高效液相色谱法测定面膜中荧光增白剂CXT

张春芳，李子谦，汪 宁

（黑龙江工业学院 资源工程学院，黑龙江鸡西 158100）

荧光增白剂是一种荧光染料，又称为白色染料，也是一种复杂的有机化合物。它的特性是能激发入射光线产生荧光，使所染物质获得类似萤石的闪闪发光的效应，即荧光增白剂将不可见的紫外光转换为可见的荧光从而使肉眼看到的物质变白[1]。目前有诸多学者对于荧光增白剂的危害性毒理性进行实验研究，如荧光增白剂致仓鼠卵巢细胞微核形成与基因突变研究[2]等。荧光增白剂使用较广，适用在洗涤剂、纺织、纸张、塑料及防伪印刷、荧光探测等领域。

面膜是护肤品的一个类别，常用于皮肤补水，也具有保湿、滋润、营养、改善外观、深层清洁等多种功能。面膜可按其对面部皮肤的功效、适用面部皮肤类型、面膜的形式等进行分类，有些种类面膜有效使用后，可清洁美白提亮面部皮肤颜色，正因为这种清洁美白的功效，使得部分消费者对美白面膜青睐有加，市场需求量大，一些不法商家向面膜中添加荧光增白剂达到美白效果。

目前，纸张、蘑菇、面粉、洗涤用品等各类样品中荧光增白剂的检测方法有分光光度法、紫外灯照射法、高效液相色谱法等。如高效液相色谱法测定棉织物中种荧光增白剂[3]、反向毛细管电泳-激光诱导荧光快速分析面粉中的荧光增白 剂[4]、微波萃取高效液相色谱法测定塑料中荧光增白剂[5]。本文通过Agilent 1200液相色谱仪，以面膜中可能违禁添加的荧光增白剂CXT为检测对象，建立分析测定方法，该方法操作简单，可行性高。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

Agilent 1200液相色谱仪，Agilent Zorbax Eclipse 300SBC18色谱柱，G1321A荧光检测器，KQ-700DB型超声波清洗器，0.22μm滤膜；超纯水，乙醇，乙腈；荧光增白剂CXT，化学式C40H38N12O8S2Na2，使用过程中较少量就可达到显著的着色力及增白提亮效果，在产品中不容易迁移稳定性高，色调为微青色；实验用面膜通过网络平台统一采购。

1.2 色谱条件

本实验需要确定的高效液相色谱条件包括流动相种类、流动相比例、流速、荧光增白剂CXT激发波长与发射波长、色谱柱类型、实验色谱柱温度等。其中，流动相选择包括水、乙腈、甲醇，实验确定最佳流动相为乙腈/水；乙腈与水的比例满足100%条件下，调整乙腈溶液比例由5%至90%过程中，当乙腈溶液配比为60%时目标分离效果佳峰形尖锐，流动相流速0.8mL/min满足实验要求；荧光增白剂CXT用150mm和250mm两种类型色谱柱进行分离实验，参数为（150×4.6mm，5μm）柱子温度设置为25℃可在1.4min内将荧光增白剂CXT很好分离；过程中Em=430nm，Ex=350nm，进样量10μL。

1.3 阳性样品制备

黑暗条件下，荧光增白剂CXT在紫外光灯照射下会产生可见荧光，实验过程中所需要的阳性面膜样品均参照此方法制得。阳性样品制备过程中严格控制黑暗条件，确保无光以防影响荧光判断，保证室内温度和湿度恒定。用于制备阳性面膜样品的大小统一，每份阳性面膜样品制备时，为排除其他实验干扰因素，均需要同时制备3份相同样品。

2 结果与讨论

2.1 荧光增白剂CXT色谱图

根据高效液相色谱条件绘制荧光增白剂CXT色谱图如图1所示，此图是被测面膜样品中是否含有荧光增白剂CXT定性分析的依据，应用此方法检测面膜样品，若得到的色谱图中在保留时间为1.4min处有色谱峰出现，则所检测面膜样品中含有荧光增白剂CXT。配制多个标准CXT浓度，确定标准曲线为Y=111.9X-25.8，R2=0.998符合面膜分析实验 要求。

图1 荧光增白剂CXT高效液相色谱图

2.2 固-液比

面膜样品质量与荧光增白剂CXT提取溶剂用量关系即为本实验固-液比，固相以1g面膜为标准质量，液相乙醇/水（体积比为1∶2）溶液变化由15mL至30mL，固相与液相不同配比下得到的荧光增白剂CXT回收量如图2所示。图中A为液相15mL、B为液相20mL、C为液相25mL、D为液相30mL，从图中可直观看出当液相为25mL和30mL时，回收率最大，所以固液比为面膜1g-乙醇水溶液25mL。

图2 提取效果对比

2.3 超声温度

对于荧光增白剂CXT的分析，既要考虑色谱分离时的温度，又要考虑面膜样品前处理过程时的温度，超声条件下得到回收量如图3所示，可知温度的高低对面膜样品中CXT的提取影响较大，当超声温度为30℃时效果最好。

图3 不同温度的提取效果对比

图4 不同时间的提取效果对比

2.4 超声时间

设置时间为10～40min，超声条件下时间变化量得到回收量如图4所示，可知时间也是影响面膜样品中CXT提取率的重要因素，当时间为20min时效果最好。

2.5 加标回收率及精密度

在0.50～10.0μg/mL浓度范围内按实验要求选3个水平进行添加荧光增白剂实验，得加标回收率和精密度数见表1。精密度2.9%～4.3%，回收率81.0%～88.3%，两相指标的实验数据均满足样品分析要求，该方法有较好的重现性和准确性。

表1 加标回收率及精密度

3 结论

本方法前处理采用乙醇水溶液为提取剂，超声提取荧光增白剂，操作简单，试剂易得，方法学数据合理，在检测面膜样品中可能添加的荧光增白剂CXT应用上有参考性。