硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂与药用气雾剂铝瓶相容性研究

肖海文，黄洁瑕，雷春华，王明巧，林文辉，2△

（1. 广东同德药业有限公司，广东 湛江 524018； 2. 国家中药现代化工程技术研究中心岭南药用芳香油分中心，广东 湛江 524018； 3. 湛江市明德医药科技有限公司，广东 湛江 524018）

直接接触药品的包装材料、容器也是药品的一部分，尤其是在药物制剂中，一些剂型本身就依附包装而存在，如气雾剂［1］。《中华人民共和国药品管理法》［2］第四十六条规定：直接接触药品的包装材料和容器，必须符合药用要求，符合保障人体健康、安全的标准。药品包装材料的选择对于确保药品质量有重要作用，不适宜的包装材料会引发药物活性成分的迁移、吸附，甚至使其发生化学反应，导致药物失效，有的还会导致严重不良反应。硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂临床主要用于缓解哮喘或慢性阻塞性肺疾病（可逆性气道阻塞疾病）支气管痉挛，以及急性预防运动诱发的哮喘，或其他过敏原诱发的支气管痉挛。其由硫酸沙丁胺醇、无水乙醇、四氟乙烷、铝瓶、定量阀门系统和喷射装置组成，使用时借助抛射剂的压力使内容物成雾状喷出，吸入后发挥治疗作用。本研究中通过提取和迁移规律研究［3－5］，考察了硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂与药用气雾剂铝瓶的相容性。现报道如下。

1 仪器、试药与药品包装材料

1.1 仪器

LC－20A 型高效液相色谱仪，配有AA－7000 型原子吸收分光光度计（日本岛津公司）；JZ－401A 型精密烘箱（苏州德瑞普烘箱制造有限公司）；F－1 型安全智能型反应高温蒸煮锅（杭州惠合机械设备有限公司）；LHH－150GSP 型药品综合稳定性试验箱（上海一恒科学仪器有限公司）；MDS－6G 型微波消解罐（上海新仪微波化学科技有限公司）。

1.2 试药

异丙醇、磷酸、三乙胺、30%双氧水、甲醇、二氯甲烷均为分析纯，四氢呋喃、乙腈均为色谱纯；超纯水由Milli－Q 超纯水系统制备；浓硝酸（含量为65%，MP级）；乙炔（含量为99.9%）；氩气（含量为99.999%）；抗氧剂168 对照品（批号为MKBVO020V，含量为98%），抗氧剂168 氧化物对照品（批号为7－YKZ－65－2，含量为100%），抗氧剂330 对照品（批号为C10028968，含量为99% ），抗氧剂1010 对照品（批号为MKBV3769V，含量为98%），抗氧剂1076 对照品（批号为MKBT6389V，含量为99%），抗氧剂2，6－二叔丁基对甲酚（BHT）对照品（批号为BCBK4892V，含量为99%），均购自Sigma－Aldrich 公司；铝标准液（质量浓度为1 000 μg／mL，批号为16070483），铅标准液（质量浓度为1 000 μg／mL，批号为16071112），锌标准液（质量浓度为1 000 μg／mL，批号为16062373），钡标准液（质量浓度为1 000 μg／mL，批号为16060613），铬标准液（质量浓度为1 000 μg／mL，批号为16072572），铜标准液（质量浓度为1 000 μg／mL，批号为16070173），镉标准液（质量浓度为1 000 μg／mL，批号为16071912），锰标准液（质量浓度为1 000 μg／mL，批号为15110672），锡标准液（质量浓度为500 μg／mL，批号为16053013），镍标准液（质量浓度为1 000 μg／mL，批号为201707003），均购自国家钢铁材料测试中心；硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂（广东同德药业有限公司，批号分别为20160201，20160202，20160301）。

1.3 药品包装材料

定量阀门（上海华瑞气雾剂有限公司，批号为141107）；铝 瓶（Presspart Manufacturing Ltd.，批 号 为PPB0009855）。

2 方法与结果

2.1 提取试验

2.1.1 抗氧剂含量测定［6－9］

色谱条件：色谱柱为Symmetry C18柱（250 mm ×4.6 mm，5 μm）；流动相为水－四氢呋喃－乙腈（1 ∶3 ∶6，V／ V／ V）；流速为1.5 mL／min；检测波长为280 nm（抗氧剂1010，1076，168，330，BHT），266 nm（抗氧剂168 氧化物）；进样量为20 μL。

内垫圈、阀体、罩杯提取液制备：分别取内垫圈、阀体、罩杯各40 个，洗净，用滤纸吸干，放入干燥锥形瓶中，分别加入20 mL 异丙醇，密封，置50 ℃烘箱中3 h，取出，放冷至室温，作为内垫圈、阀体、罩杯提取液。

含量测定：取内垫圈、阀体、罩杯提取液，经0.45 μm微孔滤膜滤过，注入高效液相色谱仪，采用标准曲线法定量测定。结果见表1。美国产品质量研究学会（PQRI）推荐吸入制剂的界定阈值（QT）为5 μg／d。本品标示量为200 揿，每日最大使用剂量为8 揿，1 个阀体的质量为471.9 mg，1 个内垫圈的质量为79.3 mg，1 个罩杯的质量为448.7 mg。阀体的分析评价阈值（AET）估值为5（μg／d）÷8（揿／d）×200（揿／瓶）÷0.471 9（g／瓶）＝264.89 μg／g，提取试验中采用20 mL 异丙醇提取40 个阀体，最终换算出阀体提取液中的AET 为250 μg／mL，按上述方法换算，内垫圈和罩杯提取液中的AET 均为250 μg／mL。阀体、罩杯和内垫圈提取液中的抗氧剂1010、1076、168、168 氧化物、330 和BHT 的检出量均低于相应AET，未产生安全性风险。

表1 内垫圈、阀体、罩杯提取液中抗氧剂含量测定结果（μg／mL）Tab.1 Content determination of antioxidant in the extracts of inner gasket，valve body and cup（μg／mL）

2.1.2 金属元素含量测定

1）金属元素测定溶液制备

阀体、罩杯材料金属元素含量测定供试品溶液：取阀体和罩杯各0.2 g，置消解罐中，加入适量硝酸与过氧化氢（4 ∶1，V／ V）的混合溶液，预消解后盖紧消解罐上盖，置微波消解仪中，程序升温至195 ℃保持60 min，降温冷却后，开盖赶酸至消解液剩1 mL，冷却后转移定容至50 mL 容量瓶中，用超纯水冲洗消解罐，一并转移入容量瓶中，用超纯水稀释至刻度，即得。

铝瓶提取液：取铝瓶，加入磷酸－三乙胺缓冲液（pH 3.5）13 mL，密封，置50 ℃烘箱中3 h，取出，放冷至室温，即得。

阀芯、弹簧、内垫圈、阀体、罩杯提取液：分别取阀芯、弹簧、内垫圈、阀体、罩杯各40 个，洗净，用滤纸吸干，放入干燥锥形瓶中，分别加入磷酸－三乙胺缓冲液（pH 3.5）20 mL，密封，置50 ℃烘箱中3 h，取出，放冷至室温，即得。

2）含量测定

取上述提取液，照原子吸收分光光度法［10］41，［11］测定铝、铅、锌、钡、铬、铜、镉、锰、锡、镍元素的含量。结果见表2至表4。ICH Q3D Guideline for Elemental Impurities［12］规定，吸入途径下，铅的人每日允许最大暴露量（PDE）为5 μg／d，钡的PDE 为300 μg ／ d，铬的PDE 为3 μg ／ d，铜的PDE 为30 μg／d，镉的PDE 为2 μg／d，锡的PDE为60 μg／d，镍的PDE 为5 μg／d。最终换算出的阀体提取液中铅的AET 为250 μg／mL，1 个阀芯的质量约为137.2 mg，按2.1.1 项下方法进行换算，最终换算结果见表3。1 个铝瓶的质量为5 058.6 mg，铝瓶提取液中铅的AET 估值 为5（μg／d）÷8（揿／d）×200（揿／瓶）÷5.058 6（g／瓶）＝24.71 μg／g，提取试验中采用13 mL酸性缓冲液提取1 个铝瓶，最终换算出铝瓶提取液中铅的AET 为9.6 μg／mL。按上述方法进行换算，最终换算结果见表4。可见，阀体、罩杯、弹簧、阀芯、内垫圈、铝瓶提取液中的铅、钡、铬、铜、镉、锡、镍元素的检出量均低于相应AET，未产生安全性风险。

表2 阀体、罩杯材料中金属元素含量测定结果（μg／g）Tab.2 Content determination of metal elements in materials of valve body and cup（μg／g）

表3 提取液金属元素含量测定结果Tab.3 Content determination of metal elements in the extracts

2.2 迁移试验

2.2.1 抗氧剂含量测定

色谱条件：同2.1.1 项下。

硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂供试液制备：取硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂样品，弃去抛射剂，将药液倒出，用超纯水将铝瓶内、铝盖和阀门等部件上残留药液洗出，合并药液，置25 mL 容量瓶中，用超纯水定容至刻度，即得。

抗氧剂固相萃取程序：固相萃取柱使用前分别用3 mL 甲醇和3 mL 水活化，取上述经前处理过的硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂供试液25 mL，以1.5 ～2.0 mL／min的流速通过固相萃取柱，随后用5 mL 超纯水淋洗，挥干，分别用5 mL 甲醇、3 mL 二氯甲烷依次洗脱，收集洗液，用甲醇稀释至10 mL。

含量测定：取3 批（批号分别为20160201，20160202，20160301）硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂样品，按不同试验条件（0 个月、加速试验［10］354－3563 个月、加速试验6 个月）进行测定，按供试品前处理方法处理样品，再按抗氧剂固相萃取程序进行操作，将抗氧剂1010、330、1076、168、168 氧化物及BHT 对照液及供试液进样测定。结果见表5。抗氧剂迁移物的AET ＝5（μg／d）÷8（揿／d）×200（揿／瓶）＝125 μg／瓶。在迁移阶段，硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂0 个月、加速试验3 个月、加速试验6 个月样品的浸出物抗氧剂1010、1076、168、168 氧化物、330、BHT 的浓度均低于相应AET，未产生安全性风险。

表5 抗氧剂在硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂中迁移试验含量测定结果（μg／瓶）Tab.5 Content determination of antioxidant in salbutamol sulfate inhalation aerosol in the migration test（μg／bottle）

表6 金属元素在硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂不同试验条件下迁移试验含量测定结果（μg／瓶）Tab.6 Content determination of metal elements in salbutamol sulfate inhalation aerosol in the migration test with different test conditions（μg／bottle）

2.2.2 金属元素在药液中的迁移试验

供试液制备：硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂弃去抛射剂，将药液倒出，用超纯水将铝瓶内、铝盖和阀门等部件上残留药液洗出，合并药液，用水定容至25 mL 容量瓶中，即得。

含量测定：照原子吸收分光光度法［4］，［10］41，［13－14］测定铝、铅、钡、铬、铜、镉、锰、锡、锌、镍元素的含量。结果见表6。金属元素迁移物的AET ＝PDE（μg／d）÷8（揿／d）×200（揿／瓶）。硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂0 个月、加速试验3 个月、加速试验6 个月样品的浸出物中铅、钡、铬、铜、镉、锡、镍元素的含量均低于相应AET，未产生安全性风险。

3 讨论

提取试验针对药用气雾剂铝瓶和阀门部件的实际包装、生产工艺条件和贮存条件等，以尽可能模拟生产、运输、贮存和使用最差条件，考察了抗氧剂和金属元素在3 批硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂中的迁移情况。药用气雾剂铝瓶由阀门部件和铝瓶组成，其中，阀门部件由阀芯（聚甲醛）、阀体（聚乙烯）、弹簧、内垫圈（氯化丁基橡胶）和罩杯（聚乙烯）组成。本研究仅针对直接接触药液的包装组件材料即铝罐、阀芯、阀体、弹簧、内垫圈和罩杯进行研究。抗氧剂168 结构为亚磷酸盐，易被氧化，在样品处理过程中会被氧化，故本试验中对磷酸盐和亚磷酸盐分别进行定量。