朱蓓蓓
(恩施职业技术学院,湖北 恩施 445000)
犬螨虫病又名犬疥癣,是以患部剧痒、脱毛、结痂为主要临床症状的一类慢性寄生性传染病,该病的传染性非常强,宠物犬感染后稍不注意就会传染给人,是当前阻碍宠物行业发展的主要疫病之一[1]。目前对于宠物犬螨虫的预防和治疗,临床上多使用伊维菌素等化学药物,抗生素治疗动物螨病具有作用快、疗效高、使用方便等优点[2],但抗生素大量使用会产生耐药性、药物残留及环境污染等问题。当前研制广谱、高效、无残留、无毒、经济、方便,尤其是能够适用于宠物医院及基层兽医站使用和推广的杀虫药十分必要。中药用于人类疾病的防治具有悠久的历史,但在动物疫病防治中的应用尚处于起步阶段。与抗生素相比,中草药不良反应较少,不产生耐药性,是研发新型动物抗菌药物的重要来源[3]。鉴于此,本研究比较分析了花椒制剂、蒜酊合剂、复方制剂、复方橘皮素、小兰杜制剂5种中药制剂对宠物犬螨虫的体外杀灭效果,以期筛选出对宠物犬螨虫具有杀灭效果的最佳中药制剂,为天然杀螨剂的开发与研制提供参考数据,为中药在宠物犬螨虫防治中的应用奠定基础。
花椒制剂、蒜酊合剂、复方制剂(百部、苦参、槟榔、蛇床子、沙参5味草药等比例混合)、复方橘皮素、小兰杜制剂5种中药制剂,各取50 g分别水煎,将药液过滤、浓缩至生药含量约为10 mg/ml,将5种药物分别溶于液体石蜡,置于冰箱备用。
经实验室确诊为患有螨虫病的宠物犬,从严重感染的患病部位收集痂皮置于玻璃平皿中,用柔软的昆虫分离针挑取成虫虫体120只备用,显微镜下鉴定120只虫体均具有较强的活力。
将60只螨虫随机分为6组,每组10只,在24孔细胞培养板中每孔放入1组螨虫,60只螨虫共放置于6个孔中,前5孔为中药制剂组,分别滴加溶于液体石蜡的花椒制剂、蒜酊合剂、复方制剂、复方橘皮素、小兰杜制剂水煎药液0.1 ml。第6孔为对照组,滴加液体石蜡0.1 ml。保证各孔中的药液与虫体充分接触,把细胞培养板置于温度为25℃、相对湿度为75%的恒温箱中保育,每隔1小时取出在显微镜下观察记录螨虫活动与死亡情况,当虫体完全不动、对刺激没有任何反应时判定为死亡。
将生药含量为10 mg/ml的花椒制剂2倍倍比稀释成5个浓度,即10 mg/ml、5 mg/ml、2.5 mg/ml、1.25 mg/ml、0.63 mg/ml。将剩余60只螨虫随机分为6组,每组10只,分别放置于24孔细胞培养板的6个孔中,前5孔为花椒制剂不同使用剂量组,分别滴加溶于液体石蜡的10 mg/ml、5 mg/ml、2.5 mg/ml、1.25 mg/ml、0.63 mg/ml花椒制剂水煎药液0.1 ml。第6孔为对照组,滴加液体石蜡0.1 ml。保证各孔中的药液与虫体充分接触,把细胞培养板置于温度为25℃、相对湿度为75%的恒温箱中保育,每隔1小时取出在显微镜下观察记录螨虫活动与死亡情况,统计分析花椒制剂不同使用剂量对螨虫的杀灭时间。
由表1可知,花椒制剂、蒜酊合剂、复方制剂、复方橘皮素、小兰杜制剂5种中药制剂将试验螨虫全部杀死的时间分别为4 h、6 h、5 h、7 h、6 h,而对照组在12 h后试验螨虫存活率仍达80%。表明5种中药制剂对宠物犬螨虫均具有一定的杀灭效果,且花椒制剂对宠物犬螨虫的杀灭效果最好。
表1 中药制剂对螨虫体外存活的影响
由表2可知,当花椒制剂浓度在5 mg/ml及以上时,可在4 h内将螨虫100%灭杀;当花椒制剂浓度为2.5 mg/ml时,可在8 h内将螨虫100%灭杀;当花椒制剂浓度为1.25 mg/ml时,可在11 h内将螨虫100%灭杀;当花椒制剂浓度为0.63 mg/ml时,在12 h内对螨虫的灭杀率仅为50%。表明随着花椒制剂浓度的降低,花椒制剂对螨虫的杀灭时间逐步延长,为确保灭杀效果、缩短灭杀时间,应保持花椒制剂浓度在5 mg/ml以上。
表2 花椒制剂不同剂量对螨虫体外存活的影响
近几年随着我国宠物行业的快速发展,犬皮肤性疫病的发病率呈现出逐年升高的趋势,而在宠物犬的诸多皮肤病中,有一半以上是犬螨虫病。中药不产生耐药性,在自然界中可自行降解,不存在药物长期残留和环境污染问题,且中药在治疗动物疾病的同时能够提高动物机体的免疫力和抗病力,达到标本兼治的效果。因此,中药在宠物犬螨虫病的防治中具有广阔的开发应用前景。本研究结果表明:花椒制剂、蒜酊合剂、复方制剂、复方橘皮素、小兰杜制剂5种中药制剂对宠物犬螨虫均具有一定的杀灭效果,但以花椒制剂对宠物犬螨虫的杀灭效果最好,该结论与谭德展等[4]进行的五种中药制剂对兔螨虫杀灭效果的研究表现出了高度的相似性。谭德展等[4]比较分析了花椒制剂、苦参水煎剂、苦楝皮水煎剂、明雄散、擦疥散5种中药制剂对兔螨虫离体成虫的体外灭杀作用,结果表明花椒制剂的杀螨效果最好。同时,本研究进一步分析了花椒制剂不同使用剂量对宠物犬螨虫的杀灭效果,表明随着花椒制剂浓度的降低,其杀灭螨虫所需时间逐步延长,为确保灭杀效果,应保持花椒制剂浓度在5 mg/ml以上。当然,本研究确定的花椒制剂使用剂量是针对离体螨虫而言,由于螨虫在离体情况下受到外界环境应激的影响,其活力越来越低,故在临床中应用花椒制剂治疗宠物犬螨虫病时还需要根据实际情况进一步确定使用剂量和杀灭时间,切记盲目使用。总之,本研究通过体外离体试验筛选出了对宠物犬螨虫具有良好杀灭效果的中药制剂,并明确了花椒制剂体外使用剂量和杀灭所需时间,为中药在宠物犬螨虫防治中的应用奠定了基础。