葡萄树枝水浸液的乳酸菌适宜性研究

伊力哈木·托合迪，苏 敏，努尔再丽，刘小琴，马海霞

和田师范专科学校理学院，新疆和田市 848000

0 引言

乳酸菌具有多种益生功能，不仅能够调节机体的免疫系统，维持肠道菌群平衡；还具有一定的抗氧能力，能够清除肠道内的活性氧分子，使机体保持在相对稳定的状态[1，2]。而植物源益生菌发酵产品正在进入主流消费领域，越来越多针对植物蛋白发酵的菌种被大规模开发并产业化应用[3]。对葡萄树伤流液的研究发现，其对植物乳酸菌具有很强的适应性[4]，该适宜性源于葡萄树伤流液特殊的抗氧性和特有的成分[5]。但葡萄树伤流液作为从葡萄树中流溢出的液体，具有季节性，易污染，收集难，抗氧剂含量低[6，7]等问题，限制了其应用开发研究。本文进行了资源更丰富，更容易收集，活性物质含量更高的葡萄树枝的水浸液对乳酸菌的适宜性研究。将葡萄树枝切碎进行浸泡，向浸泡液加入乳酸菌的营养物质制备乳酸菌培养基[8]，检测其吸光度和酸性的变化，为稳定培养乳酸菌提供参考。

1 试验材料和方法

1.1 试验仪器

752紫外可见分光光度计，pHS-3C型pH计，玻璃仪器气流烘干器，HH-6S数是恒温水浴锅，舜守恒平仪器，KQ5200DE型数控超声波清洗器，精密增力电动搅拌器。

表1 葡萄树枝取样用量及其用量比例

表2 葡萄树枝水浸泡液在不同时间的pH 值变化

表3 葡萄树枝浸泡液在不同时间的吸光度（A。）变化

1.2 试验材料

剪下生长5 年的葡萄树枝，去皮干净，不留外皮，用蒸馏水洗净后将其切成小块。浸泡在自来水或蒸馏水中，制备葡萄树枝水浸液样品（表1）。

1.3 试验方法

首先葡萄树枝在蒸馏水（自来水）中浸泡72 h，测定其pH值和波长在610 nm时的吸光度；其次用精密增力电动搅拌器进行搅拌，将其放置一段时间后，测定pH值与吸光度；浸泡之后第9天，加热30 min进行杀菌，再进行过滤，向过滤后的水浸液样品1、2、3中，加入该水浸液质量为5%的乳酸菌的营养物质，制备乳酸菌培养基1、2、3；在不同的时间段里，用pH酸度计测定培养基1、2、3和样品4的酸度变化，用紫外可见分光光度计测定培养基1、2、3、4在610 nm时的吸光度变化。

2 试验结果

通过各培养基的吸光度值变化（表2）可知，随着时间的推移，乳酸菌培养基的吸光度逐渐增大，说明乳酸菌的菌数增加，在第30天时，其吸光度达到最大值，乳酸菌数达到最高值1.46×106CFU；之后随时间的增长，吸光度缓慢递减，说明乳酸菌开始凋亡，但其变化速度非常缓慢，说明葡萄树枝水浸液乳酸菌培养基稳定性高；通过各培养基的pH值变化（表2）可知，乳酸菌培养基的pH值在一直在不断的降低，显示乳酸菌已成为了优势菌，不断生产乳酸，即培养液一直保持均匀稳定的状态。

3 结论

葡萄枝水浸液对乳酸菌具有很强的适宜性，在葡萄枝水浸液中加入营养物质的第1、2、3组，吸光度逐渐增加，pH值逐渐减小，而未加营养物质的葡萄树枝水浸液第4组的吸光度变化和pH值变化很不稳定，说明，一是变化和水质没有直接关系；二是葡萄树枝水浸液仅缺乏碳源性营养物，只要补充一定的营养物质就可以成为乳酸菌培养基，使其中的乳酸菌成为优势菌，故葡萄树枝水浸液对乳酸菌有很强的适宜性，具有一定的开发应用价值。