阿托伐他汀治疗颈动脉粥样硬化疗效与基质金属蛋白酶－3基因多态性的相关性*

吴仕平，刘 青

（四川省遂宁市中心医院老年医学科，四川 遂宁 629000）

动脉粥样硬化斑块稳定性的降低及破裂出血风险的增加与基质金属蛋白酶3（MMP－3）水平关系密切［1－2］。WILSON 等［3］的研究表明，他汀类药物可降低患者的MMP－3 水平。MMP－3 基因位点呈多态性，目前他汀类药物对不同MMP－3 基因型患者的作用有无差异、不同MMP－3 基因型动脉粥样硬化患者经他汀类药物治疗后疗效是否存在差异鲜有报道。本研究中探讨了MMP－3 基因多态性与他汀类药物治疗动脉粥样硬化疗效的相关性，为动脉粥样硬化性心血管疾病临床治疗策略的选择提供参考。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

纳入标准：随机选取我院2018 年1 月至12 月就诊并经彩色多普勒超声检查发现颈动脉斑块的患者54例，男28 例，女26 例；平均年龄（65.32±8.04）岁。本研究通过四川省遂宁市中心医院医学伦理委员会审批，患者或家属均知晓研究方案并签署知情同意书。

排除标准：严重肝、肾功能不全；甲状腺疾病；恶性肿瘤；既往他汀类药物使用史。

1.2 方法

所有患者在改善生活方式的基础上，均口服阿托伐他汀钙片［商品名立普妥，辉瑞制药有限公司，国药准字H20051408，规格为每片20 mg（按C33H35FNO2O5计）］20 mg，每晚1 次。治疗期间密切监测肝功能、肌酶学等指标，若出现达到停药标准的药品不良反应，则停药并退出研究。所有患者均随访1 年。

1.3 观察指标

于初诊时、治疗6 个月后、治疗12 个月后，检测血脂和颈动脉斑块积分。采集空腹静脉血，检测血脂［总胆固 醇（TC）、三 酰 甘 油（TG）、低 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇（LDL－C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL－C）］。采用Philips IU22 型彩色多普勒超声诊断仪，检查双侧颈动脉内中膜厚度（IMT），将IMT≥1.1 mm 处定义为斑块形成，同侧颈动脉孤立性斑块的最大厚度相加得到该侧颈动脉斑块积分，两侧斑块积分相加得到斑块总积分［4］。

1.4 MMP－3 启动子区域－1612 位点5A16A（MMP－3 1612 5A16A）基因多态性检测

初诊时采集静脉血，采用聚合酶链反应（PCR）－限制性片段长度多态性（RFLP）分析进行基因多态性检测。使用MassARRAY Assay Design 3.0 软件设计基因特异性PCR 和检测引物。样品DNA 通过位于目标序列旁的引物进行扩增，然后进行去磷酸化和等位基因特异性引物延伸。纯化延伸产物，装入384 格式的Spectro－Chip中，并进行基质辅助激光电离飞行时间质谱（MALDITOF－MS）分析。采用Sequenom Mass－ARRAY TYPER软件（Sequenom）分析所得数据。

1.5 MMP－3 检测

采集初诊时、治疗6 个月后、治疗12 个月后的静脉血，以酶联免疫吸附（ELISA）法测定MMP－3 含量，MMP－3 活性分析试剂盒购于Biovison 公司。

1.6 统计学处理

2 结果

2.1 MMP－3 1612 5A／6A 基因型分布特点

54 例患者中，6A／6A 20 例（37.04%），5A／6A 21 例（38.89%），5A／5A 13 例（24.07%），基因型分布比较，差异无统计学意义（χ2＝0.573，P ＝0.946）。

2.2 一般资料

3 组基因型患者一般资料比较，均无显著差异（P ＞0.05）。详见表1。

表1 3 组基因型患者一般资料比较Tab.1 Comparison of the general data of patients with different genotypes among the three groups

2.3 血脂、MMP－3 水平及颈动脉斑块积分变化

结果见表2 至表4。

3 讨论

不稳定动脉粥样硬化斑块会增加不良心血管事件发生的风险［5－6］。他汀类药物通过调脂、抗炎、抗凋亡等机制抑制动脉粥样硬化斑块的形成，稳定易损斑块，从而减少心血管事件的发生［7－8］。既往研究提示，MMP－3 可加速动脉粥样硬化进展、促进动脉粥样硬化相关心血管疾病发生［9－10］。阿托伐他汀可降低急性脑梗死患者的血清MMP－3 水平、改善其生活质量［11］。降低MMP－3 水平或许是他汀类药物治疗动脉粥样硬化及相关心血管疾病的新靶点，但他汀类药物对不同MMP－3 基因型动脉粥样硬化患者MMP－3 水平的影响是否一致，目前的研究较少。如果动脉粥样硬化患者MMP－3 的基因型会影响他汀类药物的作用，则对需要长期他汀类药物治疗的动脉粥样硬化及相关心血管疾病患者进行MMP－3 1612 5A／6A 基因多态性检测就非常必要，其检测结果可以预测他汀类药物的疗效，以及指导临床医师及时调整治疗方案。

表2 治疗前后各组血脂水平比较（ ± s，mmol／L）Tab.2 Comparison of blood lipid levels in each group before and after treatment（ ± s，mmol／L）

表2 治疗前后各组血脂水平比较（ ± s，mmol／L）Tab.2 Comparison of blood lipid levels in each group before and after treatment（ ± s，mmol／L）

注：与初诊时比较，a P ＜0.05，b P ＜0.01；与治疗6 个月后比较，c P ＜0.05，d P ＜0.01。Note：Compared with those at the time of initial diagnosis，a P ＜0.05，b P ＜0.01；compared with that after six months of the treatment，c P ＜0.05，d P ＜0.01.

指标TC TG LDL－C HDL－C基因型6A／6A 5A／6A 5A／5A 6A／6A 5A／6A 5A／5A 6A／6A 5A／6A 5A／5A 6A／6A 5A／6A 5A／5A初诊时5.91±0.70 5.92±0.45 5.93±0.12 1.92±0.63 1.89±0.42 1.94±0.65 3.68±0.36 3.95±0.72 3.82±0.46 1.32±0.47 1.25±0.62 1.21±0.72治疗6 个月后4.88±0.29a 4.93±0.20a 4.95±0.25a 1.64±0.73 1.62±0.33 1.63±0.26 3.26±0.43 3.31±0.46 3.36±0.82 1.59±0.36 1.56±0.72 1.58±0.84治疗12 个月后3.79±0.36bc 3.92±0.41bc 3.89±0.83bc 1.37±0.73a 1.42±0.33a 1.33±0.26a 2.36±0.43bd 2.56±0.46bd 2.42±0.82bd 1.60±0.36a 1.63±0.72a 1.64±0.84a

表3 治疗前后各组MMP－3 水平比较（ ± s，ng／mL）Tab.3 Comparison of MMP－3 levels in each group before and after treatment（ ± s，ng／mL）

表3 治疗前后各组MMP－3 水平比较（ ± s，ng／mL）Tab.3 Comparison of MMP－3 levels in each group before and after treatment（ ± s，ng／mL）

注：与初诊时比较，a P ＜0.05，b P ＜0.01；与5A／5A 基因型比较，e P ＜0.05。表4 同。Note：Compared with those at the time of initial diagnosis，a P ＜ 0.05，b P ＜ 0.01；compared with those in patients with 5A／5A genotype，e P ＜0.05；as well as Tab.4.

基因型6A／6A（n ＝20）5A／6A（n ＝21）5A／5A（n ＝13）初诊时250.89±40.66 251.23±40.63 250.73±40.92治疗6 个月后233.27±53.41a 227.38±46.98a 233.01±48.62a治疗12 个月后194.39±51.27be 179.62±36.45be 148.29±19.58b

表4 治疗前后各组颈动脉斑块积分比较（ ± s，分）Tab.4 Comparison of carotid plaque scores in each group before and after treatment（ ± s，point）

表4 治疗前后各组颈动脉斑块积分比较（ ± s，分）Tab.4 Comparison of carotid plaque scores in each group before and after treatment（ ± s，point）

治疗12 个月后2.79±0.61be 2.85±0.70be 2.39±0.47b基因型6A／6A（n ＝20）5A／6A（n ＝21）5A／5A（n ＝13）初诊时3.89±1.16 3.75±1.09 3.80±1.11治疗6 个月后3.09±0.95a 3.20±0.83a 2.94±0.58a

颈动脉粥样硬化程度可以反映个体全身动脉粥样硬化的状况，颈动脉彩超是临床颈动脉病变检查、评估的常用手段。本研究结果显示，不同类型MMP－3 基因型患者的颈动脉粥样硬化经阿托伐他汀治疗6 个月、12个月后，颈动脉斑块积分均显著降低，且随着治疗时间的延长，斑块积分降低趋势更明显；治疗12 个月后，5A／5A 基因型患者颈动脉斑块积分低于6A／6A 及5A／6A 基因型患者。结果表明，阿托伐他汀治疗不同类型MMP－3 基因型颈动脉粥样硬化均可取得明显疗效，治疗时间越长，疗效越好，MMP－3 1612 5A／5A 基因型颈动脉粥样硬化患者对阿托伐他汀治疗可能更敏感。

血脂异常与动脉粥样硬化间存在因果关系。他汀类药物通过抑制体内胆固醇合成，促进细胞表面的低密度脂蛋白受体合成而调节体内血脂水平［12］。他汀类药物主要通过降低TC 和LDL－C，抑制动脉粥样硬化的进展［13］，降低心血管恶性事件的发生。本研究结果显示，不同MMP－3 基因型患者经阿托伐他汀治疗后，血清TC，TG，LDL－C 均下降，HDL－C 升高，且随治疗时间的延长，这种下降或上升趋势更明显，表明阿托伐他汀可调节不同MMP－3 基因型颈动脉粥样硬化患者的血脂水平，且调脂作用强弱与服药时间成正相关。治疗12 个月后，5A／5A 基因型患者颈动脉斑块积分低于6A／6A及5A ／6A 基因型患者，提示其除有改善动脉粥样硬化的作用外，还有调脂的其他效应。治疗12 个月后，5A／5A 基因型患者MMP－3 的水平明显低于6A／6A 及5A／6A 基因型患者，提示阿托伐他汀除了能通过调脂作用抑制动脉粥样硬化外，还可进一步降低5A／5A 基因型患者的MMP－3 水平，改善动脉粥样硬化。

但本研究中样本量偏少，观察时间较短，有待多中心、延长随访时间进一步研究证实。