探讨标本放置时间和温度对血凝四项结果的影响

董丽侠，邱 伟，邵 华

（徐州医科大学附属第三医院检验科 江苏 徐州 221003）

随着人们生活方式与环境的变化，血栓性疾病、出血性疾病的发生率越来越高，为加强临床医生对这些疾病的诊断，进行血凝四项的检测成为重要手段，血凝四项是指凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）和纤维蛋白原（FIB），对其进行检测能够帮助医生判断患者手术前凝血功能状况、判断患者是否有出现血性疾病、监控抗凝血类药物的使用情况等[1]。近年来，需要进行血凝四项检测的患者越来越多，呈现连续增长的趋势，但是血凝四项的检测结果会受到多种因素的影响，从而进一步影响到医生的诊断。为此，必须明确不同因素对血凝四项PT、TT、APTT、FIB 结果的影响，并据此进行针对性的干预，从而提高血凝四项检测结果的准确性。

1.资料与方法

1.1 一般资料

收集2020 年5—11 月我院100 例患者的血样（血样凝固、量不准确、溶血等一律拒收）作为研究的基础资料，患者基本信息：男60 例、女40 例，平均年龄（36.51±2.10）岁，平均BMI 指数（24.26±0.53）kg/m2所有患者均排除血液性疾病。

1.2 仪器与试剂

江西富尔康实业集团有限公司的采血针，成都瑞琦科技实业股份有限公司的蓝盖血凝检测标本专用真空管，0.109 mol/L 的枸橼酸钠（1:9），LC400 低速离心机，Sysmex CA600 全自动血凝分析仪，上海太阳生物技术有限公司的血凝四项试剂。

1.3 方法

患者清晨空腹釆血，血样保存于含有0.109 mol/L 的枸橼酸钠（1:9）的凝血试管内并上下轻摇3 次；离心（3 000 r/min）10 min，将每份血样分离出的血浆分成为A、B、C、D 四组，A 组血样置于8 ℃条件下检测血凝四项，B、C 两组分别置于20 ℃、35 ℃条件下进行检测，D 组血样在20 ℃放置4 h、8 h 各进行一次检测 。

1.4 统计学分析

2.结果

2.1 不同温度对血凝四项检测的影响

在8 ℃条件下血凝四项结果与20 ℃条件下血凝四项结果无统计学差异（P ＞0.05）；35 ℃条件下血凝四项中FB、TT、APIT、PT的结果明显偏高（P ＜0.05），具体见表1。

表1 不同温度对血凝四项检测的影响（± s）

表1 不同温度对血凝四项检测的影响（± s）

注：*表示与8℃条件下检测结果相比差异具有统计学意义P ＜0.05。

组别 TT/s APTT/s PT/s FIB/g/l A 组（8℃） 16.56±1.59 33.56±2.21 12.76±1.92 3.53±0.77 B 组（20℃） 16.67±1.60 33.17±2.24 12.95±1.93 3.56±0.78 C 组（35℃） 17.92±1.98* 39.35±2.40* 14.16±2.01* 4.18±0.93*

2.2 不同时间对血凝四项检测的影响

室温环境下（20 ℃），在0 h 下血凝四项检测结果最能反映患者实际水平，与放置4 h 下血凝四项的结果无统计学差异（P ＞0.05）；8 h 下血凝四项的结果明显长于0 h的血凝四项结果（P ＜0.05），具体见表2。

表2 不同时间对血凝四项检测的影响（ ± s）

表2 不同时间对血凝四项检测的影响（ ± s）

注：#表示与0 h条件下检测结果相比差异具有统计学意义P ＜0.05。

时间 TT/s APTT/s PT/s FIB/g/l 0 h 16.56±1.59 33.56±2.21 12.76±1.92 3.53±0.77 4 h 16.62±1.81 34.60±2.40 12.95±1.86 3.36±0.58 8 h 17.90±1.87# 39.02±2.48# 14.03±1.92# 4.15±0.62#

3.讨论

有研究表明，血液标本从抽取后，凝血因子会因为存放的时间和方式的不同从而导致检验结果的差异。血凝四项监测主要用于发现和诊断先天性或后天性，原发性或继发性凝血障碍疾病，另外还主要用于抗凝治疗监测、判断溶栓治疗效果等。而其中凝血酶原时间（PT）是检查外源性凝血系统常用的筛选试验，PT 的长短主要反映了血浆中凝血酶原、纤维蛋白原及因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的水平，同时是用于监测口服抗凝药物（如：华法林）的首选指标。活化部分凝血活酶时间（APTT）是反映内源性凝血系统状况的筛选试验及临床使用肝素治疗时监测其用量的首选指标。之前有研究报道，APTT 值随着保存时间延长有逐渐升高上A 在凝血酶时间（TT）主要用于血浆中肝素或肝素类抗凝物质的检查及作为链激酶，尿激酶溶栓治疗时的监控指标。纤维蛋白原（FIB）是肝脏的分泌物，是纤维蛋白前体之一，也可作为凝血系统活化物的载体[2-4]，在多种疾病时会升高（如；血栓前状态、肾病综合征等）或者降低（如：DIC 晚期等）。故临床对于血栓性疾病、出血性疾病的诊断，多采用血凝四项检测结果，所以血凝四项检测 结果的准确性直接影响到医生用药治疗的判断与相关手术活动的开展[5]。

近年来，越来越多 的研究表明在不同的时间与温度环境下，血凝四项的检测结果会存在一定的差异。通过此次的实验显示，在8 ℃条件下血凝四项的结果与20 ℃条件下血凝四项的结果无统计学差异，35 ℃条件下血凝四项中FIB、TT、APTT、PT 的检测结果明显长于8 ℃条件下和20 ℃条件下血凝四项的检测结果（P ＜0.05），因此血样保存温度环境在8 ℃到20 ℃之间为宜[6]。此次试验还可知：室温环境下（20 ℃），在0 h 下与4 h 下血凝四项的结果无统计学差异，8 h 下血凝四项的结果明显长于0 h 和4 h 血凝四项的结果[7]。所以，随着血样保存时间的延长（＞4 h），血凝四项的结果也会随之延长，从而影响到血凝四项检测的准确度，故在进行血凝四项检测时应当在4 h 内完成，避免标本长期存放[8]，否则无法为临床提供准确可靠的结果。

此次实验表明，标本放置时间越长、温度越高将导致血凝四项的检测结果越长，应当在8 ℃到20 ℃的温度下存放标本且在4 h 之内完成检测，才能保证结果的准确性。对于一些异常的检验结果，应该积极主动与临床联系，了解询问患者的病情，必要时考虑重新抽血复查，以确保检验结果的准确性，尤其是住院病人一般由夜班护士早上七点左右统一抽血，而八点以后才陆续开始送到检验科，这就要求我们检验人员接到标本后及时离心标本尽快检测，标本量大时不能及时检测的标本可以离心好暂时放在4℃冰箱保存，同时要求临床尽快送标本，把人为因素影响降到最低，为临床的诊断治疗提高可靠的依据。