度为1.28～1.30（60℃），得浸膏。浸膏、糖、糊精按1：3.5：1的比例制成颗粒，干燥，制成350g颗粒，即得。

取颗粒10g，加水25ml使溶解，加乙醚15ml振摇，分取乙醚层，挥干乙醚，残渣加乙醚2ml使溶解，作为供试品溶液。另取青蒿对照药材1g，加乙醚10ml，浸泡过夜，滤过，挥干乙醚，残渣加乙醚5ml使溶解，作为对照溶液。吸取上述2种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚（2：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%的硫酸乙醇溶液，在105℃条件下加热至斑点显色清晰为止。不同产地青蒿水提样品薄层分析结果分别见表1和图1。

由表1和图1可知，不同产地青蒿水煎煮制得样品质量均不符合规定。所以此法不宜作为青蒿提取工艺。

2.1.2 不同产地青蒿不同提取方法制得的样品质量研究

分别考察青蒿乙醚回流、乙醇回流及甲醇回流提取（处方其他4味药材仍采用水煎煮）对制得颗粒质量的影响。

取各产地青蒿药材100g各3份，分别加入乙醚、95%乙醇[3～4]、甲醇各1000mL，水浴60℃～70℃回流1.5h，过滤，药渣再分别加入乙醚、95%乙醇、甲醇各800mL，同法提取1.5h，过滤，合并2次滤液，减压蒸馏浓缩至相对密度为1.28～1.30（60℃），得浸膏。将其他4味药材的浸膏与青蒿浸膏合并后，按比例加辅料制粒，干燥，即得350g。按“2.1.1”五味常青颗粒鉴别（1）的方法对不同产地青蒿不同提取方法所得样品进行薄层分析，见表2和图2。

表1 不同产地青蒿水提样品检测结果

图1 不同产地青蒿水提样品薄层结果

表2 不同产地青蒿不同提取方法制得的样品检测结果

图2 不同产地青蒿乙醚（图A）、乙醇（图B）及甲醇（图C）提取样品薄层结果

由表2知，不同产地青蒿采用乙醚，95%乙醇和甲醇进行提取所得样品均符合规定。图2中3种溶剂提取制得的样品在薄层板上的斑点与对照药材一致，所以三种溶剂都可作为青蒿提取的溶剂，但乙醚和甲醇具有毒性，故以95%乙醇为溶剂。

2.2 不同浓度乙醇提取青蒿的工艺研究

为确定乙醇的最佳浓度同时降低成本，本组考虑对乙醇浓度进一步优化，分别用30%、50%、60%、70%的乙醇回流提取不同产地的青蒿2次（处方其他4味药材仍采用水煎煮），每次1.5h，每次溶剂量分别为10倍、8倍，并以成品颗粒的性状、鉴别及检查项为评价指标。结果见表3、表4和图3。

由表3、表4和图3知，30%乙醇的提取方法较差，其鉴别（1）不符合规定。50%以上乙醇能满足五味常青颗粒质量标准，对鉴别（2）的检测无干扰，且其他项目的检查结果也均符合规定，故以50%乙醇为溶剂。

3 讨论

（1）试验表明，按照《兽药国家标准汇编——兽药地方标准上升国家标准（第二册）》中的提取工艺，对不同产地的青蒿提取，采取沸腾干燥制粒，用薄层色谱法对青蒿进行鉴别检测，色谱图中供试品溶液与对照药材色谱相应位置上的斑点不一致。而改用乙醚、甲醇、95%乙醇对7个产地的青蒿回流提取制得颗粒，其成品的鉴别（1）均符合规定，表明有机溶剂的提取效果优于水煎煮法。

（2）不同浓度乙醇试验可知：30%乙醇效果差，其鉴别（1）不符合规定。50%以上的乙醇能满足五味常青颗粒质量标准，对鉴别（2）的检测无干扰，且成品的其他项目的结果也均符合规定，表明50%乙醇回流提取对成品颗粒质量无影响。

表3 不同浓度乙醇对成品质量的影响

图3 不同浓度乙醇提取样品薄层结果

表4 不同浓度乙醇对成品质量中其他项目的影响

4 结束语

本文改进五味常青颗粒药典的提取工艺，单独醇提青蒿，制备五味常青颗粒，与药典规定鉴别相符，故采用如下青蒿提取工艺：以50%乙醇回流提取2次，每次1.5h，每次固液比1g：10ml、1g：8ml。