AD7C-NPT在无锡地区的阿尔茨海默病中的应用分析

蒋为 顾佳佳 丁兆生 刘熙 施燕 冯非雨 周衍

【关键词】 阿尔茨海默病; AD7C-NTP;检测

阿尔茨海默病（alzheimer's disease，AD）又叫老年性痴呆，是一种起病隐袭、慢性进行性发展的神经退行性疾病。随着老年化社会进程的高速发展，AD已成为继心脏病、癌症、中风之后，导致老年人死亡的第四大病因，成为本世纪威胁人类健康的最严重的疾病之一[1-2]。为了唤起公众对AD的关注和重视，世界卫生组织（World Health Organization，WHO）将每年的9月21日确定为国际老年痴呆日，中国政府将每年的9月17日确定为 “中华老年痴呆防治日。据统计，在中国，65岁以上老年人的AD平均患病率为5.21%，75～85岁老年人患病率为15%～20%，85岁以上的老年人患病率可高达30%，给社会主义社会的健康发展带来极大的压力[3]。

AD相关神经丝蛋白（AD7C-NTP）是一种相对分子质量为41000的跨膜磷蛋白，属于神经丝蛋白家族。AD7C-NTP自神经元胞体中表达后，广泛存在于神经细胞发生的轴突中，并大量出现在AD 患者脑中的NFTs 里，呈分泌性上调表达。研究表明，AD7C-NTP 在神经元中的沉积在神经元变性早期即可出现，并且发生在NFTs形成之前，在早期AD 患者的脑组织抽提物、脑脊液、尿液中均可以检测到AD7C-NTP蛋白。同时，AD7C-NTP蛋白的含量水平随病程延长和痴呆严重程度呈正相关逐渐增高，这可能是由于AD患者脑组织NTP 免疫活性及信使RNA表达增强，导致神经元细胞凋亡增多，继而使死亡细胞释放大量的AD7C-NTP。进一步发现，在尿液中检测AD7C-NTP蛋白的浓度，与在和脑脊液的检测具有相同的效果[2-4]。尿液检测，方便取样，接受度高，无创检测具有较好的基层推广和市场应用价值。

AD是一个典型的慢性疾病，严重影响患者本人和及其家属的生活质量，尽早发现、积极干预，可以有效缓解AD的发病进程，提高患者及家人的生活质量，减轻家庭和社会巨大的经济负担，提高居民的生活质量，符合经济建设和社会发展的需求。AD7C-NTP指标在临床鉴别上有较多应用[5-6]，但鲜有报道作为筛查指标，评判在社区健康体检中的意义。本研究以江苏省无锡市内的社区老人作为研究对象，组织定量检测受检人群的尿液中AD7C-NTP蛋白含量，评判AD7C-NTP在社区筛查中的应用价值，为无锡地区老年人群 AD 的风险预测、早期诊断和积极治疗为提供一种方案，为政府机构提供政策依据。创新的探讨了尿AD7C-NTP蛋白检测在社区健康体检中筛查意义。

1 对象与方法

1.1 研究对象

阳性组为2019年6月至2020年12月在江苏省荣军医院经临床确诊为AD的患者（所有入组人群均需有详细的病史采集、专科诊断、行头颅CT或MRI检查，进行神经精神量表评价等）最终，共收集有轻度患者有22例，中重度32例。

正常组纳入标准：（1）截止至2019年6月，在無锡市滨湖区稻香社区实际居住已满6个月或在江苏省荣军医院养老院实际居住已满3个月的志愿者;（2）年龄≥ 60岁;（3）依从性高，积极配合调查随访。排除标准：心血管器质性疾病和神经精神性疾病、无先天性痴呆和一级亲属中存在抑郁症、轻度认知功能障碍或痴呆患者。最终，共入组198例。本人或监护人对研究知情同意并签署同意书。

1.2 AD的临床评定标准

根据临床患者的表现、病史资料，根据《中国精神障碍分类与诊断标准（第3版）》[7]进行确诊;采用Hachinski缺血量表（Hachinski Ischemic Scale，HIS）排除血管性痴呆和混合性痴呆。简易智力状态检查量表（Mini-mental State Examination，MMSE）：文盲≤17分，小学≤20 分，中学及其以上≤26分;临床痴呆评定量表（Clinical Dementia Rating ，CDR） ≥1分，HIS≤4分。轻度 AD：19 分 ≤ MMSE≤26分，CDR=1分;中重度AD：MMSE<19 分，CDR≥2分。

1.3 AD7C-NTP测定

尿液AD7C-NTP蛋白检测试剂盒采购于深圳市安群生物工程有限公司。收集受检者的中段晨尿，尿液样本经尿常规检测确定合格。离心机4000 r/min离心10 min，取2 mL上清液待测。后续所有的检测步骤严格按照厂家试剂盒的说明书进行操作。

1.4 统计学处理

采用 SPSS 19.0 统计软件对数据进行分析。计量资料以（x—±s）表示，采用配对t检验。P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 尿液AD7C-NTP蛋白在正常组、AD组的浓度

轻度AD组和中重度AD组的MMSE评分均低于正常组，差异有统计学意义（P<0.05）。轻度AD组和中重度AD组的尿液AD7C-NTP浓度高于正常组，差异有统计学意义（P=0.000）。且随着AD病程的加重，MMSE评分值越低，AD7C-NTP值越高，见表1。

2.2 尿液AD7C-NTP蛋白在各年龄组的浓度

尿液AD7C-NTP蛋白浓度在正常组中的年龄差异不大，无统计学意义（P>0.05）;但在AD组的年龄间有差异，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

2.3 尿液AD7C-NTP蛋白在不同性别组的浓度

尿液AD7C-NTP蛋白浓度在正常组、AD组的性别差异均无统计学意义（P>0.05），见表3。

3 讨论

AD是一种进行性认知功能障碍的脑部变性疾病。随着社会老年化的加剧，AD发病率和死亡率逐年增加：预估计，到2030年全球AD患者将达到7470万人，2050年更将突破1.3亿人;我国AD患者人数已超过900万，占全球总病例数的1/5[8]。更令人担忧的是，绝大部分患者就诊不及时或根本不到医院诊治，很多人（包括患者本人和身边亲属）都认为患者的状况是自然衰老的结果，导致患者及家人生活质量十分低下。

AD的风险评估和早期诊断对于后期的治疗与预后十分重要，早发现早干预，能极大的延缓病程的发展，所以，找到合适的AD生物学标志物十分重要。在AD现有的诊断方法中，病理诊断被临床医学作为疾病诊断的金标准。但AD疾病为大脑病变导致，在病人生前获取脑组织进行病理检测，属于有创性检查，难以让患者及家属接受，可行性差;神经影像学检查（头部CT或MRI检查）被认为能够发现某些与AD有关的异常，但脑部异常明显的患者大多已进入AD中、晚期，达不到早诊断、早治疗的目的，特异性高灵敏度低且费用昂贵。所以目前AD的诊断主要还是依赖基于量表的使用，如简易精神状态检查量表（MMSE），长谷川痴呆量表（HDS），痴呆简易筛查表（BSSD）等，评判易受患者主观因素和临床医生经验的影响，难以作出客观的临床诊断。

目前，发现与AD 相关的标记物有淀粉样前体蛋白（amyloid precursor protein，APP）、β淀粉样蛋白（amyloid β-peptides，Aβ）、Tau蛋白、AD7C-NTP等。淀粉样蛋白（主要为Aβ40与Aβ42）是 AD 患者大脑神经损伤的一个显著生物标记物，许多研究提示血浆 Aβ蛋白是痴呆的保护因素，但与 AD 发病是否相关存在争议[9-11]。值得关注的是，神经丝蛋白（ NTPs）的发现提高了AD早期诊断的准确性，AD7c‐NTP含量的测定在社区AD的早期诊断中有较好的应用：（1）AD7c‐NTP对诊断AD，有较高灵敏度，特异度好;（2）取样方便，无创尿液检测对于社区大样本人群的早期筛查更适用。

本研究通过对无锡地区的252例人群（198例正常组，54例AD组）结果分析显示，尿液AD7C-NTP在AD组的浓度显著高于正常组（P<0.01），且随着AD病程的加重，AD7C-NTP值越高。AD7C-NTP蛋白浓度在正常组的年龄，性别和AD组性别差异不大，但在AD组的年龄有差异。分析原因可能是，AD7C-NTP与病程相关，AD患者年龄越大，AD病程越严重，所以AD7C-NTP值在AD组中与年龄正相关。

以往临床门诊是等着患者主动就诊才明确AD的诊断，一确诊往往就是进入了中晚期阶段，错过了最佳的治疗时期，给AD患者本身和其家人带来了巨大压力。通过本研究发现，尿液AD7C-NTP蛋白濃度可作为无锡地区老年人群的AD早期筛查的一种应用指标。本文将简单易取样的尿液 AD7c‐ NTP检测应用到无锡地区社区老年人群的体检筛查中，通过检测尿液中AD7c‐ NTP的含量，提示AD患病风险、做到早发现早治疗，及时干预治疗，可以延缓病程进展，大大减轻家庭及社会的经济负担和精神负担 ，给政府机构提供政策依据，符合经济建设和社会发展的需求。