胶质瘤患者组织中microRNA-211 的水平及预后评估的价值

胡 骕，张 顺，黄顺骋，罗冬冬，赵海林，李 丹，彭 彪（通讯作者）

（广州医科大学附属肿瘤医院神经外科 广东 广州 510000）

在颅脑肿瘤中神经胶质瘤约占46%的比例，因神经胶质瘤的细胞侵袭性、增值性均较强，生长呈浸润性，极易对正常脑组织实施侵犯，生长较为迅速，极难全部切除，术后存在较高的复发率，死亡率高、生存时间短、预后极差[1]。现阶段虽联合手术、放化疗取得了一定进展，但效果仍不甚理想。诊疗胶质瘤的难点在于目前缺乏早期有效的诊断、治疗靶点。近几年，探寻胶质瘤预后相关标志物、治疗有效靶点的研究工作成为热点。miRNA 在真核生物中广泛存在，为内源性非编码的小RNA，常结合靶基因mRNA 对靶基因的表达实施调控。最近几年，相关研究指出，表达异常的miRNA 会对抑癌或促癌基因功能产生影响，进而对其形成和进展发挥抑制或促进作用。有关资料证实[2]，miR-21l 可对口腔癌、黑色素瘤、肝癌等发生、发展起到抑制作用。但尚未明确胶质瘤中miR-21l 的表达及其评估预后的价值[3]。本文经对胶质瘤不同级别组织、正常脑组织中miR-21l 的表达实施检测，对其病理特征展开分析，并明确其评估预后的价值，详细如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

2016 年1 月—2020 年5 月，在我院就诊的神经胶质瘤患者中选取70 例，其中男42 例，女28 例，年龄27 ～77 岁，平均57 岁，其中11 例I 级，15 例Ⅱ级，26 例Ⅲ级，18 例Ⅳ级。另取因颅脑重型损伤行减压术患者的正常脑组织20 例。院伦理委员审核批准。术前患者或家属均知晓，并签署了同意书。

纳入标准：70 例患者术后均具备5 年完整的随访资料；患者均以手术将肿瘤组织切除，术前未接受放化疗；肿瘤组织切除后将其标本置于-80℃液氮中储存，便于RNA 的分离提取[3]。

1.2 检测miR-211

借助Trizol 法完成正常脑组织、胶质瘤组织内的RNA 的提取，后以紫外分光光度计测定其浓度、纯度，在260 nm、280 nm 波长处时测定其吸光度比值，并将OD260／OD280 值计算出来，保证OD 值在1.8 ～2.1 间。以qRT—PCR 对miR-211 对两种标本中的表达水平实施检测，内参为RNU6B。样品操作重复最少3 次[4]。

1.3 随访

术后每3 个月，以电话、入院、门诊复查等方式对患者实施随访，并同步更新随访资料。

1.4 统计学方法

2.结果

2.1 microRNA-211 表达

检测qRT.PCR 结果显示，microRNA-211 在胶质瘤组织内表达水平为（0.40±0.25），相较与正常脑组织,显著为低（P＜0.05）。胶质瘤WHO 分级增高，而miR-211 表达水平降低，表明miR-211 表达水平和WHO 分级趋势为负相关性。

2.2 分析病理特征

在胶质瘤的病理组织全部样本中miR-211 表达平均水平为0.40±0.25,以此为截点分70 例患者为两组，28例高表达、42 例低表达。对其表达水平与病理特征间关系分析显示，高组织学分级、KPS 评分密切关系到低表达miR-211 的水平，而肿瘤直径、位置、患者性别、年龄等与其无关。见表1。

表1 胶质瘤脑组织病理特征分析（例，%）

2.3 预后

经分析K a p l a n.M e i e r 的结果显示，对比生存率，m i R-211 高表达组较低表达组高（P＜0.05）。为进一步明确胶质瘤患者中miR-211 表达评估预后的价值，本文分析了单因素，结果可见，高组织学分级、KPS 评分＜80 分、miR-211 低表达为预后的不良指标，见表2。

表2 脑胶质瘤患者分析单因素COX 分析

为进一步明确miR-211表达是否为预后独立的因素，经分析多因素比例可见，高组织学分级、KPS 平评分＜80 分、miR-211 低表达均为影响预后独立的危险因素，见表3。

表3 脑胶质瘤患者分析多因素COX 分析

3.讨论

在神经系统恶性肿瘤中脑胶质瘤最常见，其具备较高的恶性程度、预后较差、易复发。手术切除、放化疗为治疗该症主要的手段，其预后较差，其中高级别胶质母细胞瘤较为特别，12 ～15 个月为其生存时间。现阶段，临床尚无胶质瘤预后预测生物学有效的标志物。大量资料虽指出[5]，多种因素与其预后有关，如K P S 评分、W H O 分级等，但因患者异质性作用影响其评估的精准性。所以，对发生胶质瘤及其发展机制展开深入研究，寻求一种可准确预测其预后的标准物，进而早期诊断、治疗该症，并对其预后展开评估十分关键。

最近几年，有资料指出[6]，转录后的miRNA 水平对目标靶基因表达实施调节，对肿瘤细胞各项生理过程产生影响，如增殖、迁移、分化、凋亡等，进而发挥其抑制或促进的效果。部分文献指出[7]，肿瘤组织中miRNAs表达的水平直接关系到患者生存率，可将其作为指标预后的评价。本文主要调查了胶质瘤患者病理特征、预后与miR-211 表达间关系。

本文结果可见，miR-211 表达水平分析，胶质瘤组织较正常脑组织低，对其表达水平与胶质瘤病理特征关系展开分析显示，KPS 评分、WHO 分级与其表达水平间关系密切，而肿瘤的直径、位置、患者性别、年龄等与之无关。最后经随访结果可见，对比5 年生存率，高表达组较低表达组高，表明肿瘤组织内miR-211 低表达可作为独立因素，用于患者预后的评价。

综上所述，在胶质瘤组织中miR-211 为低表达，其表达水平直接关系到患者预后，可作为独立危险因素，用于预后的预测。